[發明專利]大鼠脊髓全橫斷損傷模型及其建立方法

無效

• 申請號: 201310471323.4
• 申請日: 2013-10-11
• 公開（公告）號: CN103505301A
• 公開（公告）日: 2014-01-15
• 發明（設計）人: 田衛東;郭維華;楊超;李星翰;孫亮
• 申請（專利權）人: 四川大學
• 主分類號: A61D1/00
• 分類號: A61D1/00
• 代理公司: 成都九鼎天元知識產權代理有限公司 51214
• 代理人: 吳彥峰

技術領域

本發明屬于醫療動物的模型技術領域，尤其是一種大鼠脊髓全橫斷損傷模型及其建立方法。

背景技術

脊髓損傷(spinal?cord?injury)是指由于外界直接或間接因素導致脊髓損傷，在損害的相應節段出現各種運動、感覺和括約肌功能障礙、肌張力異常及病理反射等的相應改變,?是目前公認的世界性疑難病之一。脊髓損傷成為亟待解決的問題，呈現高發生率、高致殘率、高耗費及低死亡率的特點，嚴重影響人們的生活質量。到目前為止,?治療并促進脊髓損傷康復的方法主要是靠藥物治療和外科手術治療。由于脊髓損傷疾病的病理復雜，這些方法在不同程度上緩解了脊髓損傷的病理改變,?但均未取得令人滿意的臨床療效。

脊髓損傷后常為兩種損傷機制，一種是原發性脊髓損傷，臨床表現為急性癱瘓，為急性脊髓損傷后，脊髓發生一系列的病理變化，包括出血、水腫、軸突及神經元的壞死和脫髓鞘，以及梗塞和囊腫的形成；另一種為繼發性損傷，為損傷后發生一系列損傷激活的自身破壞過程，如水腫的擴展，能量代謝的改變，兒茶酚胺和興奮性氨基酸的釋放，花生四烯酸、自由基等的產生使神經損傷程度逐漸加重。但實際兩種病變過程相互重疊，難以劃分明確的界限。

由于脊髓損傷的病理生理機制非常復雜，目前對該機制的認識還不夠深入和透徹，為了探索關于脊髓損傷的新的、有效的治療方式，如干細胞的移植治療，必須進一步研究脊髓損傷所涉及的病理機制及治療方案的修復機制，進而評估治療方案的有效性。這就需要建立一個有效的、可靠性和重復性好的以及損傷標準一致并易于操作推廣的動物模型。

Allen(1911年)采用重物墜落撞擊脊髓背側，開創脊髓損傷的標準化實驗。但Allen法尚存在一些問題，如挫傷脊髓的瞬間脊髓的側向偏移，導致脊髓損傷不對稱，損傷區大小不恒定。動物的癱瘓程度和持續時間出現較大的差異，從而導致損傷程度難以保持一致。

脊髓缺血再灌注損傷模型多通過阻斷腹主動脈或經腹膜后左腎動脈下腹主動脈阻斷造成，這種模型存在的不足之處是同時導致了腹腔及下肢等組織的廣泛性缺血損傷，這無疑影響了脊髓損傷及治療后的行為及功能的評估。

鉗夾壓迫性脊髓損傷模型主要是通過動脈鉗夾壓等壓迫力造成急性或慢性壓迫損傷，例如以動脈瘤夾夾持脊髓，以夾持時間長短和夾持力輕重來制造損傷程度不同的脊髓損傷模型。這種模型的缺點是鉗夾夾持的部位及夾持力大小難以保持一致，從而難以控制和評估。

綜上所述，建立一種條件可靠性高和重復性好的脊髓損傷模型對于研究脊髓損傷所涉及的病理機制及治療后的修復機制以及對行為功能學的評估有著重要的意義。

發明內容

針對以上不足，本發明的目的是提供一種大鼠脊髓全橫斷損傷模型及其建立方法。

一種大鼠脊髓全橫斷損傷模型的建立方法，包括以下步驟：

（1）注射麻醉劑，固定大鼠四肢；

（2）備皮，縱行切開背部皮膚，鈍性分離背部皮下組織，暴露相應節段脊柱；

（3）行椎板切除術充分暴露脊髓，挑起脊髓，完全橫行截斷；

（4）逐層縫合創口、創面消毒、包扎并立刻后腿肌注青霉素；

（5）術后護理。

其中，上述術后護理包括以下步驟：

a.加強營養供給，每天更換墊料；

b.?為幫助排尿及恢復排尿反射，每天按摩恥骨聯合區直至大鼠自行排尿；?

c.每天清洗大鼠腹部殘尿，吹干后消毒。

一種優選的大鼠脊髓全橫斷損傷模型的建立方法，包括：

（1）腹腔注射水合氯醛麻醉，固定大鼠四肢于板上，水合氯醛質量百分比濃度優選為10%，劑量優選為0.3?ml/100g大鼠體重，大鼠體重優選為250-300g；

（2）將胸椎對應部位備皮，縱行切開背部皮膚，鈍性分離背部皮下組織，暴露相應節段脊柱；

（3）行椎板切除術充分暴露脊髓，挑起脊髓，完全橫行截斷；

（4）逐層縫合創口、創面以聚維酮碘溶液擦凈消毒、輔以敷料包扎傷口并立刻后腿肌注青霉素，聚維酮碘溶液優選為質量體積百分比為2.5%的聚維酮碘溶液，敷料優選為醫用脫脂紗布；

（5）術后護理；

其中，術后護理步驟包括：

a.加強營養供給，每天更換墊料，墊料一般為天然木屑；

b.每天按摩恥骨聯合區直至大鼠自行排尿；

c.每天用肥皂水清洗大鼠腹部殘尿，吹干后用聚維酮碘溶液擦拭消毒，肥皂水質量體積百分比濃度優選為0.8-2%，聚維酮碘溶液質量體積百分比濃度優選為2.5%。