[發(fā)明專利]一種裂殖壺菌及用于生產(chǎn)二十二碳六烯酸油脂的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310487291.7
• 申請日: 2013-10-17
• 公開（公告）號: CN103602591A
• 公開（公告）日: 2014-02-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 余龍江;朱圓敏;周蓬蓬;陳偉;謝辰;王勇;錢凱
• 申請（專利權(quán)）人: 華中科技大學(xué);湖北欣和生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P7/64;C12R1/645
• 代理公司: 華中科技大學(xué)專利中心 42201
• 代理人: 曹葆青

1.一種裂殖壺菌，其分類命名為裂殖壺菌(Schizochytrium?sp)S056，于2013年9月29日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心CCTCC，保藏編號為CCTCC?M2013459。

2.一種權(quán)利要求1所述裂殖壺菌生產(chǎn)種子液的方法，其特征在于：

(a1)種子培養(yǎng)：

向種子培養(yǎng)基中接入裂殖壺菌(Schizochytrium?sp)S056，接種量體積百分比為1-5％，在搖床轉(zhuǎn)速150-220rpm、培養(yǎng)溫度22.0-28.0℃的條件下進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)，使裂殖壺菌菌種生長到達(dá)對數(shù)期，獲得種子液；

(a2)種子擴(kuò)大培養(yǎng)：

將步驟(a1)得到的搖瓶種子液進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，接種量體積百分比為1-5％，攪拌轉(zhuǎn)速150-300rpm，通氣量0.2-15.0m³/h，培養(yǎng)溫度22.0-28.0℃的條件下進(jìn)行種子擴(kuò)大培養(yǎng)，使裂殖壺菌菌種生長到達(dá)對數(shù)期，獲得種子擴(kuò)大種子液。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述步驟(a1)中的種子培養(yǎng)基組分：葡萄糖30.0-60.0g/L，酵母粉5.0-10.0g/L，蛋白胨1.0-5.0g/L，MgSO₄0.5-2.0g/L，KH₂PO₄1.0-3.0g/L。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟(a2)中種子培養(yǎng)罐內(nèi)的種子擴(kuò)大培養(yǎng)基組分：葡萄糖30.0-60.0g/L，酵母粉5.0-10.0g/L，大豆餅粉0-3.0g/L，NaNO₃1.0-2.0g/L，MgSO₄0.5-2.0g/L，KH₂PO₄1.0-3.0g/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟(a1)中種子液的培養(yǎng)周期為20-24h。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟(a2)中，種子擴(kuò)大培養(yǎng)的培養(yǎng)周期為20-24h，種子達(dá)到對數(shù)期時的pH值范圍在4.3-4.7。

7.一種利用權(quán)利要求2所述裂殖壺菌種子液生產(chǎn)二十二碳六烯酸油脂的方法，其特征在于：包括下述步驟：

(b1)發(fā)酵罐放大培養(yǎng)：

將種子擴(kuò)大培養(yǎng)液接入發(fā)酵罐中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度24-30℃，接種量體積百分比為5-10％；通過控制一定范圍的攪拌轉(zhuǎn)速，使發(fā)酵液中的溶解氧濃度維持在10-15％，當(dāng)發(fā)酵液中的溶解氧濃度開始回升，維持此時通氣量和攪拌轉(zhuǎn)速不變，同時降低培養(yǎng)溫度至15-23℃，通過流加濃度為300.0-500.0g/L的葡萄糖溶液來維持發(fā)酵液中的溶解氧濃度，當(dāng)發(fā)酵液中的溶解氧濃度對葡萄糖的響應(yīng)變低，停止流加，繼續(xù)培養(yǎng)至葡萄糖消耗完全，發(fā)酵周期80-90h；

(b2)發(fā)酵結(jié)束后收集濕菌體，得到富含DHA的油脂。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，步驟(b1)中，10L發(fā)酵罐的攪拌轉(zhuǎn)速為200-400rpm，通氣量為0.3-0.4m³/h，100L發(fā)酵罐的攪拌轉(zhuǎn)速為200-400rpm，通氣量為3.0-4.0m³/h；1000L發(fā)酵罐的攪拌轉(zhuǎn)速在150-300rpm，通氣量為12.0-15.0m³/h；10000L發(fā)酵罐的攪拌轉(zhuǎn)速在50-150rpm，通氣量為30.0-35.0m³/h。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，步驟(b1)中，開始時的培養(yǎng)溫度25.0-28.0℃，后來降低培養(yǎng)溫度至20-23℃。