[發明專利]MERS-CoV病毒膜蛋白中的RBD片段及其編碼基因和應用

有效

• 申請號: 201310461299.6
• 申請日: 2013-09-30
• 公開（公告）號: CN103554235A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 王新泉;張林琦;王年爽;史宣玲
• 申請（專利權）人: 清華大學
• 主分類號: C07K14/165
• 分類號: C07K14/165;C12N15/50;C07K16/10;A61K39/215;A61K39/42;A61P31/14;C12R1/93
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及一種MERS-CoV病毒膜蛋白中的RBD片段及其編碼基因和應用。

背景技術

中東呼吸系統綜合征冠狀病毒(Middle?East?respiratory?syndrome?coronavirus，簡稱MERS-CoV)于2012年首次在中東地區被發現感染人類，隨后這種病毒感染引發的疾病又先后出現在歐洲幾個國家和地區。超過半數的感染病人均會出現嚴重的呼吸道疾病，其臨床癥狀同2013年爆發的由SARS-CoV引起的疾病非常相似。由于這種疾病可以人傳染給人，因此引起了全世界的高度關注。

MERS-CoV屬于beta冠狀病毒，但其來源和宿主仍沒有確定。同其他冠狀病毒類似，MERS-CoV利用其表面的膜蛋白S糖蛋白進入易感細胞。S糖蛋白由位于N端的S1結構域和位于近膜端的S2結構域和跨膜結構域組成。其中病毒對細胞易感性是由S1結構域決定的。通過利用MERS-CoV?S1結構域進行共純化實驗，在2013年初Raj的研究小組確定了dipeptideyl?peptidase4(dipeptideyl?peptidase4,DPP4，也稱為CD26)為MERS-CoV的受體。

發明內容

本發明的目的是提供一種MERS-CoV病毒膜蛋白中的RBD片段及其編碼基因和應用。

本發明提供的蛋白質，獲自MERS-CoV，為如下（a）或（b）或（c）或（d）或（e）或（f）：

（a）序列表的序列1自N末端第4至243位氨基酸殘基組成的蛋白質；

（b）序列表的序列1自N末端第1至243位氨基酸殘基組成的蛋白質；

（c）序列表的序列1自N末端第4至249位氨基酸殘基組成的蛋白質；

（d）序列表的序列1所示的蛋白質；

（e）將（a）或（b）或（c）或（d）所述的蛋白質經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由其衍生的蛋白質；

（f）與（a）或（b）或（c）或（d）所述的蛋白質具有70%以上同源性且具有相同功能的由其衍生的蛋白質。

編碼所述蛋白質的基因也屬于本發明的保護范圍。

所述基因可為如下（1）至（7）中任一所述的DNA分子：

（1）序列表中序列2所示的DNA分子；

（2）序列表中序列3所示的DNA分子；

（3）序列表中序列5自5’末端第1-843位核苷酸所示的DNA分子；

（4）序列表中序列5自5’末端第124-864位核苷酸所示的DNA分子；

（5）序列表中序列5所示的DNA分子；

（6）在嚴格條件下與（1）限定的DNA序列雜交且編碼所述蛋白質的DNA分子；

（7）與（1）限定的DNA序列至少具有70%以上同源性且編碼所述蛋白質的DNA分子。

上述嚴格條件可為在6×SSC，0.5%SDS的溶液中，在65℃下雜交，然后用2×SSC、0.1%SDS和1×SSC、0.1%SDS各洗膜一次。

含有所述基因的表達盒，重組載體、轉基因細胞系、重組病毒或重組菌均屬于本發明的保護范圍。

以所述蛋白質為免疫原得到的抗體也屬于本發明的保護范圍。

本發明還保護所述蛋白質在制備產品中的應用；所述產品的功能為如下（Ⅰ）或（Ⅱ）：（Ⅰ）治療和/或預防MERS-CoV感染；（Ⅱ）治療和/或預防MERS-CoV浸染哺乳動物細胞。所述哺乳動物具體可為人。所述哺乳動物細胞具體可為Huh7細胞。

本發明還保護所述抗體在制備產品中的應用；所述產品的功能為如下（Ⅰ）或（Ⅱ）：（Ⅰ）治療和/或預防MERS-CoV感染；（Ⅱ）治療和/或預防MERS-CoV浸染哺乳動物細胞。所述哺乳動物具體可為人。所述哺乳動物細胞具體可為Huh7細胞。

本發明還保護一種產品，其活性成分為所述蛋白質或所述抗體；所述產品的功能為如下（Ⅰ）或（Ⅱ）：（Ⅰ）治療和/或預防MERS-CoV感染；（Ⅱ）治療和/或預防MERS-CoV浸染哺乳動物細胞。所述哺乳動物具體可為人。所述哺乳動物細胞具體可為Huh7細胞。

本發明還保護所述蛋白質在制備具有結合DPP4或DPP4胞外區片段的功能的產品中的應用。

本發明還保護一種具有結合DPP4或DPP4胞外區片段的功能的產品，其活性成分為所述蛋白質。