[發明專利]一種提高粳稻花藥培養效率的方法

有效

• 申請號: 201310451345.4
• 申請日: 2013-09-27
• 公開（公告）號: CN103461141A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 余波;林添資;龔紅兵;景德道;周義文;盛生蘭;李闖;錢華飛;曾生元
• 申請（專利權）人: 江蘇丘陵地區鎮江農業科學研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 王云

技術領域

本發明涉及粳稻花藥培養領域，具體說是一種提高粳稻花藥培養效率的方法

背景技術

花藥培養是一種有效快速穩定變異材料的手段，自20世紀70年代開展水稻花藥培養育種研究以來，花藥培養已經發展成為一種成熟而又實用的水稻育種輔助手段；但同時花藥培養存在愈傷組織誘導率和綠苗分化率低、成苗率不高的缺點。

發明內容

為了克服現有技術中存在的問題與不足，本發明的第一目的在于提供一種粳稻花藥培養基母液以及利用該母液配制成的誘導培養基、分化培養基、生根培養基。

本發明的另一目的在于提供一種利用上述各培養基提高粳稻花藥培養效率的方法。

為了解決上述第一目的，本發明所采用的技術方案如下：

一種粳稻花藥培養基母液，包括母液A、母液B、母液C、母液D；其中：

母液A包括如下組分：按10倍濃度（即將母液A用水稀釋10倍后母液A工作液濃度）計算，KNO₃30g/L、NH₄NO₃16.5g/L、KH₂PO₄5g/L、MgSO₄·7H₂O3.7g/L、CaCl₂4.4g/L；

母液B包括如下組分：按100倍濃度（即將母液B用水稀釋100倍后母液B工作液濃度）計算，ZnSO₄·7H₂O500mg/L、MnSO₄·H₂O1000mg/L、H₃BO₃500mg/L、CuSO₄·5H₂O2.5mg/L、KI83mg/L、Na₂MoO₄·2H₂O25mg/L、CoCl₂·6H₂O2.5mg/L；

母液C包括如下組分：按100倍濃度（即將母液C用水稀釋100倍后母液C工作液濃度）計算，Na₂-EDTA5.6g/L、Fe₂(SO₄)₃·7H₂O4.3g/L；

母液D包括如下組分：按100倍濃度（即將母液D用水稀釋100倍后母液D工作液濃度）計算，肌醇10g/L、煙酸0.05g/L、鹽酸硫胺素0.05g/L、鹽酸吡哆醇0.05g/L、甘氨酸0.2g/L。

利用上述粳稻花藥培養基母液配成的誘導培養基，包括如下組分：100ml的母液A、10ml的母液B、10ml的母液C、10ml的母液D，5ml濃度為1mg/ml的2.4-D、蔗糖40g/L、瓊脂6g/L、水解酪蛋白1g/L、山梨糖醇20g/L、0.1mg/mL的玉米素0.8ml；pH為5.8。

上述誘導培養基的制備方法，具體如下：取100ml的母液A、10ml的母液B、10ml的母液C、10ml的母液D，5ml的濃度為1mg/ml的2.4-D,倒入1000ml的錐型瓶中，加水至600-700ml，混勻；再將水解酪蛋白1g、瓊脂6g、蔗糖40g、山梨糖醇20g,倒入錐型瓶中，加熱混勻，定容至1000ml，調節pH=5.8，得到混合溶液；用玻璃紙密封錐型瓶口后進行滅菌；滅菌結束以后，將上述混合溶液移至已經過紫外光殺菌的凈化工作臺上，待混合溶液溫度降至60-70℃，加入經過過濾除菌的0.1mg/mL玉米素0.8ml，混勻，緩緩倒入已經經過滅菌的培養皿中，待其自然凝固就完成了誘導培養基的配制。

利用上述粳稻花藥培養基母液配成的分化培養基，包括如下組分：100ml的母液A、10ml的母液B、10ml的母液C、10ml的母液D，2ml濃度為2mg/ml的6-BA、0.5ml濃度為0.5mg/ml的NAA，1ml濃度為2mg/ml的苯乙酸、蔗糖30g/L、瓊脂6g/L、水解酪蛋白1g/L、山梨糖醇10g/L；pH為5.8。