[發明專利]一種甲基苯并呋喃喹啉類的生物探針及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201310434459.8
• 申請日: 2013-09-23
• 公開（公告）號: CN103666452A
• 公開（公告）日: 2014-03-26
• 發明（設計）人: 黃志紓;古練權;杜剛;花聞釗;譚嘉恒
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C09K11/06
• 分類號: C09K11/06;C07F5/02;C07D491/048;G01N21/64;G01N33/52
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 謝敏楠

技術領域

本發明涉及一種生物探針，更具體地，涉及一種甲基苯并呋喃喹啉類的生物探針及其制備方法和應用。

背景技術

????G-四鏈體（G-quadruplex）是一種特殊的DNA二級結構。人類基因組中很多富鳥嘌呤區域具有形成這一結構的能力，包括端粒末端鳥嘌呤重復序列，以及多種基因的啟動子區域，如c-kit、c-myc、c-myb、bcl-2、PDGF、kRAS、VEGF、Rb和胰島素基因等。最新研究表明，很多非編碼區的RNA序列也可以形成G-四鏈體結構，RNA的G-四鏈體結構比DNA更穩定，該結構可能通過阻止基因的翻譯或參與蛋白結合識別的過程而達到抑制腫瘤生長的效果。G-四鏈體結構的形成對于體內的一系列生理過程都存在調控作用。研究證明，某些啟動子區域的G-四鏈體結構會顯著影響基因的轉錄和翻譯水平，因此G-四鏈體結構被認為是起到分子開關的功能，其形成和拆散可能涉及到信號傳導、細胞凋亡和細胞增殖等一系列體內重要的生理過程。所以，在體內或者體外試驗中，能夠特異性地檢測出G-四鏈體結構的存在或者形成，對于研究G-四鏈體結構的相關生物學功能以及開發以G-四鏈體結構為靶點的抗癌藥物等方面都具有非常重要的作用。

目前，在體內和體外檢測G-四鏈體結構的研究都取得了一些進展。由于體內大大過量的雙螺旋DNA的存在，以及復雜的細胞內環境，使得體內的檢測相對于體外檢測需要解決更多的難題，目前已有一些熒光分子可以實現體內G-四鏈體結構的檢測。而目前體外實驗中檢測G-四鏈體結構主要是通過儀器的手段，比如圓二色譜法、核磁共振、表面等離子共振、熒光共振能量轉移等方法，這些方法對儀器和技術操作的要求都較高，而且價格較昂貴，基本上不能普及使用。

最近Laurence?H.?Hurley研究組報道11-位取代的白葉藤堿衍生物并不是直接作用于C-MYC基因啟動子區域的G-四鏈體而產生相應的抗腫瘤效果。那么這種結構的衍生物究竟直接作用于那部分區域的G-四鏈體呢，目前還沒有明確的定論。而本專利合成出的苯并呋喃喹啉生物探針是在11位取代的白葉藤堿衍生物的基礎上，在11位取代側鏈融合具有很強熒光性能的熒光分子，使其能夠產生熒光，以便能夠簡便，快捷，可視化研究該類化合物與G-四鏈體的作用機制，明確定位該類化合物與G-四鏈體的作用靶點。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種很強熒光性能的生物探針。

????根據發明目的，先提供一種甲基苯并呋喃喹啉類的生物探針，化學結構式如I所示：

??????????R₁為H、鹵素、C_1-6的烷基或C_3-6的環烷基；

??????????R₂為H、鹵素?、C_1-6的烷基、C_3-6的環烷基、-O(CH₂)_aCH₃或-O(CH₂)_nNR₄R₅；所述的a為0、1、2或3，

R₃為-NHR₆、-R₇(CH₂)_nR₆;

??????????R₄、R₅為C_1-6的烷基、C_3-6環烷基、哌啶基、嗎啉基、哌嗪基或吡噁啉基；

R₆為或，

R₇為NH、O、S、NCH₃或CH₂

??????????X為C、N、O或S；

??????????Y為無取代基或帶正電荷的C_1-6的烷基；

??????????所述的n為0、1、2、3或4。

????所述的Y優選為無取代基，R₁優選為H、F、I或Br，X優選為O，R₇優選為N(CH₃)。