[發明專利]一種蛹蟲草培養基及其應用

有效

• 申請號: 201310462899.4
• 申請日: 2013-09-29
• 公開（公告）號: CN103539498A
• 公開（公告）日: 2014-01-29
• 發明（設計）人: 陳劍清;陳昊;葉曼
• 申請（專利權）人: 臺州康晶生物科技有限公司
• 主分類號: C05G1/00
• 分類號: C05G1/00
• 代理公司: 寧波市鄞州甬致專利代理事務所(普通合伙) 33228
• 代理人: 李迎春

技術領域

本發明涉及蛹蟲草培養技術領域，具體涉及一種蛹蟲草培養基，以及該蛹蟲草培養基在蛹蟲草培養中的應用。

背景技術

蛹蟲草（Cordyceps?militaris），又名北蟲草，隸屬于真菌界的子囊菌亞門、麥角菌科、蟲草屬。它是一種藥用真菌。蛹蟲草中含有糖、脂肪和蛋白質，此外，還含有多種氨基酸、微量元素和維生素。蛹蟲草中的多種生理活性成分具有抗腫瘤、抗菌、抗氧化、保護肝臟、增強免疫力等藥理作用。而其與腫瘤相關的活性物質包括蟲草素、多糖、蟲草酸、甾醇類、硒、類胡蘿卜素、蛋白質等。

然而，目前，人工培養的蛹蟲草產量有限，其營養成分含量低，質量參差不齊，無法滿足人們的需要。尤其是在抗腫瘤效果方面，多采用提取其有效成分制成藥物進行抗腫瘤等方面的保健，直接用蛹蟲草制成藥物進行抗腫瘤的效果不是很理想。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種蛹蟲草培養基，使用該蛹蟲草培養基培養出的蛹蟲草子實體重量明顯增加、營養成分含量高、制成的藥物抗腫瘤效果明顯。

本發明所采用的技術方案為：

一種蛹蟲草培養基，由以下含量的各組分組成：

該培養基的制備如下：以純凈水將KH₂PO₄、NaH₂PO₄溶解、并充分混勻后再加入干蠶蛹粉、大米粉、牛肉膏混合均勻，裝入培養瓶，密封，滅菌，冷卻。其中滅菌條件為：121℃，1.1Mpa滅菌30～45min。

使用上述蛹蟲草培養基培養蛹蟲草的方法，包括以下步驟：

（1）接種：在上述蛹蟲草培養基中接種蛹蟲草菌種，所述蛹蟲草菌種為Cordyceps?militaris(L.)Link.、液體菌種，所述蛹蟲草菌種的密度為3～5個菌球/mL，所述蛹蟲草培養基與蛹蟲草菌種的體積比為50:1；

（2）培養：

（a）暗培養：在溫度22℃、濕度75～85%條件下避光培養3～5天，至蛹蟲草菌絲長滿所述蛹蟲草培養基表面；

（b）第5～20天采用的光照培養：白天12小時日光燈光照，溫度20～22℃、濕度80～85%，光照強度控制在100～150Lx；晚上12小時閉光，溫度18～20℃、濕度75～85%；每天通風2次，早晚各一次，每次20～30分鐘；

（c）第21～35天采用的光照培養：白天12小時自然光加日光燈光照，溫度20～22℃、濕度75%～85%，總光照強度控制在1000～1200Lx；晚上12小時閉光，溫度18～20℃、濕度75～85%；每天通風2次，早晚各一次，每次20～30分鐘；

本步驟（b）、（c）中培養所用的光源均為散射光，培養過程中對培養瓶進行轉瓶使光照均勻；

（3）收獲及再培養：將經過步驟（3）培養后培養瓶中成熟的蛹蟲草子實體取出，剩余部分按照步驟（3）（c）的方法繼續培養至子實體成熟；

（4）干燥：將收獲的蛹蟲草子實體置于墊有紗布的不銹鋼盤中，均勻鋪開，30～37℃熱風循環烘干，其水分含量控制在10%以下。

本發明以蠶蛹粉為主要原料、大米為輔料、再加上牛肉膏作為營養成分配制蛹蟲草培養基，并且通過梯度實驗最終確定本發明所述的培養基最優配方，然后采用特殊的培養方式：暗培養、然后不同時間段不同的光照培養方式，再加上光源采用散射光，培養過程中定時對培養瓶進行轉瓶使光照均勻，即通過確定最優的蛹蟲草培養基配方、從整體上優化培養方案，嚴格按照該方法培養得到的蛹蟲草子實體經過檢測，發現：產量比使用現有技術培養基及現有技術培養方法培養得到的蛹蟲草子實體產量增加20%；每1g蛹蟲草子實體中腺苷含量為15-20mg、蟲草素含量為7.5-8mg、多糖含量為25-33mg，明顯高于采用現有技術方法所培養得到的蛹蟲草。

本發明上述方法得到的蛹蟲草在制備治療肺癌的藥物中的應用，即利用本發明方法培育所得的蛹蟲草進行制備治療肺癌的藥物，然后進行抗腫瘤試驗，結果發現本發明方法培育所得的蛹蟲草制備成的藥物其抗肺癌效果顯著優于目前市場上市售的蛹蟲草制成的藥物。以接種有lewiss肺癌的C57小鼠為實驗對象，將蛹蟲草磨粉后制成藥物，按藥物中蛹蟲草給藥劑量為5g/kg的標準進行給藥，每日給藥1次，連續10天后，檢測得lewis肺癌腫瘤的抑制率為19.6%。

具體實施方式

以下結合實施例對本發明作進一步具體描述，但不局限于此。

實施例1：蛹蟲草培養基的配制