[發(fā)明專利]一種微生物Asp-1發(fā)酵法提取黃芪多糖的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310453427.2
• 申請日: 2013-09-29
• 公開（公告）號: CN103540629A
• 公開（公告）日: 2014-01-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王彬;陳瑞亮;柴保國
• 申請（專利權(quán)）人: 河南牧翔動物藥業(yè)有限公司
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;C12R1/67
• 代理公司: 鄭州聯(lián)科專利事務(wù)所(普通合伙) 41104
• 代理人: 張智偉;時立新

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于黃芪多糖提取技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種微生物Asp-1發(fā)酵法提取黃芪多糖的方法。

背景技術(shù)

黃芪多糖是中藥黃芪的有效成分，由α-糖苷鍵連接而成的分子量為37500左右的植物多糖，水解后可檢出葡萄糖、豐乳糖和阿拉伯糖，三種糖的分子比為：1:0.95:0.70。黃芪多糖是一種有效免疫增強劑，并能誘導(dǎo)機體益生菌增殖，促進機體微生態(tài)平衡。研究報道表明黃芪多糖還具有增強細胞新陳代謝、促進血液循環(huán)、抗病毒、抗腫瘤、抗應(yīng)激等保健功能，現(xiàn)在已經(jīng)被廣大養(yǎng)殖戶所接受，應(yīng)用于功能性飼料或者直接服用。

目前市場上的黃芪多糖均由常規(guī)的提取方法而來，大概有以下幾種，包括水提醇沉法、超微粉碎法、超聲波細胞粉碎法、超濾法、微波提取法、纖維素酶法、堿水提取法、醇堿提取法。水提醇沉法是目前最常用的提取方法，黃芪多糖的提取率平均為5.34%，其余的方法黃芪多糖提取率與其相比相差不多（超微粉黃芪多糖提取率4-5%之間，超聲細胞粉碎法黃芪多糖提取率為7.6%左右，微波法黃芪多糖提取率6.5%左右，超濾法提取黃芪多糖提取收率低于水提醇沉法但產(chǎn)物多糖含量高，堿水提取法黃芪多糖提取率4.5-19%之間，但提取產(chǎn)物的收率穩(wěn)定性較差），提取率不甚理想。

發(fā)明內(nèi)容

為克服現(xiàn)有提取技術(shù)中存在的缺陷，本發(fā)明的目的在于提供一種微生物Asp-1發(fā)酵法提取黃芪多糖的方法，該法可以顯著提高黃芪多糖的提取率和含量。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案如下：

一種微生物Asp-1發(fā)酵法提取黃芪多糖的方法：以干黃芪和黃曲霉（Aspergillus?niger)Asp-1為原料，首先將干黃芪粉碎后加水常溫浸泡，黃芪：水的重量比=（0.9-1）:10；隨后在黃芪的浸泡液中按照浸泡液加入0.5-1.5v%?含水量75-85wt%的Asp-1水懸液，同時按照黃芪加入0.01-0.02?wt?%的亞硫酸鉀作為防腐劑，并調(diào)節(jié)溶液pH值4-6，常溫厭氧發(fā)酵，用苯酚硫酸法檢測發(fā)酵液中黃芪多糖的含量，直至發(fā)酵液中黃芪多糖含量為3.5-4.5wt%時發(fā)酵結(jié)束；最后經(jīng)提取、純化、干燥即可；其中，所述黃曲霉（Aspergillus?niger)Asp-1購自中國普通微生物菌種保藏管理中心提供，菌種編號為3.03928。

所述提取過程為過濾，所述純化過程為醇沉。

本發(fā)明中：常溫指25-35℃，v%代表體積百分數(shù)，wt%代表重量百分數(shù)。

本發(fā)明改變傳統(tǒng)的黃芪多糖提取工藝，利用一種微生物Asp-1，在特定的條件下對中藥黃芪進行發(fā)酵處理，再通過提取、純化獲得黃芪多糖，是一種既能提高黃芪多糖的保健功能質(zhì)量，又能降低生產(chǎn)成本，而且還是節(jié)能環(huán)保的生產(chǎn)方式。本發(fā)明發(fā)酵法提取黃芪多糖，不僅可以增加產(chǎn)物中黃芪多糖的含量，而且還能改善提取物口感。

具體實施方式

實施例

一種微生物Asp-1發(fā)酵法提取黃芪多糖的方法，所述具體提取步驟為：

a、原料的選擇：選用干黃芪和黃曲霉（Aspergillus?niger)Asp-1（中國普通微生物菌種保藏管理中心提供，菌種編號為3.03928Asp-1）；

b、粉碎：將干黃芪用破碎機進行粉碎，粉碎粒度為40目；

c、浸泡：按黃芪與水的重量比為1：10的比例，將黃芪加入到30℃左右的水中浸泡1-3天；

d、厭氧發(fā)酵：在黃芪的浸泡液中按照浸泡液體積的比例，加入1v%含水量為80wt%的Asp-1種子水懸液，同時按照黃芪重量加入0.01wt%的亞硫酸鉀作為防腐劑，并調(diào)節(jié)溶液pH值4-6，25℃進行厭氧發(fā)酵，檢測發(fā)酵黃芪多糖的含量，發(fā)酵液中的多糖含量為4wt%時發(fā)酵結(jié)束；

e、過濾：將發(fā)酵物通過臥式螺旋分離機，將中藥殘渣與發(fā)酵液分離，再將濾液通過管式分離機，將菌類和其它細小雜質(zhì)過濾；

f、醇沉：將濾液儲存在醇沉罐中，加入等體積的95v%乙醇，攪拌10min后靜止1h，用離心機5000rpm/min離心醇沉液，過濾，收取沉淀；

g、干燥：將醇沉后的沉淀通過干燥器進行干燥，獲得的棕色粉末即為提取物。黃芪多糖提取率穩(wěn)定在20.32±4.77%，提取產(chǎn)物中黃芪多糖含量為42.95±4.33%。