[發明專利]檢測雌激素受體β基因第5內含子CA重復序列的引物、方法和試劑盒有效
| 申請號： | 201310449527.8 | 申請日： | 2013-09-27 |
| 公開（公告）號： | CN103525918A | 公開（公告）日： | 2014-01-22 |
| 發明（設計）人： | 葛蟬;陳奕磊;王淑一 | 申請（專利權）人： | 長沙艾迪康醫學檢驗所有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 浙江杭州金通專利事務所有限公司 33100 | 代理人： | 黎雙華 |
| 地址： | 410008 湖南省長沙市芙蓉區張公*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 檢測 雌激素 受體 基因 內含 ca 重復 序列 引物 方法 試劑盒 | ||
1.檢測雌激素受體β基因第5內含子CA重復序列的引物，其特征在于：所述引物的序列為：
CAF：CCTTCAAGATAACCACCGAA
CAR：GGTCAGGAGTTCGAGACAAG。
2.如權利要求1所述的引物，其特征還在于，還包括測序引物，所述測序引物為：
CAF：CCTTCAAGATAACCACCGAA
CAR：GGTCAGGAGTTCGAGACAAG。
3.檢測雌激素受體β基因第5內含子CA重復序列的方法，其特征在于包括以下步驟：
(1)?取全血樣本，加入紅細胞裂解液，裂解紅細胞；
(2)?加入核酸提取液，提取核酸；
(3)?加入PCR擴增反應液進行DNA擴增；PCR擴增的引物序列為：
CAF：CCTTCAAGATAACCACCGAA
CAR：GGTCAGGAGTTCGAGACAAG；
(4)?取PCR?擴增產物進行瓊脂糖電泳，檢測是否擴增成功，選取有目的條帶的PCR擴增產物進行酶純化反應；
(5)?采用Sanger測序法對酶純化產物進行測序，檢測出被檢樣本中雌激素受體β基因第5內含子CA重復序列的重復次數。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，在對PCR擴增產物進行酶純化反應時，分別用無水乙醇和75%乙醇洗脫。
5.如權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟3的擴增反應條件為：95℃?5分鐘；98℃?10秒、56℃?20秒、68℃?30秒，40個循環；68℃?2分鐘。
6.如權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟4的酶純化反應為：取擴增好的PCR產物加入酶純化液中，反應條件為：37℃?50分鐘，95℃?5分鐘。
7.如權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟5測序反應條件為：95℃?4分鐘，95℃15秒；50℃?20秒；60℃?2分鐘，25個循環。
8.如權利要求3所述的方法，其特征在于，Sanger測序的引物序列為：
CAF：CCTTCAAGATAACCACCGAA
CAR：GGTCAGGAGTTCGAGACAAG。
9.用于檢測雌激素受體β基因第5內含子CA重復序列的試劑盒，包括核酸提取試劑、PCR擴增試劑、酶純化試劑、測序反應試劑，其特征在于，用于擴增樣本DNA的引物的序列為：
CAF：CCTTCAAGATAACCACCGAA
CAR：GGTCAGGAGTTCGAGACAAG。
10.如權利要求9所述的試劑盒，其特征在于，還包括測序引物為：
CAF：CCTTCAAGATAACCACCGAA
CAR：GGTCAGGAGTTCGAGACAAG。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于長沙艾迪康醫學檢驗所有限公司，未經長沙艾迪康醫學檢驗所有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201310449527.8/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
