[發(fā)明專(zhuān)利]一種培美曲塞二鈉中間體的分析檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310452249.1
• 申請(qǐng)日: 2013-09-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103884784B
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-07-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙志全
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山東新時(shí)代藥業(yè)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種高效液相色譜分析方法，尤其是一種培美曲塞二鈉中間體的分析檢測(cè) 方法。

背景技術(shù)

培美曲塞二鈉由美國(guó)Eli?Lilly公司開(kāi)發(fā)，是一種新型多靶位葉酸阻滯劑，能夠阻斷癌 細(xì)胞分裂和增生過(guò)程中所需要的多種酶，甚至抑制細(xì)胞胸苷和嘌呤核苷酸生物合成中包括 所有葉酸依賴酶的活性，用于治療惡性胸膜間皮瘤及非小細(xì)胞性肺癌。

N-[4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧代-1H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰基]-L-谷氨酸 二乙酯對(duì)甲苯磺酸鹽是合成培美曲塞二鈉的重要中間體，其化學(xué)式為C31H37N5O9S，結(jié)構(gòu)式 如下：

其中，TsOH為對(duì)甲苯磺酸。

到目前為止，USP、EP、BP、JP以及中國(guó)藥典和文獻(xiàn)中均沒(méi)有記載培美曲塞二鈉中間 體的分析檢測(cè)方法，但培美曲塞二鈉中間體的分析檢測(cè)對(duì)反應(yīng)控制和收率提高有著重要的 作用，同時(shí)也直接影響著終產(chǎn)品的質(zhì)量，所以建立一種穩(wěn)定有效的分析檢測(cè)方法對(duì)培美曲 塞二鈉中間體進(jìn)行質(zhì)量控制是非常必要的。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種培美曲塞二鈉中間體的高效液相色譜分析檢測(cè)方法，用于 培美曲塞二鈉中間體的質(zhì)量控制。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，發(fā)明人通過(guò)大量試驗(yàn)，最終獲得如下技術(shù)方案：

一種培美曲塞二鈉中間體的分析檢測(cè)方法，是以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料的色譜 柱（C18，4.6×250mm，5μm），以磷酸二氫鉀溶液和乙腈為流動(dòng)相，以檢測(cè)波長(zhǎng)為249～259nm， 進(jìn)行高效液相色譜法分析檢測(cè)。

所述的流動(dòng)相中磷酸二氫鉀溶液：乙腈的體積比為58～75:42～25，磷酸二氫鉀溶液的濃 度為0.01～0.04mol/L。

進(jìn)一步地，流動(dòng)相中磷酸二氫鉀溶液：乙腈的體積比優(yōu)選為68:32，磷酸二氫鉀溶液的 濃度優(yōu)選為0.0265mol/L。

所述的檢測(cè)波長(zhǎng)優(yōu)選為254nm。

本發(fā)明所述的分析檢測(cè)方法，可通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)：

A、取培美曲塞二鈉中間體樣品適量，用流動(dòng)相溶解，配制成每1mL含培美曲塞二鈉 中間體0.1～0.7mg的樣品溶液；

B、設(shè)置流動(dòng)相流速為0.7～1.2mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)249～259nm，柱溫為20～30℃；

C、取A的樣品溶液20μL注入液相色譜儀，完成培美曲塞二鈉中間體的分析檢測(cè)；

其中：

高效液相色譜儀：Agilent1200液相色譜系統(tǒng)；

色譜柱：Agilent?Extend-C18（4.6×250mm，5μm）；

流動(dòng)相：0.0265mol/L的磷酸二氫鉀溶液與乙腈按體積比68:32形成流動(dòng)相；

檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm；

柱溫：25℃；

流速：1.0mL/min。

本發(fā)明涉及的分析檢測(cè)方法，可以有效的將培美曲塞二鈉中間體及其雜質(zhì)分開(kāi)，而且 該方法分離度高，線性關(guān)系良好，操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性及耐用性好，結(jié)果穩(wěn)定可靠，從而可 用于培美曲塞二鈉中間體的質(zhì)量控制，為最終成品的質(zhì)量提供有效保障。

附圖說(shuō)明

圖1實(shí)施例1的培美曲塞二鈉中間體HPLC圖譜。

圖2實(shí)施例2的培美曲塞二鈉中間體HPLC圖譜。

圖3實(shí)施例3的培美曲塞二鈉中間體HPLC圖譜。

圖4實(shí)施例7的培美曲塞二鈉中間體線性工作曲線。

具體實(shí)施方式

以下是本發(fā)明的具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步作描述，但是本發(fā)明的保 護(hù)范圍并不限于這些實(shí)施例。凡是不背離本發(fā)明構(gòu)思的改變或等同替代均包括在本發(fā)明的 保護(hù)范圍之內(nèi)。

實(shí)施例1

儀器與條件：Agilent1200液相色譜系統(tǒng)，VWD檢測(cè)器，色譜柱：Agilent?Extend-C18 （4.6×250mm，5μm）；檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm；柱溫為25℃；流速1.0mL/min；0.0265mol/L的 磷酸二氫鉀溶液與乙腈按體積比68:32作為流動(dòng)相。