[發(fā)明專利]水稻鈣依賴性蛋白激酶基因及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310464104.3
• 申請日: 2013-10-08
• 公開（公告）號: CN103525780A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發(fā)明（設計）人: 安成才;付力文;于祥春
• 申請（專利權）人: 北京大學
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12;C12N15/54;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N15/82;A01H5/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.一種蛋白，為如下（1）或（2）所示：

（1）SEQ?ID?No.2中自N端起第1位至第390位氨基酸所示的蛋白；

（2）將SEQ?ID?No.2中自N端起第1位至第390位氨基酸所示的蛋白經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白質(zhì)。

2.權利要求1所述蛋白的編碼基因。

3.根據(jù)權利要求2所述的編碼基因，其特征在于：所述編碼基因為如下中至少一種：

1）SEQ?ID?No.1中自5’末端起第1位至第1170位核苷酸所示的DNA分子；

2）在嚴格條件下與1）限定的DNA分子雜交且編碼權利要求1所述蛋白的DNA分子；

3）與1）或2）限定的DNA分子具有90％以上的同一性且編碼權利要求1所述蛋白質(zhì)的DNA分子。

4.含有權利要求2或3所述編碼基因的重組載體、表達盒、轉(zhuǎn)基因細胞系或重組菌。

5.一種蛋白，為如下（1）或（2）所示：

（1）SEQ?ID?No.4中自N端起第1位至第332位氨基酸所示的蛋白；

（2）將SEQ?ID?No.4中自N端起第1位至第332位氨基酸所示的蛋白經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白質(zhì)。

6.權利要求5所述蛋白的編碼基因。

7.根據(jù)權利要求6所述的編碼基因，其特征在于：所述編碼基因為如下中至少一種：

1）SEQ?ID?No.3中自5’末端起第1位至第996位核苷酸所示的DNA分子；

2）在嚴格條件下與1）限定的DNA分子雜交且編碼權利要求5所述蛋白的DNA分子；

3）與1）或2）限定的DNA分子具有90％以上的同一性且編碼權利要求5所述蛋白質(zhì)的DNA分子。

8.含有權利要求6或7所述編碼基因的重組載體、表達盒、轉(zhuǎn)基因細胞系或重組菌。

9.一種制備水稻稻瘟病的抗病性增強的轉(zhuǎn)基因水稻的方法，包括如下步驟：將SEQ?ID?No.2中自N端起第1位至第390位氨基酸所示的蛋白的編碼基因或SEQ?ID?No.4中自N端起第1位至第332位氨基酸所示的蛋白的編碼基因?qū)氤霭l(fā)水稻中，得到轉(zhuǎn)基因水稻；與出發(fā)水稻相比，轉(zhuǎn)基因水稻的水稻稻瘟病的抗病性增強。

10.根據(jù)權利要求9所述的方法，其特征在于：所述編碼基因是通過表達盒導入所述出發(fā)水稻中的；

所述表達盒是通過重組表達載體導入所述出發(fā)水稻中的，所述重組表達載體是將所述編碼基因的表達盒插入載體pCAMBIA1381Xa的HindIII酶切位點間得到的；

所述表達盒按照如下方法制備：將權利要求1所述蛋白的編碼基因插入出發(fā)載體pRTL-HA的KpnI和BamHI位點間，得到中間載體；HindIII酶切中間載體，回收2365bp的片段，得到表達盒；

所述表達盒由35S啟動子、HA標簽、權利要求1所述蛋白的編碼基因和終止子組成；

或，

所述表達盒按照如下方法制備：將權利要求5所述蛋白的編碼基因插入出發(fā)載體pRTL-HA的KpnI和BamHI位點間，得到中間載體；HindIII酶切中間載體，回收2191bp的片段，得到表達盒；

所述表達盒由35S啟動子、HA標簽、權利要求5所述蛋白的編碼基因和終止子組成；

所述水稻稻瘟病是由水稻稻瘟病菌引起的；

或，權利要求1所述的蛋白、權利要求2或3所述的編碼基因在提高水稻抗水稻稻瘟病能力中的應用：

或，權利要求5所述的蛋白、權利要求6或7所述的編碼基因在提高水稻抗水稻稻瘟病能力中的應用：

所述水稻稻瘟病是由水稻稻瘟病菌引起的。