[發明專利]五味子中木脂素單體的提取分離制備方法

有效

• 申請號: 201310431854.0
• 申請日: 2013-09-18
• 公開（公告）號: CN103467438A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 楚楚;顏繼忠;章詩迪;童勝強;李行諾
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C07D317/70
• 分類號: C07D317/70;C07C43/21;C07C43/23;C07C41/34;C07C41/36;C07B63/00
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王曉普

技術領域

本發明屬于天然藥物化學領域，涉及一種快速高效的聯合制備方法從五味子中提取、分離純化木脂素單體成分。具體涉及用超臨界提取法結合高速逆流色譜法提取分離制備五味子中的單體成分。

背景技術

五味子為木蘭科植物五味子Schisandra?chinensis(Turcz.)Baill或華中五味子Schisandra?sphenanthera?Rehd.et?Wils.的成熟果實。前者習稱“北五味子”，后者習稱“南五味子”。始載于《神農本草經》，列為上品。五味子性溫，味甘、酸，歸肺、心、腎經。具有收斂固澀，益氣生津，補腎寧心的功效。可用于治療久咳虛喘、自汗盜汗、久瀉不止、津傷口渴、心悸、失眠多夢等?，F代藥理學研究表明五味子具有抗腫瘤、抗炎、抗氧化、保肝、神經保護等多種藥理作用。

五味子中含有木脂素、揮發油、有機酸、多糖、三萜及倍半萜等多種化學成分，其中木脂素為主要有效成分。木脂素類成分中含量較高的包括五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素等。隨著研究的深入，以上幾種主要的木脂素類成分均被證實具有良好的藥理活性，如五味子醇甲具有抗氧化、抗衰老、保肝等藥理作用，五味子甲素具有保肝等藥理活性，五味子乙素具有護肝、抗癌、抗病毒、抗潰瘍、抗氧化、神經保護等作用，因此，開發一種快速、高效、低成本的制備方法對該類成分的進一步研究開發來說至關重要。

通過長期研究，對五味子中總木脂素類成分的提取工藝已較為成熟，但對木脂素單體類成分的制備大多集中在五味子醇甲、五味子醇乙的分離純化上，而對五味子甲素、五味子乙素、五味子酯乙等單體的分離純化報道較少。文獻中有以溶劑提取法、超聲提取法、微波提取法、超臨界流體萃取法、酶解法輔助超聲波提取法、超高壓提取法等方法對五味子中木脂素類成分進行提取，以硅膠柱色譜法、大孔樹脂柱色譜法、高速逆流色譜法對木脂素單體進行分離的。大多提取分離的流程是以回流法提取，采用一定的方法對木脂素進行富集除雜，進而再以柱色譜對其進行分離純化。如申請號為201210144871.1的發明專利公開了“一種純化五味子醇甲的新方法”。采用微波逆流提取、大孔樹脂分離純化和柱層析進一步純化，最終得到了五味子醇甲單體（含量98％以上）。如申請號為200910010631.0的發明專利中公開了“一種制備五味子醇甲和五味子醇乙的新工藝”，提取工藝為將含有五味子醇甲和五味子醇乙的提取液用有機溶劑萃取，萃取物經過反復柱層析分離后，收集含有五味子醇甲和五味子醇乙的流份，得到純度均大于98%五味子醇甲和五味子醇乙。再如申請號為201010510828.3的發明專利中公開了“一種從五味子中提取五味子甲素的工藝”，使用超聲輔助石油醚提取和堿醇反萃取的方法制備木脂素總提物，再兩次通過硅膠氧化鋁混合柱層析，洗脫，回收溶劑，石油醚-丙酮或環己烷-乙醇重結晶，干燥，最終獲得五味子甲素單體。

不難看出，五味子中木脂素單體的提取分離純化工藝存在步驟繁瑣，制備周期長，操作復雜，耗時耗力，得率低等各種弊端。專利號為ZL200910242188.X的發明專利中公開了一種“五味子單體成分的分離制備方法”，該專利較之前方法，純化步驟采用高速逆流色譜，使得純化周期得到了縮短，可同時制備多個木脂素單體。但樣品前處理繁瑣，需通過提取、萃取、硅膠柱層析等多步，使得整個制備過程仍較復雜。

超臨界流體萃取作為一種環保、快速、且可工業化的提取手段，目前正廣泛用于各種天然產物的提取中。五味子中的木脂素類成分極性較小，用該方法對其進行提取具有其他方法不可比擬的優勢。如專利號為ZL200610041566.4、ZL201010119871.7的發明專利中均采用了超臨界流體萃取法提取五味子中的總木脂素類成分。但至今未有將超臨界提取與高速逆流色譜分離純化五味子中木脂素單體的報道。

發明內容

本發明針對現有工藝中的不足，提供一種從五味子藥材中聯合使用超臨界萃取和高速逆流色譜提取、分離純化木脂素單體五味子甲素、五味子乙素、五味子酯乙、五味子醇甲、五味子醇乙的方法，該方法工藝簡便，效率高，快速，產品純度大于92％。

本發明公開了一種以超臨界流體萃取五味子藥材粉末，所得超臨界萃取物以高速逆流色譜進行分離純化，最終可同時獲得純度高于92%的五味子甲素、五味子乙素、五味子酯乙、五味子醇甲、五味子醇乙單體木脂素成分。這種方法較傳統的提取分離純化方法更為快速、簡便、高效。

本發明采用的技術方案是：