[發(fā)明專利]一種成骨分化誘導劑

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310471912.2
• 申請日: 2013-10-11
• 公開（公告）號: CN103695368A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發(fā)明（設計）人: 任艷玲;宋囡;何文智;王智民
• 申請（專利權）人: 遼寧中醫(yī)藥大學
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775;A61L27/38;A61K35/28;A61K31/352;A61P19/08;A61P19/10
• 代理公司: 沈陽利泰專利商標代理有限公司 21209
• 代理人: 劉忠達

技術領域

本發(fā)明涉及一種中藥單體化合物的用途，具體是葛根素通過ERK1/2信號誘導骨髓間充質干細胞成骨分化的用途。?

背景技術

中藥葛根是豆科植物野葛或甘葛藤的干燥根，性味甘、辛、涼，歸脾、胃經，具有解肌退熱、生津、透疹、升陽止瀉之功效。現代醫(yī)學可用于心血管系統(tǒng)疾病，并且具有一定的降血糖、降血脂、抗腫瘤、抗氧自由基及解酒作用等。其主要成分是異黃酮，包括葛根素、大豆苷、金雀異黃素和擬雌內酯等。?

葛根素(puerarin)是從野葛(Pueraria?lobata)中提取的一種黃酮苷,化學名為?4,7-羥基-8-β-D?葡萄糖異黃酮,其分子式為?C₂₁H₂₀O₉。是葛根的有效成分之一，化學結構為：?

葛根素具有多種藥理作用：

1.?葛根素對心血管系統(tǒng)的作用：抗心律失常作用，擴張血管、改善微循環(huán)作用，抗心肌缺血作用。

2.?葛根素對腦神經的保護作用。?

3.?葛根素具有抗氧化作用。?

4.?葛根素具有降血糖作用。?

5.?葛根素具有抑制骨吸收，促進骨形成作用。?

6.?葛根素具有一定的解酒作用。?

ERK?(extracellular-signaregulated?protein?kinase，ERK)為絲裂原活化蛋白激酶?(?mitogen?-activated?protein?kinase，MAPK)的一重要亞型，主要參與細胞的增殖、轉化和存活等過程。它在成骨細胞整個發(fā)育過程中均可激活,?與成骨細胞增殖和起始分化密切相關。?

目前尚未見關于葛根素通過ERK1/2信號通路誘導骨髓間充質干細胞體外成骨分化的報道。?

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的，是提供一種成骨分化誘導劑，其特征在于該成骨分化的誘導劑為葛根素。?

葛根素在體外通過ERK1/2信號通路的調控促進骨髓間充質干細胞向成骨分化，可作為骨組織工程和細胞移植的種子細胞的用途。用葛根素誘導分化骨髓間充質干細胞作為種子細胞替代成骨細胞，可避免成骨細胞體外較難獲取和高免疫原性的問題。?

骨髓間充質干細胞通過ERK1/2信號通路的調控進行成骨分化，根據葛根素的植物雌激素作用在體外誘導骨髓間充質干細胞成骨分化的成功案例，進一步分析了骨髓間充質干細胞作為新的篩選治療骨相關疾病藥物的細胞模型的機制，并為骨髓間充質干細胞成為骨組織工程的種子細胞提供理論依據。?

本發(fā)明還提供了:?葛根素在體外通過ERK1/2信號通路的調控促進骨髓間充質干細胞向成骨分化，促進骨形成防治骨質疏松。且在防治骨質疏松等骨代謝疾病的過程中以它的植物雌激素的作用代替了雌激素療法。避免了因雌激素的長期應用而導致的不良反應。將葛根素制備成治療骨疾病的藥物，聯合骨髓間充質干細胞移植來防治一些骨疾病。?

通過葛根素與經典誘導劑和雌二醇分別誘導骨髓間充質干細胞成骨分化，明確了葛根素促骨髓間充質干細胞的成骨作用。?

本發(fā)明引入了ERK1/2信號通路的特異性抑制劑PD98059共同培養(yǎng)骨髓間充質干細胞。?

各組細胞培養(yǎng)液加入PD98059后，成骨分化過程受到抑制，說明葛根素是通過ERK1/2信號通路調控骨髓間充質干細胞成骨分化。?

葛根素通過ERK1/2信號通路的調控誘導骨髓間充質干細胞成骨分化防治骨質疏松。?

骨髓間充質干細胞可避免成骨細胞體外較難獲取和高免疫原性的問題作為新的應用于骨組織工程的種子細胞。?

葛根素在骨組織工程和細胞移植的種子細胞方面的用途。?

葛根素的植物雌激素的作用在防治骨質疏松方面代替了雌激素療法，避免了因雌激素的長期應用而導致的不良反應。?

葛根素制備成治療骨疾病的藥物，聯合骨髓間充質干細胞移植防治一些骨疾病。?

附圖說明

圖1?為葛根素促BMSCs成骨分化最佳濃度和時間的篩選。相同時間與Control組比較*?p?<0.05；與YDJ組比較^▲?p?<0.05；與10^-7M?Pur組比較^★?p?<0.05。與7d時10^-7M?Pur組比較^◆◆p?<0.01，（±s?，n=8）。??