[發明專利]一種生物敏感芯片及其制備方法和用途有效
| 申請號： | 201310428425.8 | 申請日： | 2013-09-18 |
| 公開（公告）號： | CN103472237A | 公開（公告）日： | 2013-12-25 |
| 發明（設計）人： | 郄明蓉;丁一;段瑞岐;李林;袁嘉玲;程矗;趙倩穎 | 申請（專利權）人： | 四川大學華西第二醫院 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 成都虹橋專利事務所(普通合伙) 51124 | 代理人： | 梁鑫 |
| 地址： | 610041 四川*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 生物 敏感 芯片 及其 制備 方法 用途 | ||
1.一種生物敏感芯片，其特征在于：包括有銀納米芯片、固定在銀納米芯片上的11-巰基十一烷酸以及與11-巰基十一烷酸連接的抗體。
2.根據權利要求1所述的生物敏感芯片，其特征在于：所述的與11-巰基十一烷酸連接的抗體為：抗白蛋白單克隆抗體、抗SCCA單克隆抗體或抗HE4單克隆抗體。
3.權利要求1或2所述的生物敏感芯片的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：
a、在15～25℃下將銀納米芯片浸泡于0.1～5mM?11-巰基十一烷酸無水乙醇溶液中6～24h，分別用無水乙醇、超純水清洗，氮氣吹干；
b、在15～25℃下將步驟a所得的芯片浸泡在7.5～150mM?EDC.HCl和1.5～30mM?NHS等體積混合水溶液中活化表面羧基1～10小時，用超純水清洗，氮氣吹干；
c、在步驟b所得的芯片表面滴加濃度為1μg/ml～30μg/ml、體積為1μl～30μl的單克隆抗體，在1～10℃冰箱中冷藏6～14h，PBS清洗，氮氣吹干。
4.根據權利要求3所述的生物敏感芯片的制備方法，其特征在于：步驟a中，溫度為20℃，11-巰基十一烷酸的濃度為1mM，浸泡時間為12h。
5.根據權利要求3所述的生物敏感芯片的制備方法，其特征在于：步驟b中，溫度為20℃，EDC.HCl的濃度為75mM，NHS的濃度為15mM，表面活化羧基2h。
6.根據權利要求3所述的生物敏感芯片的制備方法，其特征在于：步驟c中，冷藏溫度為4℃，冷藏時間為10h。
7.根據權利要求3所述的生物敏感芯片的制備方法，其特征在于：步驟c中，采用pH=7.4、0.01M的PBS來稀釋單克隆抗體和清洗芯片；滴加抗SCCA單克隆抗體濃度為5μg/ml、抗白蛋白單克隆抗體濃度為10μg/ml或抗HE4單克隆抗體濃度為10μg/ml，體積均為10μl。
8.根據權利要求3～7所述的生物敏感芯片制備方法，其特征在于：在制備的過程中，分別對銀納米芯片以及a、b和c每步步驟所制備出的芯片進行紫外最大吸收波長檢測。
9.權利要求1或2所述的生物敏感芯片的用途，其特征在于：可以用來對抗原標準品進行檢測，檢測方法包括以下步驟：在權利要求3～8所制備的生物敏感芯片表面滴加目標蛋白，33～39℃水浴20～120min，超純水清洗，氮氣吹干，檢測紫外最大吸收波長。
10.根據權利要求9所述的生物敏感芯片的用途，其特征在于：水浴溫度為37℃，水浴時間為60min。
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