[發明專利]一種治療內毒素血癥的中藥有效部位的制備方法

無效

• 申請號: 201310426523.8
• 申請日: 2013-09-18
• 公開（公告）號: CN103446378A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 梁僑麗;崔曉東;李軍;鄒娜姝;呂高虹;袁冬平
• 申請（專利權）人: 南京中醫藥大學
• 主分類號: A61K36/89
• 分類號: A61K36/89;A61P31/04;A61K125/00
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技術領域

本發明涉及從中藥中提取有效部位的制備和應用領域,具體的說是涉及從荊三棱植物中得到的一種能治療內毒素血癥的有效部位及其制備方法。

背景技術

內毒素存在于革蘭氏陰性菌(gram-negative?bacteria,G^-細菌)菌體的細胞壁內,由細菌死后的細胞壁崩解時釋出,活菌亦可以發皰形式將內毒素釋出,其化學成分為脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),脂多糖的類脂A是LPS的“毒力中心”。少量的內毒素對促使肝臟網狀內皮系統處于激活狀態有一定意義,但是當大量的內毒素進入血循環時,會激發機體免疫細胞大量釋放多種細胞因子,破壞機體炎癥反應平衡,產生內毒素血癥,從而造成廣泛的病理反應,如全身炎癥反應綜合征(SIRS)、多器官功能不全綜合征(MODS)、多器官功能衰竭(MOF)等。近年來,許多研究表明感染性休克和繼發性多功能不全綜合征是膿毒癥患者的主要死亡原因。以往在防治與治療內毒素血癥時,往往從抑制產生內毒素的革蘭氏陰性菌的菌群增殖和減少腸道內毒素的吸收為出發點,如通過補充腸道正常菌群、保持腸粘膜的穩定性來減少腸道內毒素的產生和吸收。以上治療方法往往用到抗生素,但是大量的抗生素的應用會出現耐藥性菌,同時被殺死的革蘭氏陰性菌會突然釋放大量內毒素引起內毒素血癥的亢進或內毒素休克。因此在隨后的大量研究中,開發了一些其他藥物,如直接拮抗內毒素的類脂A結構類似物；具有殺菌、中和內毒素、抑制免疫細胞活性作用的抗內毒素蛋白及多肽類。然而臨床研究表明,迄今為止,還沒有一種這些類型的藥物能夠顯著降低內毒素血癥患者的死亡率。針對內毒素血癥引起全身炎癥的反應,近些年學者提出了多靶點藥物可能是防治與治療內毒素血癥的一個方向。中藥具有多靶點作用,對以中醫理論表述病機為“熱毒內蘊、瘀血內阻”的內毒素血癥的防治與治療具有重要價值。

荊三棱(Scirpus?yagara?Ohwi)為莎草科藨草屬植物,其干燥塊莖在唐代就作為中藥三棱使用,是三棱最早使用的品種。其在我國的東北、浙江、江蘇、安徽等地區均有分布。荊三棱,性平、味苦,入肝、脾經,具有破血行氣、消積止痛功能,多用于月經不調,積聚結塊等病癥,是臨床常用的活血化瘀中藥。目前已從荊三棱塊莖中分離得到有黃酮類、苯丙素類、二苯乙烯類、4′-苯基異香豆素類、酚酸類等化合物(Kang?kun,et?al.Nat?Prod?Res?Dev,2008,20：639-640,649；張鐵軍,等.現代藥物與臨床,2009,24(1)：36-38；崔曉東,等.中國藥學學報,2012,47(24)：1987-1989；Qiaoli?Liang,et?al.Fitoterapia,2013,84(1)：170-173)。近些年國內外學者發現部分二苯乙烯類、4′-苯基異香豆素類和酚酸類化合物具有抗炎、抗HIV等方面的藥理作用(Li?Ou,et?al.Biol.Pharm.Bull,2003,26(11)：1511-1516；Gu-xunYang,et?al.Planta?Med,2005,71：569-571)。迄今,尚未見到有關荊三棱有效部位具有治療內毒素血癥的報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種抗內毒素血癥的中藥有效部位的制備方法。本發明的制備方法工藝操作簡單,能夠提供性能穩定、藥理活性好的荊三棱植物有效部位。

一種治療內毒素血癥的中藥有效部位的制備方法,包括以下步驟：

(1)提取：取荊三棱的干燥塊莖,粉碎,用提取溶劑浸泡過夜,再用提取溶劑加熱回流提取,合并提取液,減壓濃縮至無醇味。

(2)柱層析：將步驟(1)的濃縮液加1.5倍水稀釋成懸浮液,再分別用極性由小到大的萃取溶劑進行萃取,得到萃取液,萃取液經濃縮后,上正相柱層析用洗脫溶劑進行洗脫；收集洗脫液,干燥,得到荊三棱有效部位。

上述步驟(1)所述的提取溶劑為乙醇水溶液,該提取溶劑使用安全廉價；其濃度為70％～95％,該濃度范圍內的乙醇水溶液對植物組織的滲透性較好,非常適合荊三棱等塊莖類藥材的提取,從而能充分的獲取荊三棱有效部位的活性成分。

上述步驟(1)每次加入相當于藥材的3～4倍重量的提取溶劑,在90℃～100℃加熱回流提取,每次提取時間為2～3h,提取2～3次。

上述步驟(2)所述的萃取溶劑至少包括乙酸乙酯。

上述步驟(2)所述的正相柱層析為硅膠柱層析,硅膠目數為100-200目,洗脫溶劑至少包括由體積比為100：1、100：10、100：12的石油醚與乙酸乙酯組成的洗脫溶劑。