[發明專利]一種分離純化非達米星的方法

有效

• 申請號: 201310446552.0
• 申請日: 2013-09-27
• 公開（公告）號: CN104513286B
• 公開（公告）日: 2018-08-17
• 發明（設計）人: 袁建棟;黃仰青;姚翠萍
• 申請（專利權）人: 博瑞生物醫藥（蘇州）股份有限公司
• 主分類號: C07H17/08
• 分類號: C07H17/08;C07H1/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供了一種分離純化非達米星的方法，所述方法在分離純化中采用C8反相硅膠作為填料進行柱層析，將非達米星用醋酸溶解上樣，流動相洗脫，收集樣品，經分離純化后得到的非達米星HPLC純度≥99.5%，單雜≤0.10%。本方法提供的非達米星的純化方法，采用具有高選擇性和高載樣量的新型介質，柱效高，分辨率高，分離純化效果更好，保留時間短，洗脫劑用量少，克服了現有技術中因柱效低，分離度差，制備的非達米星純度低，雜質多的缺點。

技術領域

本發明涉及一種分離純化方法，具體涉及高純度非達米星的分離純化方法，尤其是涉及HPLC純度在99%以上的非達米星的分離純化方法。

背景技術

非達米星（通用名：fidaxomicin，商品名：Dificid）是一種18元大環內酯類抗生素，由桔橙指孢囊菌（Dactylosporangium aurantiacum）發酵得到，屬于臺勾菌素（Tiacumicins）類化合物。非達米星由Optimer公司研發，于2011年5月27日獲FDA批準，是近20多年來首次被FDA批準用于治療難辨梭菌（難辨梭狀芽胞桿菌）相關性腹瀉（CDAD）的抗生素。其作用機理新穎，主要是通過抑制細菌的RNA聚合酶而產生迅速的抗難治梭狀芽孢桿菌感染（CDI）作用。其治療CDI優于現有藥物。非達米星CAS: 873857-62-6；分子式：C₅₂H₇₄Cl₂O₁₈；結構式如下式I：

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中國專利CN1688707A公開了采用反相介質壓力液相色譜法，以硅膠鍵合C18為固定相，以乙腈/水/乙酸為流動相，提純非達霉素的方法。該方法的缺點是只能制得93%純度的非達霉素，收率只有30%，成本較高不適合工業化生產。

中國專利CN102993251A公開了一種用高效液相色譜純化臺勾霉素B的方法。該方法用Uni30BPC單分散性聚合物微球作為填料進行制備柱層析以制得較高純度的非達霉素。但該方法的缺點是填料上樣量少，制備色譜的投入大，成本高，臺勾霉素B的回收率低。

中國專利CN102030791B公開了四種臺勾菌素的制備方法，該方法將從大孔吸附樹脂中提取的粗提物，先進行萃取和濃縮，得到粗品，粗品經過硅膠柱層析，凝膠柱層析，再次用硅膠柱層析，最后經過ODS反相中壓液相色譜才能分別制備得到四中臺勾菌素類化合物。該方法需要使用兩次硅膠柱層析，并用到ODS反相中壓液相色譜，操作繁瑣，成本高。

現有技術中普遍存在純化效率低，回收率低，分離效果差，操作繁瑣的缺點。因此尋找一種操作簡便，純化效果好，回收率和純度高的非達米星制備方法，對非達米星的產業開發具有很重要的意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種分離純化非達米星的方法，該方法不僅能提高非達米星的純度和回收率，而且操作簡單，收率高，生產成本低，適合于工業生產。

為達到上述目的，本發明的技術方案是：一種分離純化非達米星的方法，所述方法在純化層析柱中采用C8反相硅膠作為填料進行柱層析，其中所述的C8反相硅膠填料粒徑為5~50μm；優選，所述的C8反相硅膠填料粒徑為5~30μm；進一步優選，所述的C8反相硅膠填料粒徑為7~15μm；更進一步優選，所述的C8反相硅膠填料為UniSil 10-120-C8、SP-100-8-C8-HP、UniSil 10-170-C8、LiChrosorb RP-8、Kromasil 100-10-C8或Outstanding-7-C8。

所述的分離純化非達米星的方法，是采用C8反相硅膠作為色譜柱的固定相，再將非達米星的樣品溶液上樣在色譜柱上，用流動相洗脫吸附在填料上的非達米星，收集樣品。

進一步的，所述非達米星樣品溶液是將非達米星粗品先用醋酸溶解，再用流動相稀釋獲得，優選將濃度稀釋1倍。