[發明專利]還原型谷胱甘肽的檢測方法

有效

• 申請號: 201310449795.X
• 申請日: 2013-09-27
• 公開（公告）號: CN103512855A
• 公開（公告）日: 2014-01-15
• 發明（設計）人: 賴萃;曾光明;黃丹蓮;晏銘;趙美花;許飄;黃超;李寧杰;危臻;張辰;李雪;徐娟娟
• 申請（專利權）人: 湖南大學
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 湖南兆弘專利事務所 43008
• 代理人: 趙洪

1.一種還原型谷胱甘肽的檢測方法，包括以下步驟：

將含納米金顆粒的溶液和氯金酸溶液分別用緩沖溶液稀釋后再混合，然后加入表面活性劑溶液混勻，向所得混合溶液中加入待測溶液，靜置5min～10min后，再加入H₂O₂水溶液形成反應體系并啟動反應，反應完成后，對所得產物體系的紫外可見吸收光譜進行檢測，根據檢測所得產物體系的紫外可見吸收光譜中520nm處的吸光度變化定性判斷待測溶液中是否含有還原型谷胱甘肽，通過已測定的線性回歸方程定量檢測待測溶液中還原型谷胱甘肽的含量。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述線性回歸方程為y=-0.0002x+0.3967，其中，y為所述產物體系的紫外可見吸收光譜中520nm處的吸光度，x為所述待測溶液中還原型谷胱甘肽的含量，單位為nM。

3.根據權利要求2所述的檢測方法，其特征在于，所述線性回歸方程中還原型谷胱甘肽的檢測范圍為13nM～1333nM。

4.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述納米金顆粒主要由以下方法制備得到：將質量分數為0.01%～0.02%的氯金酸溶液加熱至沸騰并保持沸騰狀態2min～5min，然后一邊攪拌沸騰的氯金酸溶液一邊快速加入檸檬酸鈉溶液，攪拌速度為1000r/min～1500r/min，攪拌過程中持續加熱并保持攪拌速度不變，直至所得溶液顏色由初始的淡黃色轉為橘紅色時停止加熱，繼續攪拌15min～20min，制得含納米金顆粒的溶液。

5.根據權利要求1～4中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述反應體系的初始成分中，所述氯金酸的摩爾濃度為20μM～500μM，所述納米金顆粒的摩爾濃度為0.005875nM～0.0235nM，所述H₂O₂的摩爾濃度為100μM～400μM。

6.根據權利要求5所述的檢測方法，其特征在于，所述反應體系的初始成分中，所述氯金酸、納米金顆粒、H₂O₂的摩爾比為1∶1.175×10^-7∶2。

7.根據權利要求1～4中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述表面活性劑為十六烷基三甲基氯化銨，所述表面活性劑的摩爾濃度為1μM～3μM。

8.根據權利要求1～4中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述反應的條件為：反應溫度25℃～35℃，pH值6.5～7.0，反應時間20min～25min。

9.根據權利要求1～4中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述緩沖溶液為PBS緩沖溶液，所述PBS緩沖溶液的濃度為0.5mM～1mM。

10.根據權利要求1～4中任一項所述的檢測方法，其特征在于，所述納米金顆粒的粒徑為15nm～45nm，所述納米金顆粒的Zeta電位為-30mV～-40mV。