[發(fā)明專利]生防菌株BS101在防治植物灰霉病中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310494922.8
• 申請日: 2013-10-18
• 公開（公告）號: CN103563995A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 尹燕妮;陳云;馬忠華
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號: A01N63/02
• 分類號: A01N63/02;A01P3/00;C12N1/20;C12R1/125
• 代理公司: 杭州天勤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于作物病害防控技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種生防菌株BS101在防治植物灰霉病中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

蘋果儲存期的灰霉病是一類由灰葡萄孢（Botrytis?cinerea?Pers.:Fr.）引起的植物真菌病害。病菌侵染后，果面呈現(xiàn)圓形或近圓形水漬狀病斑，不凹陷，隨后擴(kuò)大為淺黃色不規(guī)則形軟腐病斑。由于水分的不斷喪失，病斑表皮逐漸皺縮、凹陷，引起全果軟腐皺縮。目前，由于我國產(chǎn)后水果的儲存條件非常有限，而且對產(chǎn)后病害的防控比較薄弱，所以當(dāng)儲存環(huán)境中條件適宜時，灰霉病迅速蔓延，給蘋果的生產(chǎn)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。

在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，使用化學(xué)藥劑是防治多種經(jīng)濟(jì)作物灰霉病的主要措施，常見藥劑有多菌靈、撲海因、嘧霉胺等。但由于產(chǎn)后水果病害的防控是病害控制的最后一道防線，目前可使用的殺菌劑非常有限。此外，灰葡萄孢產(chǎn)孢量大，生長周期短，很容易對殺菌劑產(chǎn)生抗藥性，已有研究發(fā)現(xiàn)，我國灰霉病菌已對多種殺菌劑如多菌靈、撲海因等產(chǎn)生嚴(yán)重抗藥性問題。因此，對于灰霉病的防控，我們急需尋找更為有效的防治方法。此外，由于化學(xué)殺菌劑具有廣譜性，其大量使用不僅容易破壞微生態(tài)環(huán)境，而且還導(dǎo)致非靶標(biāo)抗性。

在非化學(xué)性防治措施中，生物防治為最有前途的方法之一，其具有環(huán)境友好、無農(nóng)殘、防效較好等優(yōu)點(diǎn)。目前雖已有一些灰葡萄孢拮抗微生物的報道，如藤黃灰鏈霉素（Streptomyces?luteogriseus）ECO00001(專利CN200610048662.1)、粉紅粘帚菌（Bionectria?ochroleuca）WY-1（專利CN200910072862.4）等，但尚未出現(xiàn)對芽孢桿菌的報道。另外，國內(nèi)已有利用拮抗細(xì)菌生物防治由灰葡萄孢引起的番茄和百合的灰霉病（如專利CN200610048662和CN200710014340），但尚缺乏其他作物灰霉病生防菌株的研究報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種生防菌株BS101在防治植物灰霉病中的應(yīng)用。

所述的生防菌株BS101的分類命名為枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis），完整命名為枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）BS101，已于2013年6月18日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為：CGMCC?No.7727。

該生防菌株BS101在LB培養(yǎng)基上菌落表面粗糙、不透明，呈現(xiàn)皺縮、白色，能夠形成芽孢，能移動，需氧型。

所述的植物具體可以為蘋果。

蘋果的品種可以為富士或嘎啦。

所述應(yīng)用具體包括：

（1）制備含所述生防菌株BS101的生防菌劑；

（2）將所述的生防菌劑噴施在所述的植物上。

噴施生防菌劑時，噴施至植物表面水珠流動即可。

如對蘋果灰霉病進(jìn)行防治時，可在儲藏期將所述的生防菌劑噴施在蘋果上，噴施至蘋果表面水珠流動即可，噴施結(jié)束后可將蘋果20～25℃保濕20～24h。

為達(dá)到較好的防治效果，所述的生防菌劑中，所述生防菌株BS101的濃度優(yōu)選為1×10⁸～10¹⁰CFU/mL，更優(yōu)選為1×10⁸CFU/mL。

所述生防菌劑可通過如下方法進(jìn)行制備：

（1）將所述生防菌株BS101于培養(yǎng)基中培養(yǎng)至OD₆₀₀為0.5～0.8，獲得種子液；

（2）將種子液接種于發(fā)酵培養(yǎng)液中擴(kuò)大培養(yǎng)，調(diào)節(jié)發(fā)酵液中生防菌株BS101的濃度至1×10⁸～10¹⁰CFU/mL，獲得所述生防菌劑。

所述的培養(yǎng)基可選用LB液體培養(yǎng)基。

其中，所述種子液的接種量優(yōu)選為1～2%（v/v），優(yōu)選為1%（v/v）。