[發明專利]菲油果的莖尖離體快速培養方法

有效

• 申請號: 201310450183.2
• 申請日: 2013-09-27
• 公開（公告）號: CN103461140A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 姚德彪;顧建平
• 申請（專利權）人: 上海旭東園藝有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

1.一種菲油果的莖尖離體快速培養方法，其特佂在于，具體步驟為：

第一步：選取當年萌發的半木質化的新枝，剪去已展平的葉片，用洗衣粉溶液沖洗三遍，置自來水龍頭下沖洗3h，在無菌室超凈臺上將枝條消毒，先用75vo1％乙醇溶液消毒1min，然后用0.2vo1％的潔爾敏溶液消毒15min，最后用10vo1％次氯酸鈉溶液消毒15min，用無菌水沖洗三遍后無菌濾紙吸干水份；

第二步：在超凈臺上剝取長度0.5mm以下的莖尖，切下莖尖連同0.5cm長度的莖段接種于第一培養基上進行新芽培養，所述第一培養基是在1/2MS培養基的基礎上添加了玉米素和吲哚丁酸；待莖尖伸長至0.5cm以上時，將莖尖新芽切下接種至第二培養基上誘導叢生芽，所述第二培養基是在WP培養基的基礎上添加了細胞分裂素、荼乙酸；

第三步：將叢生芽切成單芽，接種至第三培養基中進行生根培養，所述第三培養基是在1/2MS培養基的基礎上添加了吲哚丁酸和活性炭，第三培養基中吲哚丁酸的濃度為0.5mg/L，活性炭的濃度為2mg/L；

第四步：將生根的試管苗移栽至由重量比為3：1的泥炭和珍珠巖混合而成的基質中，澆足水后用塑料薄膜覆蓋保溫保濕防失水萎蔫，7天后揭開薄膜煉苗，每天葉面噴水3-5次，15天后施肥料液；30天后移栽至灌滿純泥炭的塑料穴盤中，經3個月培養后直接移栽至土壤或大的容器中。

2.如權利要求1所述的菲油果莖尖離體快速培養方法，其特佂在于，所述第二步中第一培養基的pH值為5.6，其中玉米素的濃度為3mg/L，吲哚丁酸的濃度為0.2mg/L，瓊脂濃度為6.5g/L，蔗糖濃度為30g/L。

3.如權利要求1所述的菲油果莖尖離體快速培養方法，其特佂在于，所述第二步中第二培養基中細胞分裂素的濃度為2mg/L，萘乙酸的濃度為0.2mg/L。

4.如權利要求1所述的菲油果莖尖離體快速培養方法，其特佂在于，所述第三步中第三培養基中吲哚丁酸的濃度為0.5mg/L，活性炭的濃度為2mg/L。

5.如權利要求1所述的菲油果莖尖離體快速培養方法，其特佂在于，所述第二步中生芽培養是在溫度24℃、光照強度為3000LX及每天光照時間為12小時的條件下進行。

6.如權利要求1所述的菲油果莖尖離體快速培養方法，其特佂在于，所述第二步中叢生芽培養是在溫度24℃、光照強度為3000LX及每天光照時間為12小時的條件下進行。

7.如權利要求1所述的菲油果莖尖離體快速培養方法，其特佂在于，所述第三步中生根培養是在溫度24℃、光照強度為3000LX及每天光照時間為12小時的條件下進行。

8.如權利要求1所述的菲油果莖尖離體快速培養方法，其特佂在于，所述第四步中肥料液含有以重量百分比計的0.1wt％硝酸銨、0.1wt％磷酸二氫鉀、0.1wt％硫酸鎂。