[發明專利]一種喹啉酮類化合物作為hCBS酶抑制劑的應用有效
| 申請號： | 201310467300.6 | 申請日： | 2013-10-09 |
| 公開（公告）號： | CN104546849B | 公開（公告）日： | 2018-06-05 |
| 發明（設計）人： | 于晶;吳方;周越洋 | 申請（專利權）人： | 上海交通大學 |
| 主分類號： | A61K31/47 | 分類號： | A61K31/47;A61P9/00;A61P9/10;A61P25/00;A61P35/00;C12Q1/527;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 上海旭誠知識產權代理有限公司 31220 | 代理人： | 鄭立 |
| 地址： | 200240 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 酶抑制劑 喹啉酮類 應用 氨基 小分子化合物 唐氏綜合癥 先導化合物 二氫喹啉 酶促反應 信號通路 治療循環 二氨基 工具藥 亞氨基 離體 羥基 休克 中風 腫瘤 疾病 開發 研究 | ||
1.一種抑制離體人胱硫醚-β-合成酶(hCBS)酶促反應的方法，其步驟如下：
步驟一、配制緩沖溶液：在酶促反應容器中配置Tris-HCl濃度為50mM，PLP濃度為100μM，hCBS-413濃度為50-500nM，L-Cys濃度為4mM，D,L-HCys濃度為4mM的去離子水溶液，pH為7.6-9.0；
步驟二、配制酶促反應混合液：將化合物7-氨基-2-羥基-5-亞氨基-6,7-二氫喹啉-8(5H)-酮分別加入到步驟一所配制的緩沖溶液中，配制成不同濃度的酶促反應混合液，形成酶促反應體系；
步驟三、配制H2S氣體檢測體系：
在H2S氣體檢測容器中，加入50μL的DTNB溶液，所述DTNB溶液為：DTNB濃度為300μM，Tris-HCl濃度為262mM，EDTA濃度為13mM，pH＝8.9的去離子水溶液，形成H2S氣體檢測體系，將氣體檢測容器置入酶促反應容器中，以使酶促反應產生的H2S氣體能夠擴散進入氣體檢測體系；
步驟四、孵育過程：
用封板膜密封酶促反應容器，在37℃下孵育60分鐘；
步驟五、化合物7-氨基-2-羥基-5-亞氨基-6,7-二氫喹啉-8(5H)-酮作為hCBS抑制劑應用效果的檢測：
在酶標儀上測定H2S氣體檢測體系在413nm下的光吸收。
2.如權利要求1所述的方法，其中，步驟一中所述pH＝8.6。
3.如權利要求1所述的方法，其中，步驟一中所述hCBS-413濃度為100nM。
4.如權利要求1所述的方法，其中，步驟二中所述化合物7-氨基-2-羥基-5-亞氨基-6,7-二氫喹啉-8(5H)-酮的濃度為4-400μM。
5.如權利要求1所述的方法，其中，步驟二中所述化合物7-氨基-2-羥基-5-亞氨基-6,7-二氫喹啉-8(5H)-酮的濃度為4μM。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于上海交通大學，未經上海交通大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201310467300.6/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
