[發(fā)明專利]自臍帶羊膜分離和培養(yǎng)干/祖細(xì)胞及其分化的細(xì)胞的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310489528.5
• 申請(qǐng)日: 2006-10-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103555655B
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-02-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: T-T·潘
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 細(xì)胞研究私人有限公司
• 主分類號(hào): C12N5/071
• 分類號(hào): C12N5/071;C12N5/077;C12N5/0775;C12N5/0735;A61K35/39;A61K35/32;A61P3/10;A61P19/08
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所11247
• 代理人: 史文靜,黃革生

1.產(chǎn)生胰島素-生產(chǎn)細(xì)胞的方法，其包括：

●培養(yǎng)自臍帶羊膜分離的間充質(zhì)干/祖細(xì)胞或上皮干/祖細(xì)胞，其中所述間充質(zhì)干/祖細(xì)胞或上皮干/祖細(xì)胞具有分化成多種細(xì)胞類型的能力，并且其中所述間充質(zhì)干/祖細(xì)胞或上皮干/祖細(xì)胞表達(dá)下列基因：POU5f1、Bmi-1、白血病抑制因子，并且分泌激活蛋白A和促濾泡素抑制素，和

●在合適的培養(yǎng)基中增殖和分化所述細(xì)胞成β-胰島細(xì)胞。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其還包括

●分離通過(guò)所述β-胰島細(xì)胞生產(chǎn)的胰島素。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中所述合適的培養(yǎng)基包含煙酰胺。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中所述培養(yǎng)基還包含用于β-胰島細(xì)胞培養(yǎng)的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。

5.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其中所述培養(yǎng)基還包含生長(zhǎng)因子或小牛或牛來(lái)源的胎血清。

6.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其中所述培養(yǎng)基還包含胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白和亞硒酸。

7.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中所述生長(zhǎng)因子選自表皮生長(zhǎng)因子、胰島素樣生長(zhǎng)因子-1、血小板衍生生長(zhǎng)因子-BB、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β、角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子、TGF-α和雙調(diào)蛋白。

8.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其中所述用于β-胰島細(xì)胞培養(yǎng)的生長(zhǎng)培養(yǎng)基選自-角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)基、MEGM-乳房上皮細(xì)胞培養(yǎng)基、培養(yǎng)基、Green’s培養(yǎng)基、CMRL1066、M171、L-15培養(yǎng)基、Dulbecco’s改良Eagle培養(yǎng)基(DMEM)、DMEM-F12和RPMI培養(yǎng)基。

9.產(chǎn)生成骨細(xì)胞的方法，其包括：

●培養(yǎng)自臍帶羊膜分離的間充質(zhì)干/祖細(xì)胞，其中所述間充質(zhì)干/祖細(xì)胞具有分化成多種細(xì)胞類型的能力，并且其中所述間充質(zhì)干/祖細(xì)胞表達(dá)下列基因：POU5f1、Bmi-1、白血病抑制因子，并且分泌激活蛋白A和促濾泡素抑制素，和

●在合適的培養(yǎng)基中增殖和分化所述細(xì)胞成成骨細(xì)胞。