[發(fā)明專利]弗氏鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)泰樂菌素的培養(yǎng)基及發(fā)酵方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310440355.8
• 申請日: 2013-09-25
• 公開（公告）號: CN103484514A
• 公開（公告）日: 2014-01-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 任勇;王義;奇乃;董媛;李小萍
• 申請（專利權(quán)）人: 寧夏泰瑞制藥股份有限公司
• 主分類號: C12P19/62
• 分類號: C12P19/62;C12R1/54
• 代理公司: 寧夏專利服務(wù)中心 64100
• 代理人: 徐淑芬

1.一種弗氏鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)泰樂菌素的培養(yǎng)基，包括搖瓶種子培養(yǎng)基、一級種子培養(yǎng)基、二級種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于上述搖瓶種子培養(yǎng)基、一級種子培養(yǎng)基、二級種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基中均含有啤酒酵母菌渣和蚯蚓粉。

2.按照權(quán)利要求1所述的弗氏鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)泰樂菌素的培養(yǎng)基，其特征在于上述搖瓶種子培養(yǎng)基組成為：豆油或玉米油3～6ml/L、啤酒酵母菌渣5～10g/L、蚯蚓粉4～8g/L、玉米漿干粉2～5g/L、硫酸鎂2～3g/L、硫酸鐵1～3g/L、輕質(zhì)碳酸鈣2～4g/L、硫酸銨2～4g/L。

3.按照權(quán)利要求1所述的弗氏鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)泰樂菌素的培養(yǎng)基，其特征在于上述一級種子培養(yǎng)基的組成為：豆油或玉米油20～30ml/L、啤酒酵母干渣25～35g/L、蚯蚓粉15～20g/L、玉米漿3～6g/L、磷酸二氫鉀0.3～0.4g/L、輕質(zhì)碳酸鈣2～4g/L、硫酸銨3～6g/L。

4.按照權(quán)利要求1所述的弗氏鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)泰樂菌素的培養(yǎng)基，其特征在于上述二級種子培養(yǎng)基的組成為：豆油或玉米油25～35ml/L、啤酒酵母干渣30～40g/L、蚯蚓粉20～25g/L、玉米漿5～10g/L、磷酸二氫鉀0.5～0.8g/L、輕質(zhì)碳酸鈣3～5g/L、硫酸銨3～5g/L。

5.按照權(quán)利要求1所述的弗氏鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)泰樂菌素的培養(yǎng)基，其特征在于上述發(fā)酵培養(yǎng)基的組成為：豆油或玉米油30～40ml/L、啤酒酵母干渣35～45g/L、蚯蚓粉30～35g/L、玉米漿10～15g/L、磷酸二氫鉀0.8～1.2g/L、輕質(zhì)碳酸鈣6～8g/L、硫酸銨5～8g/L、氯化鈉4～6g/L、硫酸鎂4～6g/L、硫酸鐵3～5g/L、復(fù)合型甜菜堿20～30g/L。

6.按照權(quán)利要求1、2、3、4或5所述的弗氏鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)泰樂菌素的培養(yǎng)基，其特征在于所述啤酒酵母干渣質(zhì)量要求為：

蛋白質(zhì)含量≥45%；磷含量≥60ug/ml；水分≤5%；灰分≤5%；碳水化合物≥12%；干渣顆粒通過60目篩的數(shù)量≥80%。

7.按照權(quán)利要求1、2、3、4或5所述的弗氏鏈霉菌發(fā)酵生產(chǎn)泰樂菌素的培養(yǎng)基，其特征在于所述蚯蚓粉質(zhì)量要求為：蛋白質(zhì)含量≥60%；水分≤10%；粒度能通過80目篩。

8.一種弗氏鏈霉菌利用權(quán)利要求2至5任意一項(xiàng)培養(yǎng)基發(fā)酵生產(chǎn)泰樂菌素的發(fā)酵方法，其工藝步驟包括：首先將已制備好的斜面孢子接入搖瓶培養(yǎng)基中進(jìn)行搖瓶培養(yǎng)，至菌體濃度10～15%、pH值6～8時按照1～2L/m³接種量接入一級種子培養(yǎng)基中進(jìn)行一級種子培養(yǎng)，至菌體濃度15～25%、pH值6～8時轉(zhuǎn)移入二級種子培養(yǎng)基中進(jìn)行二級種子培養(yǎng)，至菌體濃度30～40%、pH值6～8時轉(zhuǎn)移至發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，待發(fā)酵單位在15000u/ml以上且每6～8h檢測時前、后檢測的發(fā)酵單位相差在300u/ml以內(nèi)、菌體濃度30～40%、周期25～30h時終止發(fā)酵。

9.按照權(quán)利要求8所述的發(fā)酵方法，其特征在于所述搖瓶培養(yǎng)的條件為：將種子瓶置于200～240r/min搖瓶機(jī)上振蕩培養(yǎng)40～48h，培養(yǎng)溫度28～30℃，相對濕度35～45%。

10.按照權(quán)利要求8所述的發(fā)酵方法，其特征在于所述一級種子培養(yǎng)條件為：

1）罐壓：控制在0.04～0.06MPa，

2）罐溫：發(fā)酵前5h，罐溫控制在30～31℃；6h至一級種子培養(yǎng)結(jié)束，罐溫控制在29～30℃，

3）空氣流量：0～5h，5～10m³/h；6h至一級種子培養(yǎng)結(jié)束：15～20m³/h，

4）pH控制在7～8，

5）攪拌轉(zhuǎn)速：0～5h，采用氣流攪拌；6h至一級種子培養(yǎng)結(jié)束：采用機(jī)械攪拌，轉(zhuǎn)速控制在60r/min，

????6）一級種子培養(yǎng)時間15～20h。