[發明專利]一種紅霉素鏈霉菌發酵生產紅霉素的培養基和培養方法

有效

• 申請號: 201310441432.1
• 申請日: 2013-09-25
• 公開（公告）號: CN103484515A
• 公開（公告）日: 2014-01-01
• 發明（設計）人: 任勇;奇乃;王忠中
• 申請（專利權）人: 寧夏泰瑞制藥股份有限公司
• 主分類號: C12P19/62
• 分類號: C12P19/62;C12R1/465
• 代理公司: 寧夏專利服務中心 64100
• 代理人: 徐淑芬

技術領域

本發明屬于發酵技術領域，特別是涉及一種紅霉素鏈霉菌發酵生產紅霉素的培養基和培養方法。

背景技術

紅霉素是大環內酯類抗生素，抗菌譜與青霉素相似。

目前，國內生產廠家使用紅色鏈霉素，采用三級發酵的模式生產紅霉素。其種子培養基、發酵培養基主要采用淀粉和葡萄糖作為碳源；豆餅粉、花生餅粉、玉米漿或蛋白胨作為氮源，使用常規原輔料發酵生產紅霉素存在的主要問題：

1?發酵成本高。采用該配方，其原輔料的消耗占到生產成本的65%左右。

2?增加企業的采購成本。紅霉素種子培養基、發酵培養基氮源組成至少在3種以上，增加了企業的采購工作量和采購成本。

3?一級種子培養的接種量較大。國內部分廠家的紅霉素生產規模可以達到萬噸/年，其一級種子培養發酵罐的體積超過了5m³，常規配方的一級種子培養接種量為1.5～2L/M³，增加了菌種研究人員的工作強度和工作量。

4?種子培養的周期長。常規配方的紅霉素種子培養周期為35～40h。

5?紅霉素發酵單位較低。使用常規原輔料的培養基，紅霉素的發酵單位一般在8000～9000u/ml。

6?常規培養基在滅菌過程中，部分葡萄糖在高溫狀態容易碳化，使種子液和發酵液的顏色變深，降低培養基質量，影響種子培養和發酵培養的效果。

7?紅霉素A組分偏低。使用常規原輔料的培養基，紅霉素A的組分一般控制在62～68%。

8）發酵過程中，還需補入氨基酸。隨著發酵時間的延長，發酵液中的氨基酸含量降低，需要補入氨基酸。

發明內容

本發明目的就在于克服上述現有技術的缺陷，提供一種減少接種量，有效提高發酵單位，縮短發酵周期，同時最大限度的降低原輔料用量，降低生產成本，且原輔料來源不受環境影響，保證其供應充足，實現紅霉素穩定、高效地生產的培養基。

本發明的另一目的是提供利用上述培養基生產紅霉素的培養方法。

為實現上述目的所采取的技術方案為：

一種紅霉素鏈霉菌發酵生產紅霉素的培養基，包括一級種子培養基、二級種子培養基和發酵培養基，其特征在于上述一級種子培養基、二級種子培養基和發酵培養基中均含有甘蔗糖蜜、啤酒酵母干渣和蚯蚓粉。

所述一級種子培養基的組成為：甘蔗糖蜜15～20g/L、油5～10ml/L、啤酒酵母干渣20～25g/L、蚯蚓粉8～12g/L、硫酸銨0.03～0.05g/L、氯化鈉0.9～1g/L、輕質碳酸鈣0.2～0.4g/L、硅油消泡劑0.01～0.03g/L。

所述二級種子培養基的組成為：甘蔗糖蜜25～30g/L、油12～16ml/L、啤酒酵母干渣25～30g/L、蚯蚓粉11～17g/L、硫酸銨0.06～0.08g/L、氯化鈉0.9～1g/L、輕質碳酸鈣0.4～0.6g/L、硅油消泡劑0.02～0.04g/L。

所述發酵培養基的組成為：甘蔗糖蜜25～35g/L、油10～15ml/L、啤酒酵母干渣30～35g/L、蚯蚓粉15～20g/L、硫酸銨0.07～0.09g/L、氯化鈉0.9～1g/L、輕質碳酸鈣0.4～0.6g/L、S-腺苷甲硫氨酸1～5g/L、氯化鈷0.006～0.008g/L硫酸鎂0.04～0.05g/L、硫酸鋅0.03～0.05g/L、硫酸銅0.06～0.08g/L、硅油消泡劑0.02～0.03g/L。

所述啤酒酵母干渣的質量要求為：

蛋白質含量≥45%；磷含量≥60ug/ml；水分≤5%；灰分≤5%；碳水化合物≥12%；干渣顆粒通過60目篩的數量≥80%。

所述蚯蚓粉的質量要求：蛋白質含量≥60%；水分≤10%；粒度能通過80目篩。

所述甘蔗糖蜜在使用前進行預處理，預處理過程為：

1）甘蔗糖蜜中加入飲用水，使其粘度控制在100cp以下；

2）加熱升溫至30～35℃，

3）超濾，超濾膜材料為醋酸纖維素或聚氧乙烯，超濾過程中，物料的流量控制在4～5L/min，超濾壓力控制在0.2MPa

4）加入蔗糖轉化酶，蔗糖轉化酶用量（g）=蔗糖甜蜜重量（kg)×0.35。