[發(fā)明專利]一種水稻的甜菜堿醛脫氫酶2香味基因、分子標記的引物及篩選方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310476131.2
• 申請日: 2013-10-12
• 公開（公告）號: CN103525840A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發(fā)明（設計）人: 李建粵;時亞瓊;王俊峰;竇蘭蘭;黃菊
• 申請（專利權）人: 上海師范大學
• 主分類號: C12N15/53
• 分類號: C12N15/53;C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識產權代理有限公司 31227
• 代理人: 吳瑾瑜

1.一種水稻香味基因，其特征在于，是甜菜堿醛脫氫酶2基因，在編碼鏈起始密碼子第一個核苷酸上游-81處有3bp缺失，在上游-1314處具有8bp插入突變的水稻新的甜菜堿醛脫氫酶2基因，缺失的序列為gtc，插入的序列為aaatctag。

2.權利要求1所述水稻香味基因，其特征在于，其編碼鏈起始密碼子第一個核苷酸上游區(qū)域包含如SEQ?ID?No.1所示的核苷酸序列。

3.權利要求1所述水稻香味基因，其特征在于，其核苷酸序列包括如SEQ?ID?No.2所示的核苷酸序列。

4.權利要求1所述水稻香味基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ?ID?No.2所示。

5.一組篩選香型水稻分子標記的引物，其特征在于，所述引物用于鑒定篩選含有權利要求1～4任一項所述香味基因的水稻，上游和下游的引物序列分別含有如SEQ?ID?No.3和SEQ?ID?No.4所示的核苷酸序列；

SEQ?ID?No.3??5’-ATAATATCGGTCGAAACATTTTTATT-3’

SEQ?ID?No.4??5’-GAGAAGCTTTTACACTTTATGCACATC-3’。

6.權利要求5所述篩選香型水稻分子標記的引物，其特征在于，上游和下游的引物序列分別如SEQ?ID?No.3和SEQ?ID?No.4所示。

7.一種篩選香型水稻的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）提取水稻總DNA為模板，用權利要求5或6所述的引物進行擴增；

（2）將PCR產物進行凝膠電泳檢測；

如模板總DNA由純合非香型水稻提取，擴增產物只有198bp條帶；

如模板總DNA由純合香型水稻提取，擴增產物只有206bp條帶；

如模板總DNA由香型與非香型水稻雜交后代的雜合子水稻提取，同時具有198bp條帶和206bp條帶擴增產物；

如模板總DNA由香型水稻與非香型水稻雜交后又與非香型水稻回交的后代水稻提取，只有198bp條帶的為無香味基因純合植株；同時具有198bp和206bp條帶的為香味基因雜合類型植株；

如模板總DNA由香型水稻與非香型水稻雜交后的自交后代水稻提取，只有206bp條帶的為香味基因純合植株；只有198bp條帶的為非香味基因純合植株；

同時具有206bp和198bp條帶的為香味基因雜合類型植株；

所述的香型水稻含有權利要求1～5任一項所述香味基因。

8.權利要求7所述篩選香型水稻的方法，其特征在于，所述PCR擴增的條件為：93℃～95℃預變性5分鐘；93℃～95℃變性45秒，52℃退火45秒，71℃～73℃延伸30秒，共32～35個循環(huán)；最后71℃～73℃延伸8～12分鐘。