[發明專利]N-(3,5-二氯苯基)-3,4-二氯-順丁烯二酰亞胺在抗真菌感染中的應用

有效

• 申請號: 201310462766.7
• 申請日: 2013-09-30
• 公開（公告）號: CN103565802A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發明（設計）人: 陳小龍;范永仙;陸躍樂;李福革;沈寅初
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: A61K31/402
• 分類號: A61K31/402;A61P31/10
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王兵

（一）技術領域

本發明涉及順丁烯二酰亞胺化合物的應用，特別涉及一種N-(3,5-二氯苯基)-3,4-二氯-順丁烯二酰亞胺在抗真菌感染中的應用。

（二）背景技術

含順丁烯二酸酐或順丁烯二酰亞胺結構的天然化合物均具有良好的生物活性，尤其是抗真菌活性。在上世紀60年代末，原上海農藥所中國工程院院士沈寅初課題組在篩選抗油菜菌核病（Sclerotinia?sclerotiorum）抗生素時發現的含順丁烯二酸酐結構的天然化合物（圖1）—變構霉素和變構菌素，兩者對真菌都有良好的活性。含馬來酸酐的Zopfiellin被日本尼桑公司開發為新一代防治灰霉病生物農藥，它對菌核病菌的MIC為1.56μg/mL。Scytalidin、Viburspiran、Heveadride和Dihydroepiheveadride都具有很廣的抗真菌譜，后兩個化合物已被列為抗真菌候選藥物。而含順丁烯二酰亞胺結構的天然化合物-焦土霉素、Aqabamycins以及Arcyruarubins對許多細菌、真菌均具有較好的抗菌效果，其中焦土霉素作為抗菌藥已在臨床上使用數十年之久。以順丁烯二酸酐或順丁烯二酰亞胺為核心結構衍生得到的該類化合物對油菜菌核病菌和灰霉病菌同樣具有較好的抑菌效果，而且毒性低。更重要的是，Sortino等人報道了順丁烯二酰亞胺類化合物對人體易感染真菌有很好的抑制作用，他們聲稱該類化合物是有潛力的抗真菌感染候選藥物。但只描述了部分化合物。

真菌感染包括淺部真菌病和深部真菌病，凡具有殺滅或抑制真菌生長或繁殖的藥物稱為抗真菌藥（antifungal?agents)，其研究已有近百年的歷史。第一代以灰黃霉素為代表，20世紀30年代末從微生物發酵代謝產物中分離得到的，第一個應用于臨床，對皮膚癬菌有較強的抑制作用，但對深部真菌無效，現已停止生產和使用；另外還包括制霉菌素及兩性霉素B，均屬多烯大環內酯類，主要用于深部真菌的治療。第二代為咪唑類，主要有酮康唑、克霉唑、咪康唑、益康唑等。第三代為三唑類，包括伊曲康唑、氟康唑以及丙烯胺類的特比萘芬等。目前，抗真菌感染藥物具有品種少、毒性大等的特點。尋找新的抗真菌感染藥物是永恒的課題。

新化合物N-(3,5-二氯苯基)-3,4-二氯-順丁烯二酰亞胺的合成制備我們已在國家發明專利201310047509.7中加以描述。但有關該化合物的抗真菌感染中應用研究還未見報道。

（三）發明內容

本發明目的是提供N-(3,5-二氯苯基)-3,4-二氯-順丁烯二酰亞胺在抗真菌感染方面的應用，為新抗真菌感染藥物篩選提供依據。

本發明采用的技術方案是：

本發明提供N-(3,5-二氯苯基)-3,4-二氯-順丁烯二酰亞胺在抗真菌感染中的應用。

進一步，所述真菌為白色念珠菌（Canidia?albicans）、光滑念珠菌（C.glabrata）、克柔念珠菌（C.krusei）、隱球酵母菌（Cryptococcus?neoformans）、須癬毛癬菌（Trichophyton?mentagrophytes）、紅色毛癬菌（T.rubrum）或煙曲霉（Aspergillus?fumigatus），優選所述真菌為克柔念珠菌（C.krusei）或隱球酵母菌（Cryptococcus?neoformans）。

進一步，所述N-(3,5-二氯苯基)-3,4-二氯-順丁烯二酰亞胺的最小抑菌濃度（MIC）為0.3～5.0μg/mL，通常所述N-(3,5-二氯苯基)-3,4-二氯-順丁烯二酰亞胺的MIC都在5.0μg/mL以下，特別是對隱球酵母菌的MIC為0.3μg/mL。

本發明所述N-(3,5-二氯苯基)-3,4-二氯-順丁烯二酰亞胺在抗真菌感染中的應用方法為：在96孔板中加入PD培養基和測試藥物，在特定的培養條件下培養真菌，檢測其OD值，并與對照相比計算抑制率及MIC等，具體操作見文獻Li,et?al.Potent?in?vitro?antifungal?activities?of?naturally?occurring?acetylenic?acids.ANTIMICROBIAL?AGENTS?AND?CHEMOTHERAPY,2008,52:2442-2448。