[發明專利]一種靈芝融合培養方法

有效

• 申請號: 201310491732.0
• 申請日: 2013-10-18
• 公開（公告）號: CN104541938B
• 公開（公告）日: 2018-06-08
• 發明（設計）人: 徐序坤;徐璟;徐珣
• 申請（專利權）人: 杭州常青保健食品有限公司
• 主分類號: A01G18/00
• 分類號: A01G18/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種靈芝融合培養方法，其特征在于：包括如下步驟：

(1)制作試管培養基：將PDA培養基或改良PDA培養基用分裝器裝入試管中，裝量為試管長的1/5，塞上棉塞， 置滅菌鍋中，在0.15MPa壓力下滅菌15min，將試管趁熱排放在斜面板上自然冷卻；

(2)制作母種：在無菌條件下切取靈芝菌蕾其內部菌柄尖端處直徑2mm～3mm的組織塊，接種到試管培養基上，在26℃～28℃條件下培養25d～35d，至菌絲長滿斜面即進行菌絲純化，制成母種；

(3)擴制母種：在無菌條件下將母種以1：6進行轉管，置26℃～28℃環境中培養，菌絲滿管后，作擴制母種；

(4)制作原種：

A1、制取培養基料：取木屑、麩皮、石膏、棉籽殼中的幾種營養質成分配制成培養 基料；

B1、裝料滅菌：將培養基料裝入原種瓶中，至瓶4/5處，上緊下松，料面壓平壓實，用生活飲用水洗凈瓶身和瓶口，擦干瓶口后，用棉塞封口并包扎牛皮紙，進行滅菌處理；

C1、接種：冷卻至28℃以下，在無菌條件下接種，每支試管的擴制母種接5瓶～6瓶；

D1：培養：將接種的原種瓶放置到培養室中培養39d～42d至菌絲長滿瓶，制成原種；培養室內溫度控制在26℃～28℃之間，空氣相對濕度65％～70％；

(5)制作栽培種：

A2、制取培養基料：取木屑、麩皮、石膏、棉籽殼中的幾種營養質成分配制成培養 基料；

B2、裝料滅菌：將培養基料裝入栽培種袋中，至袋3/5處，上緊下松，料面壓平壓實，用清水洗凈袋身和袋口，擦干袋口后，套好頸圈用棉塞封口并包扎牛皮紙，進行滅菌處理；

C2、接種：冷卻至28℃以下，在無菌條件下接種，每瓶原種接45袋～50袋；

D2：培養：將接種的栽培種袋放置到培養室中培養39d～42d至菌絲長滿袋，制成栽培種；培養室內溫度控制在26℃～28℃之間，空氣相對濕度65％～70％；

(6)栽培：

(F)菌椴制作：將椴木枝條截段捆扎放入栽培袋中，進行滅菌處理；

(G)接種發菌：將經過滅菌處理的栽培袋移入經消毒處理的接種室，將栽培種接入栽培袋中接種培養2～3個月，至椴木外表面全部發滿菌絲體；所述培養室溫度控制在22℃～28℃之間，空氣濕度控制在65～70％之間，光照控制在200～300勒克斯之間，二氧化碳濃度低于1‰；

(H)覆土出芝：將發滿菌絲體的椴木脫袋放置到大棚中的壟溝中，上面覆土2cm～3cm，培養45～50天，得到子實體；大棚溫度控制在25℃～28℃之間，空氣濕度控制在80～95％之間，光照控制在2000-4000勒克斯之間，二氧化碳濃度低于1‰；

(I)融接：取栽培種菌塊，破碎，用保鮮薄膜包好成型，培養5～7天得到菌絲體，備用；

待子實體長至高為12cm～15cm時，將子實體頂端細嫩處切去，取菌絲體菌塊2～3cm接種到子實體上，用塑料薄膜覆蓋5～7天，待子實體與菌絲體全部融合，去掉塑料薄膜，空氣濕度保持在85％～95％，再長40～50天，至靈芝菌蓋直徑達到15cm～20cm，菌蓋厚度達到5cm～8cm，菌絲體全部覆蓋整個子實體，孢子粉的營養成分全部留在子實體中，再培養30天左右，待菌蓋變紅，成熟即可采收；

(7)烘干包裝。

2.根據權利要求1所述的靈芝融合培養方法，其特征在于：所述PDA培養基，用馬鈴薯200克去皮切片，置容器內加水1000mL，煮沸15min后過濾，加入17克～20克瓊脂，補水至1000mL，繼續加熱溶解；待瓊脂溶解后，加入葡萄糖20克攪拌均勻后制成。

3.根據權利要求1所述的靈芝融合培養方法，其特征在于：所述改良PDA培養基，用馬鈴薯200克去皮切片，置容器內加水1000mL，煮沸15mi n后過濾，加入17克～20克瓊脂、3克KH₂PO₄、1.5克MgSO₄·7H₂O，補水至1000mL，繼續加熱溶解；待瓊脂溶解后，加入20克葡萄糖攪拌均勻后制成。