[發(fā)明專利]落葵鏈格孢及其在蘋果樹腐爛病害防治中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310445684.1
• 申請(qǐng)日: 2013-09-26
• 公開（公告）號(hào): CN103525708A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹克強(qiáng);劉鎮(zhèn);趙倩;劉欣;徐濤;胡同樂;王樹桐;王亞南
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/14
• 分類號(hào): C12N1/14;A01N63/04;A01P3/00;C12R1/645
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，涉及落葵鏈格孢及其在蘋果樹腐爛病害防治中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

由黑腐皮殼屬Valsa?ceratosperma引起的蘋果樹腐爛病，是蘋果上一種分布廣、危害重的病害。從我國首次發(fā)現(xiàn)蘋果樹腐爛病以來，國內(nèi)已經(jīng)有四次大的流行（曾士邁.宏觀植物病理學(xué).北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，2005）。2007年，國家蘋果產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建立，為全國范圍內(nèi)蘋果病蟲害的調(diào)研和防控研究創(chuàng)造了條件，2008年的調(diào)查結(jié)果顯示，全國蘋果主產(chǎn)省蘋果腐爛病的平均發(fā)病株率為52.7%，由此可見腐爛病的發(fā)生十分普遍且嚴(yán)重。（曹克強(qiáng)，國立耘，李保華，孫廣宇，陳漢杰.中國蘋果樹腐爛病發(fā)生和防治情況調(diào)查.植物保護(hù)，2009，35(2):114-116）

鏈格孢Alternaria?spp是一類極為常見的真菌，既是重要的植物病原菌（孫霞，張?zhí)煊?河北鴨梨病果上鏈格孢分離系的形態(tài)及分子特性研究.菌物學(xué)報(bào)，2008，27(1):105-117），同時(shí)又是非常有應(yīng)用潛力的生防資源。近年來利用鏈格孢及其產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物防治雜草的報(bào)道較多，但利用其抑制植物病害真菌的研究還較局限。鏈格孢可產(chǎn)生多種毒素，姜述君等研究發(fā)現(xiàn)狹卵鏈格孢菌A.augustiovoide菌株AAEC05-3能通過產(chǎn)生鏈格孢毒素細(xì)交鏈孢菌酮酸防除稗草（姜述君，范文艷，鞠世杰等.狹卵鏈格孢菌株AAEC05-3及其毒素對(duì)稗草的致病性.植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2007，34(3):283-288）。

蘋果腐爛病的防治一直以化學(xué)防治為主，但隨著人們對(duì)環(huán)境條件以及果品質(zhì)量要求的提高，化學(xué)防治將會(huì)受到越來越多的限制。目前，越來越多的研究人員利用安全、有效的生物防治措施防治蘋果樹腐爛病，王彩霞等研究了從土壤里分離出的細(xì)菌對(duì)蘋果樹腐爛病菌的抑制作用，發(fā)現(xiàn)菌株BJ1（微嗜酸寡氧單胞菌Stenotrophomonas?acidaminiphila）對(duì)腐爛病菌有明顯的拮抗效果，其發(fā)酵濾液能明顯抑制腐爛病菌菌絲生長和孢子萌發(fā)（王彩霞，張清明，李桂舫，董向麗，李保華.蘋果樹腐爛病拮抗細(xì)菌菌株BJ1的鑒定及其抑菌作用.植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2012，39(5):431-437）；高克祥等研究表明內(nèi)生菌螺旋毛殼菌ND35培養(yǎng)濾液提取的粗酶液對(duì)腐爛病菌有抑制作用（高克祥，龐延?xùn)|，秦乃花，劉曉光，康振生.內(nèi)生菌螺旋毛殼抗生素和水解酶的協(xié)同抗真菌作用.植物病理學(xué)報(bào)，2006，36(4):347-358）；郜佐鵬等研究發(fā)現(xiàn)幾種植物內(nèi)生放線菌對(duì)蘋果樹腐爛病菌有抑制作用（郜佐鵬，柯希望，韋潔玲等.七株植物內(nèi)生放線菌對(duì)蘋果樹腐爛病的防治作用.植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2009，36(5):410-416）。因此，利用內(nèi)生真菌產(chǎn)生的抗病原真菌的活性物質(zhì)進(jìn)行植物病原真菌病害的生物防治，具有周期短、便于生產(chǎn)和低毒等優(yōu)點(diǎn)。所以，研究和開發(fā)對(duì)植物病害具有防治作用的優(yōu)良的出發(fā)菌株一直是本領(lǐng)域技術(shù)人員不斷追求的目標(biāo)，探索防治蘋果樹腐爛病的生物制劑具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種從蘋果樹皮分離篩選出的內(nèi)生真菌——落葵鏈格孢（Alternaria?basellae）；本發(fā)明的另一目的是提供利用該菌株代謝產(chǎn)物防治蘋果樹腐爛病的方法。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明首先提供一株落葵鏈格孢（Alternaria?basellae）。

落葵鏈格孢（Alternaria?basellae）的分離、篩選及鑒定：

本發(fā)明所述落葵鏈格孢在2010年12月從河北省保定溫仁采集于蘋果樹皮內(nèi)，經(jīng)分離、純化、培養(yǎng)、發(fā)酵和活性鑒定等步驟獲得并保存：經(jīng)鑒定為落葵鏈格孢（Alternaria?basellae），保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心（簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國科學(xué)院微生物研究所，郵政編碼：100101），保藏日期為2013年9月10日，保藏編號(hào)為CGMCC?No.8166。

落葵鏈格孢（Alternaria?basellae），其固體培養(yǎng)特征為：菌落在PCA平板上培養(yǎng)，菌落圓形，等徑生長，初為乳白色，3～4天后變?yōu)榛疑秸梗鯛睿杷桑虚g稍隆起，背面灰色，形成，培養(yǎng)5天菌落直徑達(dá)到5.52cm，分生孢子卵形、倒棒狀，黃褐色，有0～3個(gè)橫膈膜，0～2個(gè)縱斜隔膜，分隔處明顯縊縮，主橫膈膜增厚，19.05～30.80μm×7.86～8.00μm，無喙或柱狀假喙，3.00～3.77μm×3.10～3.70μm，分生孢子形成不分枝的短鏈，每條鏈含有5～8個(gè)孢子，產(chǎn)孢表型從總體上看，分生孢子鏈較短，部分孢子之間的假喙較長。