[發明專利]酶輔助超聲法提取蒙藥瞿麥總皂苷的方法

有效

• 申請號: 201310490457.0
• 申請日: 2013-10-18
• 公開（公告）號: CN103520252A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發明（設計）人: 陳建平;布仁;朱曉偉;額爾敦;馬嵐;杜艷青
• 申請（專利權）人: 內蒙古醫科大學
• 主分類號: A61K36/36
• 分類號: A61K36/36
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及藥物成分提取領域，特別地，涉及瞿麥總皂苷的提取。

背景技術

瞿麥Dianthus?superbus?L，別名十樣景花、竹節草花、山瞿麥、剪絨花，蒙藥名：高優-巴沙嘎。石竹科多年生草本植物，全草入藥，性苦、寒、辛、無毒。具有利尿通淋，破血通經。用于熱淋，血淋，石淋，小便不通，淋瀝澀痛，月經閉止，是蒙醫常用藥之一。瞿麥皂苷具有免疫作用，能抑制人體B細胞免疫球蛋白的分泌；還具有抑菌殺蟲作用。瞿麥的水和乙醇提取物對大腸桿菌、副傷寒沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、枯草桿菌和變形桿菌均有抑制作用；抗脂質過氧化；興奮子宮；溶血作用；具有心血管藥理活性，表現為提高漿膜的滲透性、正性肌力、抗心律失常、舒張血管、降低血壓、止痛、抗高膽固醇和保護毛細血管等作用。本實驗采用酶輔助超聲法提取蒙藥瞿麥中總皂苷，酶能夠破壞植物細胞壁，使有效成分快速溶出，而超聲波產生的振動作用加強了胞內物質的釋放、擴散和溶解，從而顯著提高提取效率?？傇碥盏臏y定方法有重量法,UV,TLCS,HPLC,GC-MS法。目前對蒙藥瞿麥總皂苷的工藝研究和含量測定尚未見報道

發明內容

本發明提供了一種酶輔助超聲法提取蒙藥瞿麥中總皂苷的方法,具體包括步驟：稱取瞿麥粉末，按重量體積比1：10加入石油醚于50℃水浴加熱回流2h,過濾，干燥至無石油醚味，按與瞿麥粉末重量體積比1：30（料液比）加入pH為6.0的HAc-NaAc緩沖液，浸泡30min，按與瞿麥粉末重量比1:4(g:mg)加入淀粉酶，60℃水浴加熱30min，然后于95℃水浴滅酶10min，取出后放置至室溫，超聲功率180W，超聲15min，過濾，濾液用水飽和正丁醇以等體積萃取。

本發明提供了一種新的高效的瞿麥總皂苷的提取方法，同時發明人發現，淀粉酶的用量、超聲功率、時間、料液比四個因素對提取效率有著重大的影響，因此創造性的確定了最佳的提取工藝，同時發明人還發現，發明也發現石油醚回流、緩沖液浸泡等工藝步驟對于提取效率也有一定的影響，也同時確定了最佳的技術參數。

附圖概要說明

圖1：對照品與供試品光譜疊加圖

圖2：標準曲線圖

圖3：酶用量對皂苷提取率的影響，由圖3可知，當酶用量為4mg時總皂苷含量最大，故選取2，4，6mg三個較優的水平做正交試驗。

圖4：料液比對總皂苷提取率的影響，由圖4可知，在料液比為1:30時，皂苷含量最大，故選取1:25，1:30，1:35三個較優的水平做正交試驗

圖5：超聲時間對瞿麥提取率的影響，由圖5可知，在超聲時間為20min時，皂苷含量最大。故選取15，20，25min作為三個較優的水平做正交試驗。

圖6：超聲功率對總皂苷提取率的影響，由圖6可知，超聲功率為160W時，皂苷含量最大，故選取140，160，180W作為三個較優的水平做正交試驗。

具體實施方式

實施例1

精密稱取蒙藥瞿麥粉末1.0g，加10mL石油醚于50℃水浴加熱回流2h,過濾，干燥至無石油醚味，將其置于錐形瓶中，加入pH為6.0的HAc-NaAc緩沖液30mL（即料液比1:30），浸泡30min，按最佳工藝條件加入4mg的淀粉酶，60℃水浴加熱30min，然后于95℃水浴滅酶10min，取出后放置至室溫，超聲功率180W，超聲15min。過濾，濾液與水飽和正丁醇以等體積萃取，萃取三次，合并濾液，揮干，用無水乙醇洗出，定容至25mL。

實施例2，工藝優選參數的確定

1儀器與試藥

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