[發(fā)明專利]嗜硫小紅卵菌菌株、菌劑及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310475494.4
• 申請日: 2013-10-12
• 公開（公告）號: CN103525729A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉勇;張松柏;張德詠;羅香文;彭靜;譚新球;成飛雪;程菊娥;朱春暉;楊春曉;張卓
• 申請（專利權(quán)）人: 湖南省植物保護(hù)研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01C1/00;A01N63/02;A01P21/00;C12R1/01
• 代理公司: 湖南兆弘專利事務(wù)所 43008
• 代理人: 趙洪

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種細(xì)菌、菌劑及其在促進(jìn)油菜生長發(fā)育方面的應(yīng)用，具體是涉及一種嗜硫小紅卵菌菌株、菌劑及其在提高油菜發(fā)芽率和油菜產(chǎn)量方面的應(yīng)用。

背景技術(shù)

農(nóng)用化學(xué)品，包括化學(xué)殺蟲劑、化學(xué)除草劑和化肥的大量投入，降低了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的勞動強(qiáng)度，提升了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的效率，極大的促進(jìn)了現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展。然而，農(nóng)用化學(xué)品的投入，影響了農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)，破壞了農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)平衡，從而影響農(nóng)田生產(chǎn)的可持續(xù)性，降低了農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量。如化肥的不合理投入，導(dǎo)致土壤板結(jié)，降低土壤生物多樣性，影響作物產(chǎn)量和品質(zhì)；化學(xué)農(nóng)藥的不合理投入，對非靶標(biāo)毒害及農(nóng)產(chǎn)品殘留超標(biāo)，越來越受到人們關(guān)注。

微生物制劑是部分解決該問題的有效方法。然而，本領(lǐng)域的技術(shù)難題是，篩選環(huán)境友好型、高活性的微生物資源，微生物菌劑的高效發(fā)酵工藝，微生物菌劑的田間應(yīng)用技術(shù)等等。目前還沒有嗜硫小紅卵菌在促進(jìn)油菜生長發(fā)育方面的文獻(xiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種生產(chǎn)成本低，促進(jìn)油菜生長且高效、無毒、環(huán)保的嗜硫小紅卵菌菌株，另外提供一種利用嗜硫小紅卵菌制成的菌劑，及其在提高油菜種子發(fā)芽率和油菜產(chǎn)量方面的應(yīng)用。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種嗜硫小紅卵菌IV-1（Rhodovulum?sulfidophilumIV-1）菌株，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心（簡稱CCTCC），保藏編號為CCTCC?NO：M2012369，保藏單位地址位于中國武漢大學(xué)，保藏日期為2012年9月20日，該菌株被命名為嗜硫小紅卵菌IV-1（Rhodovulum?sulfidophilum?IV-1）。

本發(fā)明的嗜硫小紅卵菌菌株是通過以下方法篩選得到：將采自海南省的海水樣品加入MSYN液體培養(yǎng)基（MSYN液體培養(yǎng)基組分：0.2g/L?K₂HPO₄，0.8g/L?KH₂PO₄，0.2g/L?MgSO₄,0.1g/LCaSO₄·2H₂O，0.0033g/L?NaMoO₄·2H₂O,0.005g/L?FeSO₄·7H₂O，1.5g/L酵母膏和3g/L?NaCl，pH7.0-7.2），光照培養(yǎng)后，取菌液稀釋涂布到MSYN固體培養(yǎng)基（MSYN固體培養(yǎng)基成分：0.2g/LK₂HPO₄,0.8g/L?KH₂PO₄，0.2g/L?MgSO₄，0.1g/L?CaSO₄·2H₂O，0.0033g/L?NaMoO₄·2H₂O，0.005g/LFeSO₄·7H₂O，1.5g/L酵母膏，3g/L?NaCl，15g/L瓊脂，pH值為7.0～7.2），光照培養(yǎng)至菌落出現(xiàn)，挑取菌落形態(tài)不同的菌，分別接種到含MSYN液體培養(yǎng)基中，篩選得到嗜硫小紅卵菌IV-1。

所述嗜硫小紅卵菌菌株IV-1，具有以下主要特征：

G-，個(gè)體形態(tài)為卵桿狀，V-P反應(yīng)陽性，甲基紅反應(yīng)陰性，H₂S陽性，吲哚反應(yīng)和過氧化氫酶反應(yīng)陽性，質(zhì)量濃度為3%NaCl中能生長，最適生長溫度為30～35℃，最適生長pH值為6.5～7.5，菌體的特征吸收峰為385nm、525nm、585nm、805nm和865nm，16S?rDNA序列長度為1338bp，在Genbank中的登錄號為KF682218。

本發(fā)明還提供一種利用嗜硫小紅卵菌IV-1制成的菌液。制備方法是將該菌株接種于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)制得，菌濃度優(yōu)選為10⁸-10¹⁰cfu/mL，最優(yōu)選為10⁹cfu/mL。

具體的制備方法優(yōu)選包括以下步驟：

a.將嗜硫小紅卵菌菌株IV-1的超低溫保存種按平板培養(yǎng)法進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)至紅色菌落出現(xiàn)；平板培養(yǎng)法優(yōu)選是采用雙層MSYN固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，pH值優(yōu)選為7.0～7.2，培養(yǎng)溫度優(yōu)選為30℃～35℃，光照條件優(yōu)選為2000～3000Lx。