[發(fā)明專利]一種血液和尿液中亞硝酸鹽的高靈敏快速檢測方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201310428467.1
• 申請日: 2013-09-18
• 公開（公告）號: CN104458712A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發(fā)明（設計）人: 楊亞玲;王軍;趙嬌;寧金艷
• 申請（專利權(quán)）人: 云南健牛生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種血液和尿液中亞硝酸鹽快速檢測方法，包括以下步驟：

（1）制備亞硝酸鹽標準色階溶液：取濃度為5.0μg/mL?的NO₂^-?標準溶液0.005、0.01、0.05、0.10、0.30、0.70、1.0mL于刻度離心管中，用蒸餾水稀釋至5mL，加入GriessA試劑250μL，混合均勻；1min后加入GriessB試劑250μL，混合均勻，加入非離子表面活性劑0.1mL，降濁點和相分離促進劑氯化鈉或硫酸銨0.1～0.5g或有機醇0.05～0.2mL，渦旋混合1min，離心5～15min分相，溶液上層表面活性劑相出現(xiàn)由淺至深的紅色環(huán)色階；

（2）檢測尿液中的亞硝酸鹽：取10mL尿液，硫酸鋅0.4～1.0g，加入活性炭0.5～1.0g，混合均勻，離心脫色，濾紙過濾除去活性炭；取5mL脫色后的尿液，加入GriessA試劑250μL，混合均勻；1min后加入GriessB試劑250μL，混合均勻，放置5min后，加入非離子表面活性劑0.1mL，降濁點和相分離促進劑氯化鈉或硫酸銨0.1～0.5g或有機醇0.05～0.2mL，渦旋混合1min，離心5～15min分相，將溶液上層表面活性劑相的顏色與步驟（1）標準色階比較，判斷其含量；

（3）檢測血液中的亞硝酸鹽：取5?mL新鮮血液，放入離心機中離心，取上清液，加入0.1mol/L氫氧化鈉溶液0.2mL和硫酸鋅0.2g,混合均勻，加入乙腈1mL，離心分離，取上清液2mL于10mL離心管中用蒸餾水定容至5mL,加入GriessA試劑250μL，混合均勻；1min后加入GriessB試劑250μL，混合均勻，放置5min,?加入非離子表面活性劑0.2mL，降濁點和相分離促進劑氯化鈉或硫酸銨0.1～0.5g或有機醇0.05～0.2mL，渦旋混合1min，離心5～15min分相，將溶液上層表面活性劑相的顏色與步驟（1）標準色階比較，判斷其含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述的GriessA試劑為50mg對氨基苯磺酸溶于5mL鹽酸（0.5mol/L）；GriessB試劑為4mg?N-1-萘乙二胺鹽酸鹽溶于4mL甲醇（50%）。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述非離子表面活性劑包括脂肪醇聚氧乙烯醚AEO-3、AEO-7、AE0-9中之一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：所述的降濁點和相分離促進劑，有機醇包括正辛醇、正戊醇、正癸醇中的一種。

5.權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于：樣品檢測中所述的離心條件為離心時間5～15min，離心速率3000～10000r／min。