[發明專利]大豆疫霉特異性的分子檢測引物及其應用

有效

• 申請號: 201310464140.X
• 申請日: 2013-09-30
• 公開（公告）號: CN103571946A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發明（設計）人: 趙偉;戚仁德;汪濤
• 申請（專利權）人: 安徽省農業科學院植物保護與農產品質量安全研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/06;C12Q1/04;C12N15/11;G01N21/64
• 代理公司: 安徽合肥華信知識產權代理有限公司 34112
• 代理人: 余成俊

1.大豆疫霉特異性的分子檢測引物，是以R-SNARE蛋白編碼基因Ykt6為靶標，設計出的引物，其特征在于：所述引物的1對引物序列為：

上游?(20bp)?PsYkt6?-F:?TGCGTGGCCGTGAATTGATC

下游?(20bp)?PsYkt6-R:?CTGCAGAGCGACAACAATCG。

2.如權利要求1所述的大豆疫霉特異性的分子檢測引物在大豆疫霉分子檢測上的應用。

3.一種檢測大豆疫霉的方法，其特征在于提取待檢微生物的DNA，以提取的DNA?為模板，利用權利要求1?所述的分子檢測引物進行?PCR擴增?；擴增產物進行瓊脂糖凝膠電泳，在紫外光下檢測結果，如果存在分子量約為399bp的條帶，則證明所檢病原為大豆疫霉。

4.根據權利要求1所述的大豆疫霉特異性的分子檢測引物在實時定量熒光PCR分子檢測中的應用，其特征在于：基于已定量的標準DNA樣品做出的標準曲線方程，標準品DNA濃度的對數值與Ct值之間的相關系數R²＞0.99??，定量線性回歸方程為y?=?-3.567x?+?28.879，其中y為Ct值，x為大豆疫霉菌?DNA?濃度常用對數值，為定量未知樣品的DNA提供了理論依據。

5.根據權利要求4所述的大豆疫霉特異性的分子檢測引物在實時定量熒光PCR分子檢測中的應用，其特征在于：對發病植株、污染田塊、水源進行快速實時定量熒光PCR分子檢測。