[發(fā)明專利]利用米黑毛霉生產(chǎn)凝乳酶的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310472404.6
• 申請(qǐng)日: 2013-10-11
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103740685A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-04-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孟乙
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 孟乙
• 主分類號(hào): C12N9/64
• 分類號(hào): C12N9/64;C12R1/785
• 代理公司: 石家莊眾志華清知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所(特殊普通合伙) 13123
• 代理人: 墨偉

1.一種利用米黑毛霉生產(chǎn)凝乳酶的方法，其特征在于包括以下步驟：

步驟A、米黑毛霉菌種活化：米黑毛霉（Mucor?miehei）菌株購(gòu)自美國(guó)模式培養(yǎng)物集存庫(kù)，編號(hào)為ATCC?No.16457，活化后菌懸液中孢子濃度不小于10¹²CFU/mL；

步驟B、配制發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)基、滅菌，接入步驟A中的菌懸液，并在38~42℃下培養(yǎng)；

步驟C、從培養(yǎng)72h起、流加可溶性硫酸鹽和還原糖的混合液，再繼續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)24h，發(fā)酵過(guò)程中100mL培養(yǎng)基含有2g還原糖，發(fā)酵得含有凝乳酶的粗樣品。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用米黑毛霉生產(chǎn)凝乳酶的方法，其特征在于步驟B中所述菌懸液的接種量為發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)基體積的萬(wàn)分之一。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用米黑毛霉生產(chǎn)凝乳酶的方法，其特征在于步驟B中所述發(fā)酵營(yíng)養(yǎng)基的配制方法為：稱取大豆粉630g，玉米粉2400g，硫酸鈉105g，葡萄糖183g，用水定容至30升。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用米黑毛霉生產(chǎn)凝乳酶的方法，其特征在于步驟B和步驟C中培養(yǎng)溫度為38℃。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用米黑毛霉生產(chǎn)凝乳酶的方法，其特征在于步驟C中100mL混合液溶有可溶性硫酸鹽與還原糖60g，其中可溶性硫酸鹽與還原糖的重量份數(shù)比為：20-200：1200。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的利用米黑毛霉生產(chǎn)凝乳酶的方法，其特征在于可溶性硫酸鹽與還原糖的重量份數(shù)比為150：1200。

7.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的利用米黑毛霉生產(chǎn)凝乳酶的方法，其特征在于所述可溶性硫酸鹽為硫酸鈉、硫酸鉀或硫酸銨，還原糖為葡萄糖。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的利用米黑毛霉生產(chǎn)凝乳酶的方法，其特征在于所述可溶性硫酸鹽為硫酸銨。