[發(fā)明專利]一種固體生產(chǎn)中國(guó)被毛孢的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310455423.8
• 申請(qǐng)日: 2013-09-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103484383A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-01-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 涂峰;李桂全;張玉業(yè)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 涂峰
• 主分類號(hào): C12N1/14
• 分類號(hào): C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

背景技術(shù)

冬蟲夏草是鱗翅目蝙蝠蛾屬的蟲草蝙蝠蛾(Hepialus?armoricamus?Oberthur)幼蟲感染中國(guó)被毛孢真菌后，在體內(nèi)大量繁殖后形成的蟲菌復(fù)合體。中國(guó)專利CN101530042公開(kāi)的中國(guó)被毛孢菌粉發(fā)酵生產(chǎn)工藝，CN101423799公開(kāi)的一種中國(guó)被毛孢的生產(chǎn)方法。上述兩件專利均利用中國(guó)被毛孢菌種發(fā)酵方法生產(chǎn)出菌粉，其缺點(diǎn)是操作步驟繁多，不易于大規(guī)模生產(chǎn)，菌粉中腎保健作用有效成分較低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供利用天然枸杞作為培養(yǎng)基原料之一，易于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)，可快速、高效、綠色安全的進(jìn)行固體生產(chǎn)中國(guó)被毛孢。所得菌粉腎保健作用明顯。

為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明的技術(shù)方案為：其特點(diǎn)是包括如下步驟：步驟一：將枸杞20％～90％、谷類1％～40％、豆類5％～40％混合，加同等質(zhì)量的乳，按重量百分比配制后置入培養(yǎng)容器，培養(yǎng)基占培養(yǎng)容器體積的1/10～7/10，在115～140℃濕熱滅菌30分鐘，接入占培養(yǎng)基重量0.5％～1％的中國(guó)被毛孢菌種在15～22℃條件下培養(yǎng)3～9天，培養(yǎng)基表面長(zhǎng)滿菌絲；步驟二：將培養(yǎng)物干燥、粉碎、過(guò)篩即得中國(guó)被毛孢菌粉。

本發(fā)明的另一特點(diǎn)是步驟一中所述的枸杞為鮮果枸杞；

本發(fā)明的另一特點(diǎn)是步驟一中所述的枸杞為粉碎干果枸杞；

本發(fā)明的另一特點(diǎn)是步驟一中所述的枸杞為枸杞汁；

本發(fā)明的另一特點(diǎn)是步驟一中所述的乳為牛乳；

本發(fā)明的另一特點(diǎn)是步驟一中所述的乳為羊乳；

本發(fā)明的另一特點(diǎn)是步驟一中所述的乳為馬乳。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：

1、本發(fā)明生產(chǎn)方法所得發(fā)酵產(chǎn)品具有顯著的腎保健效果。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明具有顯著的益腎生物學(xué)活性，可明顯降低大鼠血清肌酐和尿素氮的水平，明顯提高腎組織SOD、GST的活性，降低MDA水平，明顯改善慶大霉素引起的腎損傷病理改變。

益腎的生物學(xué)活性實(shí)驗(yàn)方法數(shù)據(jù)如下：

采用健康純系雄性Wistar大鼠60只，體重180～220g。分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、1號(hào)(普通中國(guó)被毛孢)組，2號(hào)(固體生產(chǎn)中國(guó)被毛孢)低、高劑量組，每組12只。每只灌胃給予相應(yīng)劑量的中國(guó)被毛孢1、2號(hào)，給藥第三天開(kāi)始，每天給藥后6小時(shí)，腹腔注射慶大霉素注射液100mg/kg/d，連續(xù)7天；模型對(duì)照組腹腔注射慶大霉素注射液100mg/kg/d，正常對(duì)照組腹腔注射與慶大霉素等體積的生理鹽水，連續(xù)7天。

實(shí)驗(yàn)期間，觀察小鼠造模前后進(jìn)食及飲水、大便、活動(dòng)、皮毛等狀態(tài)變化。

血清生化檢測(cè)：分別在用藥前及第8、10天采血，測(cè)定血清肌酐，尿素氮。尾靜脈取血測(cè)定血清肌酐(苦味酸法)，尿素氮(酶法)。

腎勻漿的制備及生化指標(biāo)測(cè)定：第10天采血后，剖腹迅速取出腎臟，置-30℃冰箱速凍，將速凍后的腎臟取出，冰浴下切下腎皮質(zhì)組織0.5g，加入4.5mLPBS液(pH7.4，0.1mM，加入前置4℃冰箱預(yù)冷)，置組織勻漿器中反復(fù)研磨，制成10％的腎皮質(zhì)組織勻漿，按試劑盒方法測(cè)定SOD活性及MDA含量。

腎臟病理檢查：采血后每組取大鼠4只處死，取2×2×2mm腎皮質(zhì)組織塊于10％福爾馬林中固定，石蠟包埋，切片，HE染色，光鏡下觀察腎臟結(jié)構(gòu)的改變。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)(表一、表二)

表一、對(duì)慶大霉素致腎損傷大鼠血清肌酐和尿素氮的影響

注：與正常對(duì)照組比較，^**P＜0.01；與模型對(duì)照組比較，^#P＜0.05，^##P＜0.01。

結(jié)論

1號(hào)普通中國(guó)被毛孢和2號(hào)固體生產(chǎn)中國(guó)被毛孢均明顯降低大鼠血清肌酐和尿素氮的水平，明顯提高腎組織SOD、GST的活性，降低MDA水平，明顯改善慶大霉素引起的腎損傷病理改變。

普通中國(guó)被毛孢菌和固體生產(chǎn)中國(guó)被毛孢對(duì)慶大霉素引起的大鼠急性腎損傷具有保護(hù)作用，且固體生產(chǎn)中國(guó)被毛孢優(yōu)于普通中國(guó)被毛孢菌。

2、本發(fā)明中中國(guó)被毛孢菌可直接利用枸杞中的碳水化合物，易于高效、快速、大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)中國(guó)被毛孢菌粉；

3、本發(fā)明利用農(nóng)副產(chǎn)品，不添加任何化工原料，是一種綠色安全的生產(chǎn)方法。

4、本發(fā)明利用枸杞中的碳水化合物，更有利于中國(guó)被毛孢菌的生長(zhǎng)。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1