[發明專利]一種高效液相色譜法測定面粉及面制品中氨基脲殘留量的方法

無效

• 申請號: 201310480062.2
• 申請日: 2013-10-15
• 公開（公告）號: CN103487529A
• 公開（公告）日: 2014-01-01
• 發明（設計）人: 宋薇
• 申請（專利權）人: 譜尼測試科技(天津)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
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技術領域

本發明涉及了食品安全檢測中一種面粉及面制品中氨基脲殘留量的檢測方法，具體涉及一種高效液相色譜法測定面粉及面制品中氨基脲殘留量的方法。

背景技術

氨基脲(semicarbazide，SEM)又名氨基甲酰肼，化學式(分子式)：CH₅N₃0，是一種白色結晶，易潮解，溶于水不溶于無水乙醇和乙醚，用于制備熱敏記錄紙上的光色染料，也用于醫藥，農藥等有機合成的中間體，用于生產呋喃西林、呋喃妥因、腎上腺色腙，氫化潑尼松、氫化可的松等藥物。也用于測定醛、酮試劑。

動物源性食品中氨基脲(semicarbazide，SEM)通常作為呋喃西林(nitrofurazone)的代謝物在獸藥殘留中檢出，其具有可疑致突變和致癌性，大部分國家規定在動物源性食品中的殘留量不得檢出。歐盟制定的檢測限為1.0μg/kg，日本于2006年5月29日起實行的肯定列表制度規定了新的檢測限為0.5μg/kg。近年來研究發現，氨基脲的來源不僅限于呋哺西林在動物體內的代謝產生，面筋增強劑偶氮甲酰胺(azodicarbonamide，簡稱ADA)水解及高溫熱解反應也產生氨基脲。偶氮甲酰胺在濕潤的條件下能夠快速的轉化為非揮發性物質聯二脲(hydrazodicarbonamide)和脲唑(urazole)，在酸性條件下二者經加熱處理可緩慢生成氨基脲。

在面粉生產過程，偶氮甲酰胺可增加面粉的口感和筋道。面制品經過高溫、濕熱加工后，其中的偶氮甲酰胺會轉化為氨基脲，長期食用會對人體的健康產生危害。

目前，我國GB2760-2011《食品安全國家標準食品添加劑使用標準》規定小麥粉中偶氮甲酰胺最大使用量為0.045g/kg。現在國家沒有面粉及面制品中氨基脲的相關檢測標準和限量要求。GB2760-2011《食品安全國家標準食品添加劑使用標準》食品工業加工助劑名單和SN/T2360.25-2009《進出口食品添加劑檢驗規程第25部分：食品工業用加工助劑》均未對食品中的氨基脲進行規定。

當前食品中氨基脲含量的檢測標準有：GB/T22987-2008《牛奶和奶粉中呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃唑酮代謝物殘留量的測定液相色譜-串聯質譜法》、GB/T18932.24-2005《蜂蜜中呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃唑酮代謝物殘留量的測定液相色譜-串聯質譜法》、農業部1077號公告-2-2008《水產品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定高效液相色譜法》。

國內外文獻中面粉及其制品中氨基脲檢測方法主要是液相色譜串聯質譜法。在酸性條件下對樣品進行水解，加入衍生試劑2-硝基苯甲醛溶液進行衍生，經乙酸乙酯提取后，用液相色譜串聯質譜進行檢測(張憲臣等.超高效液相色譜-串聯四級桿質譜聯用測定面粉中呋喃西林代謝產物氨基脲的殘留量；中國衛生檢驗雜志，2009，19(4)：715-717)。利用液相色譜串聯質譜法檢測面粉及其制品中氨基脲的殘留量前處理較為復雜，基質干擾也比較嚴重，且液相色譜串聯質譜儀價格昂貴，方法不易普及。

本方法建立了利用9-羥基呫噸為衍生試劑，高效液相色譜分離，熒光檢測器檢測氨基脲殘留量的方法。該方法應用于面粉及面制品中氨基脲殘留量的測定時，對前處理方法進行了優化，結合面粉及面制品基質的性質，利用甲醇水溶液或乙腈水溶液提取氨基脲，簡化了前處理的步驟，改進了衍生試劑的添加比例，明顯降低了衍生試劑的用量。

本發明面粉及面制品中氨基脲殘留量的測定方法，具有步驟簡單、準確度高、檢出限低等優點。

發明內容

本發明要解決的技術問題在于選擇合適的有機溶劑提取面粉及面制品中的氨基脲，降低基質干擾，同時選擇適宜衍生試劑并優化衍生試劑的添加比例。

本發明所述的的技術問題可通過以下技術方案得以解決：

1.標準工作溶液制備

用高濃度氨基脲標準儲備液，逐級稀釋成系列標準溶液，如2.00μg/mL，5.00μg/mL，10.0μg/mL，20.0μg/mL，50.0μg/mL。分別取0.5～1.0mL各濃度標準于1.5mL進樣瓶中，加入50-300μL濃度為0.02mol/L9-羥基呫噸衍生劑，1.5mol/L鹽酸溶液20-100μL，室溫下避光衍生20-30min后，待分析。

2.試樣溶液制備