[發(fā)明專利]一種生物敏感芯片及其制備方法和用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310428425.8
• 申請日: 2013-09-18
• 公開（公告）號: CN103472237A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郄明蓉;丁一;段瑞岐;李林;袁嘉玲;程矗;趙倩穎
• 申請（專利權(quán)）人: 四川大學(xué)華西第二醫(yī)院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 成都虹橋?qū)＠聞?wù)所(普通合伙) 51124
• 代理人: 梁鑫

1.一種生物敏感芯片，其特征在于：包括有銀納米芯片、固定在銀納米芯片上的11-巰基十一烷酸以及與11-巰基十一烷酸連接的抗體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的生物敏感芯片，其特征在于：所述的與11-巰基十一烷酸連接的抗體為：抗白蛋白單克隆抗體、抗SCCA單克隆抗體或抗HE4單克隆抗體。

3.權(quán)利要求1或2所述的生物敏感芯片的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

a、在15～25℃下將銀納米芯片浸泡于0.1～5mM?11-巰基十一烷酸無水乙醇溶液中6～24h，分別用無水乙醇、超純水清洗，氮?dú)獯蹈桑?/p>

b、在15～25℃下將步驟a所得的芯片浸泡在7.5～150mM?EDC.HCl和1.5～30mM?NHS等體積混合水溶液中活化表面羧基1～10小時，用超純水清洗，氮?dú)獯蹈桑?/p>

c、在步驟b所得的芯片表面滴加濃度為1μg/ml～30μg/ml、體積為1μl～30μl的單克隆抗體，在1～10℃冰箱中冷藏6～14h，PBS清洗，氮?dú)獯蹈伞?/p>

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物敏感芯片的制備方法，其特征在于：步驟a中，溫度為20℃，11-巰基十一烷酸的濃度為1mM，浸泡時間為12h。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物敏感芯片的制備方法，其特征在于：步驟b中，溫度為20℃，EDC.HCl的濃度為75mM，NHS的濃度為15mM，表面活化羧基2h。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物敏感芯片的制備方法，其特征在于：步驟c中，冷藏溫度為4℃，冷藏時間為10h。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物敏感芯片的制備方法，其特征在于：步驟c中，采用pH=7.4、0.01M的PBS來稀釋單克隆抗體和清洗芯片；滴加抗SCCA單克隆抗體濃度為5μg/ml、抗白蛋白單克隆抗體濃度為10μg/ml或抗HE4單克隆抗體濃度為10μg/ml，體積均為10μl。

8.根據(jù)權(quán)利要求3～7所述的生物敏感芯片制備方法，其特征在于：在制備的過程中，分別對銀納米芯片以及a、b和c每步步驟所制備出的芯片進(jìn)行紫外最大吸收波長檢測。

9.權(quán)利要求1或2所述的生物敏感芯片的用途，其特征在于：可以用來對抗原標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行檢測，檢測方法包括以下步驟：在權(quán)利要求3～8所制備的生物敏感芯片表面滴加目標(biāo)蛋白，33～39℃水浴20～120min，超純水清洗，氮?dú)獯蹈桑瑱z測紫外最大吸收波長。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的生物敏感芯片的用途，其特征在于：水浴溫度為37℃，水浴時間為60min。