[發(fā)明專利]介導(dǎo)植物雄性生育力的核苷酸序列以及使用其的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310438885.9
• 申請日: 2006-06-22
• 公開（公告）號: CN103642832A
• 公開（公告）日: 2014-03-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: M.C.阿爾伯特森;T.W.福克斯;H.P.赫爾希;G.A.哈夫曼;M.特林內(nèi)爾;Y.吳
• 申請（專利權(quán)）人: 先鋒高級育種國際公司
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;A01H5/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 李波;萬雪松

1.一種方法，用于保持雄性不育植株的純合隱性狀態(tài)，所述方法包括：

（a）提供第一植株，其包含Ms26基因的純合隱性等位基因，并且其是雄性不育的；

（b）向第二植株中引入下述構(gòu)建體，所述第二植株包含Ms26基因的純合隱性等位基因，所述構(gòu)建體為半合狀態(tài)，所述構(gòu)建體包含：

（i）第一核苷酸序列，其包含Ms26核苷酸序列，當(dāng)在第一植株中表達(dá)時(shí)其將恢復(fù)雄性生育力；

（ii）第二核苷酸序列，當(dāng)其表達(dá)時(shí)，會(huì)通過干擾花粉中淀粉的正常積累而抑制所述第二植株中可育雄性配子的功能或形成，從而使得在含有Ms26的隱性等位基因的所述第二植株中產(chǎn)生可育的雄性配子，并且所述雄性配子不含所述構(gòu)建體；以及

（c）用所述第二植株的雄性配子使所述第一植株受精，以產(chǎn)生保持了所述第一植株純合隱性狀態(tài)的后代，

其中，所述第二核苷酸序列是Zea?mays?α淀粉酶基因。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述第一核苷酸序列與第三核苷酸序列可操作地相連，所述第三核苷酸序列指導(dǎo)偏好于雄性植物細(xì)胞的表達(dá)。

3.如權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述第三核苷酸序列僅在存在誘導(dǎo)物質(zhì)或誘導(dǎo)條件時(shí)才具有功能。

4.如權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述第三核苷酸序列選自5126、Ms26和Ms45的雄性組織調(diào)控序列構(gòu)成的組。

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述第二核苷酸序列與第四核苷酸序列可操作地相連，所述第四核苷酸序列指導(dǎo)偏好于雄性配子的表達(dá)。

6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述第二核苷酸序列與第四核苷酸序列可操作地相連，所述第四核苷酸序列指導(dǎo)向雄性配子的表達(dá)。

7.如權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述第四核苷酸序列選自聚半乳糖醛酸酶47基因、Zm13基因、果膠甲基酯酶基因、鈣調(diào)蛋白結(jié)合蛋白基因、肌動(dòng)蛋白解聚因子基因、prolfilin基因和硫酸化五肽phytosulphokine基因的調(diào)控區(qū)域構(gòu)成的組。

8.如權(quán)利要求1所述的方法，其還包含第五核苷酸序列，該序列編碼下述產(chǎn)物，所述產(chǎn)物的表達(dá)能用于選擇具有所述構(gòu)建體的植物細(xì)胞。

9.如權(quán)利要求8所述的方法，其中，所述第五核苷酸序列選自紅色熒光基因、青色熒光蛋白基因、黃色熒光蛋白基因、熒光素酶基因、綠色熒光蛋白基因、花青甙p1基因和草丁膦乙酰轉(zhuǎn)移酶編碼基因構(gòu)成的組。

10.如權(quán)利要求8所述的方法，其中，所述第五核苷酸序列與選自聚半乳糖醛酸酶47基因、Zm13基因、果膠甲基酯酶基因、鈣調(diào)蛋白結(jié)合蛋白基因、肌動(dòng)蛋白解聚因子基因、prolfilin基因和硫酸化五肽phytosulphokine基因構(gòu)成的組的調(diào)控區(qū)域可操作地相連。

11.如權(quán)利要求1所述的方法，其還包括通過鑒定具有所述構(gòu)建體的植株來選擇所述第二植株。

12.一種方法，用于在將第一植株與第二植株雜交時(shí)保持所述第一植株的純合隱性狀態(tài)，所述方法包括：

(a)提供第一植株，其包含Ms26基因的純合隱性等位基因，所述等位基因的表達(dá)導(dǎo)致雄性不育；

(b)向第二植株中引入下述構(gòu)建體，所述第二植株包含Ms26基因的純合隱性等位基因，所述構(gòu)建體為半合狀態(tài)，所述構(gòu)建體包含：

(i)第一核苷酸序列，其包含Ms26核苷酸序列，當(dāng)在所述第一植株中表達(dá)時(shí)其將恢復(fù)雄性生育力；

(ii)第二核苷酸序列，其是Zea?mays?α淀粉酶基因；

(iii)第三核苷酸序列，其與所述第一核苷酸序列可操作地相連，其選自5126、Ms26或Ms45的雄性組織調(diào)控區(qū)域構(gòu)成的組，指導(dǎo)偏好于雄性植物組織的表達(dá)；

(iv)第四核苷酸序列，其與所述第二核苷酸序列可操作地相連，其指導(dǎo)向植物雄性配子的表達(dá)，使得在含有所述隱性等位基因的所述第二植株中產(chǎn)生可育雄性配子，并且使得所述可育雄性配子不含所述構(gòu)建體；以及

(c)用所述第二植株的所述雄性配子使所述第一植株受精，以產(chǎn)生雄性不育、并且保持了所述第一植株純合隱性狀態(tài)的后代。

13.如權(quán)利要求12所述的方法，其還包含第五核苷酸序列，該序列編碼下述產(chǎn)物，所述產(chǎn)物的表達(dá)能用于選擇具有所述構(gòu)建體的植物細(xì)胞。