[發明專利]一種以甘油殘渣為原料制備菌體蛋白的方法

有效

• 申請號: 201310426766.1
• 申請日: 2013-09-18
• 公開（公告）號: CN103461673A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 陳列歡;繆昕鑫;張煒
• 申請（專利權）人: 肇慶長龍生物科技有限公司
• 主分類號: A23K1/16
• 分類號: A23K1/16;A23K1/00
• 代理公司: 廣州三環專利代理有限公司 44202
• 代理人: 張帥

技術領域

本發明涉及一種微生物發酵菌體蛋白的制備方法及其應用，具體涉及一種以甘油殘渣為原料制備菌體蛋白的方法及其用于制備動物飼料中的應用，屬于生物飼料領域。?

背景技術

甘油殘渣是甘油經過蒸餾工藝處理后產生的一種含有甘油、聚甘油、水、鹽等成分混合物。由于甘油蒸餾殘渣的組分復雜，其除雜、脫色非常困難，產生了后續處理工藝復雜繁瑣，處理成本高的瓶頸。因此甘油殘渣長久以來被作為廢物稀釋后排放或填埋，造成了嚴重的環境污染。?

目前對甘油蒸餾殘渣的處理利用，主要集中在提煉其中的聚甘油。2008年中國專利申請中公開了“從甘油渣中提取聚甘油的方法”，該方法采用添加有機溶劑萃取等多次工藝處理甘油殘渣達到回收聚甘油的目的；魏代軍等通過對甘油殘渣預處理，脫鹽，乙醇回收等多重工藝實現對甘油殘渣的回收利用（魏代軍等.甘油蒸餾殘渣的回收利用，表面活性劑工業，2000，2，23～24）。上述方法都是通過采取復雜工藝處理甘油殘渣，在二次回收利用甘油殘渣中增加了各種成本的投入，同時產生二次污染。?

環境中存在的許多有機物，都能找到可以使之降解或轉化它的微生物。同時微生物處理技術因其生產費用低、無二次污染等特點被視為應用前景廣闊的技術。甘油殘渣中主要成分就是甘油和聚甘油，這兩種有機物可以作為微生物的碳源。因此借助微生物轉化技術，將甘油殘渣作為微生物生長的原料，使其轉化為菌體蛋白，一方面消除甘油殘渣帶來的環境污染問題，另一方面變廢為寶實現菌體蛋白的生產。?

發明內容

本發明的目的是提供一種以甘油殘渣為原料制備菌體蛋白的制備方法。?

本發明采用的技術方案是：?

???本發明的一個目的是公開一種以甘油殘渣為原料制備菌體蛋白的方法，該制備方法具體包括如下步驟：

1）將甘油殘渣用水稀釋得甘油殘渣稀釋液，其中甘油殘渣的質量分數為15～40%；

2）向甘油殘渣稀釋液中分別加入占甘油殘渣稀釋液質量分數為1～5%的非蛋白氮源，0.5～1.5%的磷酸鹽，0.05～0.5%的鎂鹽，1～5%的氯化鈉，混合均勻后用鹽酸調節混合液的pH值為6.5～7.5，可得菌種的發酵培養基；

3）將發酵培養基裝入搖瓶，并向發酵培養基中接入發酵菌種，菌種接種量為發酵培養基的4～8%，接種完成后將搖瓶置于搖床上，調整搖床轉速為150r?/min，發酵溫度為30～32℃進行發酵培養72～96h；

4）發酵完成后，使用離心機將發酵液離心得到沉淀物，其中離心轉速為4000?r/min，離心時間為20min；將沉淀物置于真空干燥箱中50～65℃烘至恒重得菌體蛋白粗品，將所得菌體蛋白粗品用粉碎機粉碎后即可得到本發明菌體蛋白。

上述所述制備方法中，所述的磷酸鹽為磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉或焦磷酸中的一種或多種。所述的非蛋白氮源為酵母提取物、蛋白胨、硫酸銨、氯化銨、硝酸鉀、和硝酸鈉的一種或多種。所述的鎂鹽為硫酸鎂和氯化鎂中一種或兩種。?

上述所述制備方法中，所述的菌種為熱帶假絲酵母（Candida?tropicalis）、灰綠葡萄孢菌（Botrytiscinerea）和白地霉（Geotrichum?candidum）中一種或多種。所述步驟3）中搖瓶的裝液量為20%，如500?mL的三角瓶裝入100?mL的發酵培養基，或者250mL的三角瓶裝入100?mL的發酵培養基。?

在此基礎上，本發明的另一目的是請求保護一種采用上述制備方法制備得到的菌體蛋白。?

本發明的再一目的是請求保護上述制備方法制備得到的菌體蛋白的一種具體用途，即所述菌體蛋白在制備動物飼料中的用途。所述菌體蛋白首先制備成菌體蛋白飼料，然后與普通飼料混合使用。其中：?

作為本發明所優選的一種實施方式，所述的動物飼料為雞飼料，所述菌體蛋白飼料的質量百分組成為玉米45%，豆粕43.7%，菌體蛋白粉4.2%，大豆油2.8%，碳酸鈣1%，蛋氨酸0.2%，食鹽0.5%，膽堿0.2%，多維0.4%，填充劑2%；所述菌體蛋白飼料和普通飼料的混合比優選為28：2。

作為本發明所優選的另一種實施方式，所述的動物飼料為犢牛飼料，所述菌體蛋白飼料的質量百分組成：玉米70%，豆粕16.6%，菌體蛋白粉6%，麥麩4%，磷酸輕鈣1%，食鹽0.4%，預混料?2%；所述菌體蛋白飼料和普通飼料的混合比優選為27：3。?