[發明專利]一種抗柯薩奇病毒A16型的單克隆抗體的制備及其應用有效

申請號：	201310451637.8	申請日：	2013-09-27
公開（公告）號：	CN104513310B	公開（公告）日：	2017-12-08
發明（設計）人：	黃忠;石金平;劉慶偉	申請（專利權）人：	中國科學院上海巴斯德研究所
主分類號：	C07K16/10	分類號：	C07K16/10;C12N15/13;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;A61K39/42;A61P31/14;G01N33/577
代理公司：	上海專利商標事務所有限公司31100	代理人：	陳靜
地址：	200025 ***	國省代碼：	上海;31
權利要求書：	查看更多	說明書：	查看更多
摘要：
搜索關鍵詞：	一種抗柯薩奇病毒 a16 單克隆抗體制備及其應用
鉆瓜網技術展會專利詞庫專利權人專利榜在售專利公布日期熱門專利

【說明書】：

技術領域

本發明屬于生物技術和免疫學領域；更具體地，本發明涉及一種抗柯薩奇病毒A16型的單克隆抗體的制備及其應用。

背景技術

柯薩奇病毒A16型(Coxsackievirus A16，CA16)屬于小RNA病毒科腸道病毒屬，CA16是手足口病(hand，foot and mouth disease，HFMD)的主要致病原之一，CA16感染的多數患者臨床病癥較輕微，大多能自愈，包括發熱、口腔潰瘍、手足部紅色皰疹。但越來越多的證據顯示CA16感染也能引起神經系統損傷等重癥，甚至導致死亡。目前尚未有治療CA16感染的抗病毒藥物，疫苗也還處于研發階段。部分原因是因為缺乏可用于CA16定性和定量分析的試劑，如CA16特異性抗體。

近期，本發明人制備了基于病毒樣顆粒的CA16新型疫苗，該疫苗能在小鼠體內引起較好的中和抗體反應，所產生的抗血清在CA16病毒攻擊實驗中能夠有效保護小鼠(Liu Q等，Vaccine2012Oct19;30(47):6642-8)。其他研究小組報道了CA16滅活病毒免疫小鼠所產生的中和性抗血清也能使小鼠在一定程度上抵抗致死劑量的病毒攻擊(Mao Q等，J Virol.2012Nov;86(22):11967-76)。這些結果表明中和抗體在體內可以抵抗CA16病毒感染，提示可以通過制備中和性單克隆抗體的策略來開發針對CA16感染的預防和治療性藥物。但是，目前現有技術中并沒有針對CA16的單克隆抗體，只有多克隆抗體，即抗血清。

綜上，制備出特異性良好的抗CA16單克隆抗體，對于開發針對CA16感染的檢測試劑盒以及治療性單抗藥物是必不可少的，將為有效預防和控制手足口病提供重要幫助。

發明內容

本發明的目的在于提供一種結合分子，其特異性結合柯薩奇病毒A16型；并且，其完全抑制細胞病變的濃度低于1ng/ml。

在本發明的第一方面，提供一種分離的結合分子，所述結合分子包含以下的氨基酸序列：SEQ ID NO:8所示的重鏈CDR1，SEQ ID NO:9所示的重鏈CDR2和SEQ ID NO:10所示的重鏈CDR3，SEQ ID NO:14所示的輕鏈CDR1，SEQ ID NO:15所示的輕鏈CDR2和SEQ ID NO:16所示的輕鏈CDR3。

在一個優選例中，所述的結合分子包含重鏈可變區，所述的重鏈可變區具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。

在另一優選例中，所述的結合分子包含輕鏈可變區，所述的輕鏈可變區具有SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。

在另一優選例中，所述的結合分子包含重鏈可變區和輕鏈可變區，其重鏈可變區和輕鏈可變區分別具有SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。

在另一優選例中，所述的結合分子包含重鏈恒定區和輕鏈恒定區，其重鏈恒定區具有SEQ ID NO:18所示的氨基酸序列；或其輕鏈恒定區具有SEQ ID NO:20所示的氨基酸序列。

在另一優選例中，所述的結合分子結合柯薩奇病毒16型的E顆粒和F顆粒。

在本發明的另一方面，提供編碼所述的結合分子的核酸分子。

在本發明的另一方面，提供所述的結合分子在制備用于檢測、治療和/或預防柯薩奇病毒A16型感染的藥物中的用途。

在另一優選例中，所述的結合分子識別的是構象表位。

在本發明的另一方面，提供一種表達載體，所述表達載體中含有編碼所述的結合分子的DNA。

在本發明的另一方面，提供一種宿主細胞，所述宿主細胞中含有所述的表達載體。

在本發明的另一方面，提供一種組合物，它含有所述的單克隆抗體，以及藥學上可接受的載體。

在另一優選例中，所述的組合物中，所述的單克隆抗體是有效量的。