[發明專利]殺蟲的蛋白質

有效

• 申請號: 201310489075.6
• 申請日: 2008-03-26
• 公開（公告）號: CN103588865A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發明（設計）人: 霍普.哈特;詹格.S.陳;謝里爾.斯泰西;弗雷德里克.沃爾特斯
• 申請（專利權）人: 先正達參股股份有限公司
• 主分類號: C07K14/325
• 分類號: C07K14/325;C12N15/32;C12N15/63;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/82;A01H5/00;C12P21/00;A01N47/44;A01P7/04
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 封新琴

1.工程化的雜合殺蟲蛋白質，其從N端到C端的方向包括第一蘇蕓金芽胞桿菌（Bt）Cry蛋白質的N端區域，該N端區域與不同于所述第一Bt?Cry蛋白質的第二Bt?Cry蛋白質的C端區域相融合，其中所述第一Bt?Cry蛋白質是Cry1Ab蛋白質且第二Bt?Cry蛋白質是Cry3A蛋白質，其中在第一和第二BtCry蛋白質之間的交換位置位于保守區塊3之中且任選地包含：

(a)位于C端的Bt?Cry蛋白質的原毒素尾部區域；或者

(b)N端的肽基片段；或者

(c)(a)和(b)二者，

其中所述工程化的雜合殺蟲蛋白質包含與SEQ?ID?NO:46具有至少80%同一性的氨基酸序列，且具有針對歐洲玉米螟的活性。

2.如權利要求1所述的工程化的雜合殺蟲蛋白質，其特征在于其包括在C端的Bt?Cry蛋白質的原毒素尾部區域。

3.如權利要求2所述的工程化的雜合殺蟲蛋白質，其特征在于該原毒素尾部區域是來自針對鱗翅目昆蟲具有活性的Bt?Cry蛋白質的區域。

4.如權利要求3所述的工程化的雜合殺蟲蛋白質，其特征在于該Bt?Cry蛋白質是Cry1A。

5.如權利要求4所述的工程化的雜合殺蟲蛋白質，其特征在于該Cry1A是Cry1Aa或Cry1Ab。

6.如權利要求5所述的工程化的雜合殺蟲蛋白質，其特征在于Cry1Ab原毒素尾部區域包括38個氨基酸。

7.如權利要求6所述的工程化的雜合殺蟲蛋白質，其特征在于Cry1Ab原毒素尾部區域包括與SEQ?ID?NO:72的氨基酸611至648相對應的氨基酸序列。

8.如權利要求7所述的工程化的雜合殺蟲蛋白質，其特征在于Cry1Ab原毒素尾部區域包括SEQ?ID?NO:72的氨基酸611至648。

9.如權利要求1所述的工程化的雜合殺蟲蛋白質，其特征在于其包括在N端的肽基片段，其中所述肽基片段包括9個氨基酸。

10.如權利要求9所述的工程化的雜合殺蟲蛋白質，其特征在于所述肽基片段包括氨基酸序列YDGRQQHRG（SEQ?ID?NO:132）或氨基酸序列TSNGRQCAGIRP（SEQ?ID?NO:133）。

11.如權利要求10所述的工程化的雜合殺蟲蛋白質，其特征在于該肽基片段選自下組：SEQ?ID?NO:126、SEQ?ID?NO:127、SEQ?ID?NO:128、SEQ?ID?NO:129、SEQ?ID?NO:130、SEQ?ID?NO:131、和SEQ?ID?NO:132。

12.對如權利要求1至11中任何一項所述的工程化的雜合殺蟲蛋白質進行編碼的分離的核酸分子。

13.如權利要求12所述的分離的核酸分子，包括SEQ?ID?NO:45的核酸序列。

14.表達盒，包括異源的啟動子序列，該啟動子序列可操作地連接至如權利要求12所述的核酸分子上。

15.重組載體，包括如權利要求14所述的表達盒，其用于確保如權利要求1-11中任一項所述的雜合殺蟲蛋白質的表達或產生。

16.轉基因宿主細胞，包括如權利要求14所述的表達盒，其用于確保如權利要求1-11中任一項所述的雜合殺蟲蛋白質的表達或產生。

17.如權利要求16所述的轉基因宿主細胞，它是細菌的細胞。

18.如權利要求16所述的轉基因宿主細胞，它是植物細胞。

19.轉基因植物，包括如權利要求14所述的表達盒，其中所述植物產生如權利要求1-11中任一項所述的雜合殺蟲蛋白質。

20.如權利要求19所述的轉基因植物，其中所述植物是玉米植物。

21.來自權利要求19所述的轉基因植物的種子，其中所述轉基因種子包含權利要求12或13的核酸分子。

22.來自由權利要求20所述的轉基因玉米植物的種子，其中所述轉基因種子包含權利要求12或13的核酸分子。