[發明專利]一種快速誘導川貝母鱗莖產生的方法

有效

• 申請號: 201310437399.5
• 申請日: 2013-09-24
• 公開（公告）號: CN103493733A
• 公開（公告）日: 2014-01-08
• 發明（設計）人: 薛剛;王躍華;余強;王曉蓉
• 申請（專利權）人: 薛剛
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 成都金英專利代理事務所(普通合伙) 51218
• 代理人: 袁英

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體地涉及一種快速誘導川貝母鱗莖產生的方法。

背景技術

川貝母（Fritillaria?cirrhosa?D.Don）是百合科多年生草本植物，以鱗莖入藥，為名貴的川產道地藥材，堪稱藥中之寶。川貝母植株對生長環境要求苛刻，它喜冷陰氣候條件，具有耐寒、喜濕、喜蔭蔽、怕高溫的特性。氣溫達到30℃或地溫超過25℃，植株就會枯萎，在海拔低、氣溫高的地區不能生存，所以川貝母在海拔3500m～4500m的高度才能正常生長。川貝母是重要的治療咳嗽的良藥，用于肺熱燥咳，干咳少痰，陰虛勞嗽，咯痰帶血等癥狀。由于川貝母價格昂貴，加之近年來無計劃盲目的采挖，自然資源日趨枯竭，預計在近幾十年內也難以緩解。組織培養技術生長周期短，繁殖率高，擺脫了大自然中四季、晝夜的變化以及災害性氣候的不利影響，且條件均一，對植物生長極為有利，便于穩定地進行周年培養生產，因此應用組織培養的方法進行川貝母快速繁殖是解決川貝母藥材資源短缺問題的有效方法之一。現有采用川貝母植株葉為外植體誘導鱗莖的產生都要經過愈傷組織培養階段再產生獲得鱗莖。眾所周知，組織培養材料在經過愈傷組織階段時細胞較易產生的染色體變異，從而不利于確保培養鱗莖藥材的遺傳穩定性。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種快速誘導川貝母鱗莖產生的方法，該方法步驟簡單，可操作性強，工藝穩定，適用于在工業化大生產中的廣泛應用。

本發明的目的是通過以下技術方案來實現的：

一種快速誘導川貝母鱗莖產生的方法，它包括以下步驟：

S1：選取誘導產生的直徑在0.5～2cm的組培鱗莖，接入MS+KT?1～3mg·L^-1+NAA?0.1～1?mg·L^-1培養基中培養，培養條件為：培養溫度為12～18℃和無光照條件下培養30～40天，即獲得由組培鱗莖產生的川貝母肉質化幼葉；

S2：選取幼葉上端為白色或黃白色的肉質化幼葉，將其從葉鞘基部切下后，以平放的方式接入誘導鱗莖產生的培養基MS+6-BA?1～3mg·L^-1+TDZ?0.1～0.5mg·L^-1+IAA?0.1～1mg·L^-1+Ad?10～25mg·L^-1中進行培養，培養條件為：將培養材料放在為4～8℃且無光照的培養條件下培養5～10天；

S3：將S2步驟處理后的培養材料放在培養溫度為15～28℃，每天光照4～8h，光照強度為200～600lx的培養條件下培養20～40天。

優選地，S1步驟中所述的組培鱗莖直接為1.2cm，接入MS+KT?2mg·L^-1+NAA?0.5mg·L^-1的培養基中。

優選地，S1步驟中所述的培養溫度為15℃。

優選地，S1步驟中所述的培養條件為無光照條件下培養35天。

優選地，S2步驟中所述的誘導鱗莖產生的培養基為MS+6-BA?2mg·L^-1+TDZ?0.3mg·L^-1+IAA?0.5mg·L^-1+Ad?18mg·L^-1。

優選地，S2步驟中所述的培養溫度為：6℃，且無光照的培養條件下培養7天。

優選地，S3步驟中所述的培養溫度為：20℃，每天光照時間為6h，光照強度為400lx的培養條件下培養30天。

本發明的有益效果在于：

本發明實現了從川貝母肉質幼葉上直接再生川貝母鱗莖，為川貝母藥用部位的快速批量產生提供了一條新途徑。該方法能顯著提高鱗莖的抽芽率，明顯縮短種植周期提高川貝母的產量。該方法步驟簡單，可操作性強，工藝穩定，適用于在工業化大生產中的廣泛應用。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明做進一步的描述，本發明的保護范圍不局限于以下所述：

實施例1：一種快速誘導川貝母鱗莖產生的方法，它包括以下步驟：

S1：選取誘導產生的直徑在0.5～2cm的組培鱗莖，接入MS+KT?1～3mg·L^-1+NAA?0.1～1mg·L^-1培養基中培養，培養條件為：培養溫度為12～18℃和無光照條件下培養30～40天，即獲得由組培鱗莖產生的川貝母肉質化幼葉；