[發明專利]一種促性腺激素釋放激素類似物的組合物

有效

• 申請號: 201310440157.1
• 申請日: 2013-09-24
• 公開（公告）號: CN104458929A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 韓江彬;張樞;孫考祥;劉萬卉;冷廣意;王濤
• 申請（專利權）人: 山東綠葉制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34
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技術領域

本發明涉及一種促性腺激素釋放激素類似物的組合物，其采用液相色譜與質譜聯用技術測定，同時測定睪酮和促性腺激素釋放激素類似物。

背景技術

促性腺激素釋放激素(LHRH)，是丘腦下部弓狀核合成的10肽，結構為Pyro-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly-NH₂，下丘腦脈沖釋放LHRH，可以刺激垂體釋放促性腺激素釋放激素，1971年Schall從50萬頭豬、羊下丘腦分離出幾毫克的LHRH，并人工合成確證了LHRH的結構，因此獲得諾貝爾醫學與生理學獎。哺乳動物的LHRH具有相同的結構，LHRH的第5～6、6～7、9～10位氨基酸鏈穩定性差，極易受肽鏈內切酶作用而裂解，因而LHRH在體內半衰期僅有2～4min，如果將其6位和10位氨基酸進行置換或去除，可得到9肽LHRH激動劑(agonists)，其化學結構與LHRH極為相似，但穩定性大大提高，半衰期可達5h以上。LHRH激動劑和LHRH拮抗劑(antagonist)，統稱LHRH類似物（LHRHa），它們都是通過與內源性LHRH競爭受體而發揮作用。

促性腺激素釋放激素類似物可因給藥方式和用藥劑量的不同而引起性腺軸的正反雙向反應。生理脈沖式注射LHRH對垂體-性腺軸起興奮與刺激作用，表現為升調節，促進青春期發育，對維持生殖系統的功能具有重要作用。但大量的動物實驗及臨床觀察發現，當給予外源性大劑量的LHRH或其類似物時，對生殖系統有抑制作用。促性腺激素釋放激素類似物最初會刺激垂體分泌促性腺激素(Gn),即黃體生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)。當垂體經過長期的刺激后會進入不應期,促性腺激素的釋放會減少,因而使性類固醇(睪酮)降低至去勢水平。上述作用是可逆轉的。臨床上被用于治療各種激素依賴性疾病如前列腺癌、子宮內膜異位、子宮肌瘤和性早熟等。

目前促性腺激素釋放激素類似物組合物在臨床上主要被用作治療激素依賴性腫瘤如前列腺癌、乳腺癌等。市場上常用的有：①戈舍瑞林(Goserelin)，商品名諾雷德(Zoladex);②亮丙瑞林,商品名抑那通(Leuprorelin);③曲普瑞林(Triptorelin)，商品名達菲林(Diphereline);④布舍瑞林(Buserelin);⑤那法瑞林(Nafarelin)。

促性腺激素釋放激素類似物組合物已上市的產品主要有注射劑和長效緩釋制劑，其臨床常用劑量非常低，臨床應用的不良反應是由于激素的產生被抑制而可能引起的藥理副作用，臨床極低的用量，就可能引起極強的臨床不良反應，因此臨床治療時應密切監測性類固醇血漿水平。檢測藥物體內濃度與藥效指標參數變化，可以優化給藥方案,可更有效發揮藥物作用,提高臨床療效,這些情況都迫切需要建立一種操作簡單，特異性好及高靈敏的檢測技術。

促性腺激素釋放激素類似物（如曲普瑞林、戈舍瑞林）目前多采用放射免疫進行定量，免疫法由于存在交叉反應，影響低濃度定量結果的準確性，并且其具有放射性，對檢測人員有潛在的傷害可能；且其試劑盒非常昂貴，不適合臨床及科研使用；睪酮的定量過程有液質聯用分析和酶聯免疫法。液質聯用分析采用衍生化樣品前處理，操作復雜，同時睪酮做為一種內源性化合物，從分析角度來說，使得分析更加復雜。如果需要同時獲得睪酮和促性腺激素釋放激素類似物的數據，目前采用的是同一時間段采集二個血漿樣品，分別處理，分別測定（Pharmacokinetic/pharmacodynamic?model?of?the?testosterone?effects?of?triptorelin?administered?in?sustained?release?formulations?in?patients?with?prostate?cancer—Journal?of?Pharmacology?and?Experimental?Therapeutics(2012),342(3),788-798），此種處理使得樣品前期處理的工作量大，批次之間可能會造成差異，采用不同檢測數據之間統計分析也會有較大誤差。

為了克服這些缺點，我們將睪酮和促性腺激素釋放激素類似物同時提取出來，進一步采用液質聯用來同時進行睪酮和促性腺激素釋放激素類似物的定量分析。采用此分析過程能降低成本，減少工作量，操作簡單、結果準確、特異性好、靈敏度高，極大的提高分析速度，減少結果偏差；給臨床用藥如給藥間隔、劑量調整等提供準確指導，同時對促性腺激素釋放激素類似物組合物設計提供更好的支持。

發明內容