[發(fā)明專利]一種肉雞用新城疫水包油包水型滅活疫苗制備方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310439027.6
• 申請(qǐng)日: 2013-09-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103566366A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 康亞男;毛雅元;王壽山;張莎;何召慶;楊保收;梁武;李守軍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司
• 主分類號(hào): A61K39/17
• 分類號(hào): A61K39/17;A61K9/113;A61P31/14
• 代理公司: 天津?yàn)I海科緯知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12211
• 代理人: 李莉華

1.一種肉雞用新城疫水包油包水型滅活疫苗制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1）油相的制備：取疫苗佐劑，使用前進(jìn)行充分混勻，并置于28-32℃水浴鍋中預(yù)熱至水浴鍋溫度，即為油相；

2）病毒液的制備：將雞新城疫病毒毒種用滅菌生理鹽水作3000-6000倍稀釋，尿囊腔接種9-11日齡SPF雞胚，每胚0.1ml，37℃孵育；

3）病毒的收獲：選接種后48～120小時(shí)之間死亡且病痕明顯的雞胚，收獲尿囊液，保存于-20℃；

4）病毒的滅活：向病毒液中加入37%(w/w)的福爾馬林溶液，混勻，調(diào)整福爾馬林終濃度至0.05-0.15%(w/w)，置于37℃轉(zhuǎn)速為160-200轉(zhuǎn)/分鐘的搖床中滅活14-18小時(shí)；

5）病毒液的濃縮：將滅活后的雞新城疫病毒液通過(guò)管式離心機(jī)離心，棄去沉淀，將濾過(guò)液用截留分子量為200-500KD的膜包進(jìn)行2倍濃縮，濃縮后的病毒液即為疫苗水相；

6）乳化：將步驟5）制備的疫苗水相置于28-32℃水浴鍋中預(yù)熱至水浴鍋溫度，再將其和油相按為1:0.8-1:1.2的比例（w/w）混合，用磁力攪拌裝置進(jìn)行攪拌，然后采用均質(zhì)機(jī)對(duì)其進(jìn)行乳化，共乳化1-3遍，即得到一種肉雞用新城疫水包油包水型滅活疫苗。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種肉雞用新城疫水包油包水型滅活疫苗制備方法，其特征在于步驟1）所述水浴鍋溫度為31℃。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種肉雞用新城疫水包油包水型滅活疫苗制備方法，其特征在于步驟2）所述的稀釋倍數(shù)為5000倍。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種肉雞用新城疫水包油包水型滅活疫苗制備方法，其特征在于步驟4）所述病毒液中福爾馬林終濃度為0.1(w/w)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種肉雞用新城疫水包油包水型滅活疫苗制備方法，其特征在于步驟4）所述搖床轉(zhuǎn)速為160轉(zhuǎn)/分鐘。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種肉雞用新城疫水包油包水型滅活疫苗制備方法，其特征在于步驟4）所述的滅火時(shí)間為16小時(shí)。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種肉雞用新城疫水包油包水型滅活疫苗制備方法，其特征在于步驟5）所述的膜包的截留分子量為300KD。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種肉雞用新城疫水包油包水型滅活疫苗制備方法，其特征在于步驟6）所述的水相與油相混合比例為1:1(w/w)。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種肉雞用新城疫水包油包水型滅活疫苗制備方法，其特征在于步驟6）所述的乳化次數(shù)為2次。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種肉雞用新城疫水包油包水型滅活疫苗制備方法，其特征在于步驟6）所述的乳化條件為：調(diào)整所述均質(zhì)機(jī)二級(jí)閥壓力為20-30bar、一級(jí)閥壓力200-400bar。