[發明專利]一種高含量棗環磷酸腺苷提取物及其制備方法

有效

• 申請號: 201310443550.6
• 申請日: 2013-09-25
• 公開（公告）號: CN103623080A
• 公開（公告）日: 2014-03-12
• 發明（設計）人: 吳樂斌;周甄鴻;胡晨旭;劉紅彥;姜佳
• 申請（專利權）人: 中恩（天津）醫藥科技有限公司
• 主分類號: A61K36/725
• 分類號: A61K36/725;A61K31/7076;A61P39/00;A23L1/30
• 代理公司: 天津市三利專利商標代理有限公司 12107
• 代理人: 李蕊

技術領域

本發明涉及植物有效成分的提取和富集生產領域，尤其是一種高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法。?

背景技術

環磷酸腺苷（cyclic?ademodsine?monophosphate,簡稱cAMP）是一種蛋白激酶制活劑，廣泛存在于生物體的組織與細胞內。其受神經內分泌系統的控制，作為肽類激素、兒茶酚胺和前列腺素等激素的第二信使發揮生物效應。基礎醫學與臨床醫學研究證明，cAMP可以通過促進腦細胞代謝、修復衰老和疲勞腦細胞，阻止腦細胞衰老，從而改善睡眠與記憶力；對機體淋巴細胞轉化、抗體的形成與釋放、細胞免疫等生理功能有重要的調節作用，從而增強免疫力、選擇性抑制機體免疫反應，改善過敏性皮炎、麻疹、哮喘等免疫功能；抑制細胞增殖、促進細胞分化，起到抗腫瘤的作用；通過營養心肌、正性肌力、舒張血管等途徑改善心血管功能；調節神經遞質合成，促進激素分泌，維持正常的人體生理活動。?

1991年，劉孟軍等借助蛋白結合法對14種園藝植物的cAMP含量進行了測定，發現大棗中cAMP的含量最高，其成熟果肉中cAMP的含量為一般動植物材料的數千至數萬倍，范圍在60-800μg/g，其中，被譽為“中華金絲小棗第一縣”的無棣縣盛產的金絲小棗中cAMP的含量較高；韓利文等人報道，山東沂蒙山大雪棗中cAMP與金絲小棗含量相當。?

目前，環磷酸腺苷制劑的制備方法主要包括化學合成法、微生物發酵法和傳統提取工藝合并柱層析純化。其中，化學合成法例如申艷紅等（2003）以腺苷為原料，三氯氧磷為磷酰化試劑，用磷酸三乙酯作溶劑，低溫下生成腺苷的5’位二氯磷酸酯，將此中間體與反應體系分離，融入適當的溶劑，于攪拌下慢慢加入到KOH的水和乙腈溶液中，強堿環化得到3’,5’-環磷酸腺苷，從乙醇和水中重結晶后純度可達到98.5%，總收率58%；微生物發酵法例如日本研究者（Kokai?Tokyyo?Koho，1997）采用基因重組的手段獲得了菌種?Escherichiacoli?K-11，可發酵生產cAMP，采用搖床在28℃培養14h，培養基為葡萄糖0.5%，KH₂PO₄1.4%，（NH₄）₂SO₄0.2%，MgSO₄·7H₂O?0.02%，蛋白胨0.4%，酵母粉0.02%，培養液中cAMP的濃度為3.9%mg/150mL；CN?100425620C公開了一種從棗中提取環磷酸腺苷的工藝，采用浸泡-超聲提取紅棗，得到澄清棗汁，棗汁通過陰離子交換柱，甲酸水溶液洗脫，氨水溶液調節pH值，再過陰離子交換柱，收集的洗脫液通過層析柱（硅膠型，或者大孔樹脂型，或者聚酰胺型），再用水或乙醇水溶液洗脫，洗脫液濃縮后加入無水乙醇結晶，得到高純度環磷酸腺苷粉。?

然而，上述化學合成法所用的試劑有一定毒性，污染環境；且技術復雜，價格昂貴，難以實現大規模生產；由于合成過程中的副產物原因，適用范圍很小，主要用于心絞痛、心肌梗死、心肌炎及心源性休克等心血管疾病的治療，使用過量會有毒副作用。柱層析法在分離過程中使用了一些刺激性的試劑，對層析柱填料的安全性要求也很高。微生物發酵法由于受到菌種限制且難以分離，使用起來也有一定的局限性。常用的提取方法采用的設備大部分是單元批次式，難以形成連續化生產的規模，影響提取過程標準化進程。?

可見，針對現有技術中存在的溶劑消耗量大、周期長、自動化水平低，化學合成過程中副產物多等技術問題，尋求一種新的環磷酸腺苷的生產工藝具有非常重要的生產實踐意義。?

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一種高含量棗環磷酸腺苷提取物。?

本發明所要解決的另一技術問題在于提供上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法。?

為解決上述技術問題，本發明的技術方案是：?

一種高含量棗環磷酸腺苷提取物，所述提取物中環磷酸腺苷的濃度為每15mg/100g以上，環磷酸腺苷自原料的轉利率達90%以上，該提取物是由下述方法得到的：采用棗的固體或半固體原料，經高壓差連續式低溫提取器提取，提取液濃縮后，真空干燥，粉碎得棗的粗提物；采用超臨界萃取技術萃取粗提物，得到棗環磷酸腺苷提取物。?

一種高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，采用棗的固體或半固體原?料，經高壓差連續式低溫提取器提取，提取液濃縮后，真空干燥，粉碎得棗的粗提物；采用超臨界萃取技術萃取粗提物，得到高含量棗環磷酸腺苷提取物。?

優選的，上述高含量棗環磷酸腺苷提取物的制備方法，具體步驟如下：?