[發(fā)明專利]啤酒酵母可溶性1,3-β-D-葡聚糖的生物提煉及純化方法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201310425105.7 | 申請日： | 2013-09-18 |
| 公開（公告）號： | CN103468765A | 公開（公告）日： | 2013-12-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 李皎;楊國武;汪大敏;鄧媛 | 申請（專利權(quán)）人： | 陜西省微生物研究所 |
| 主分類號： | C12P19/14 | 分類號： | C12P19/14;C12P19/04 |
| 代理公司： | 西安新思維專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 61114 | 代理人： | 黃秦芳 |
| 地址： | 710043*** | 國省代碼： | 陜西;61 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 啤酒 酵母 可溶性 聚糖 生物 提煉 純化 方法 | ||
1.啤酒酵母可溶性1，3-β-D-葡聚糖的生物提煉及純化方法，其特征在于：
由以下步驟實(shí)現(xiàn)：
步驟一：發(fā)酵罐底取新鮮酵母泥120-890g，以過量蒸餾水反復(fù)洗滌，每分鐘4000轉(zhuǎn)離心20分鐘，直到上清液無色清澈、苯酚-硫酸法測不到糖為止；
步驟二：補(bǔ)水到5Ｌ，攪拌，固形物含量為2-15%，把超聲波細(xì)胞粉碎儀的超聲波發(fā)生器置于混合液中，超聲功率400-600W，工作時(shí)間5-10秒，間隔時(shí)間10秒，總超聲時(shí)間20-30分鐘，進(jìn)行破壁；
步驟三：繼續(xù)補(bǔ)水5Ｌ進(jìn)行稀釋，調(diào)pH值6.0-8.0，煮沸后冷卻到50±2℃，按酵母干重的0.5-1.5%添加甘露聚糖酶，按200-250U?/g添加中性蛋白酶，反應(yīng)24-28小時(shí)；
步驟四：調(diào)pH5.0，按酵母干重的0.5-1.5%添加β-葡聚糖酶，反應(yīng)4小時(shí)后取30%，離心分離，收集上清液，不溶物質(zhì)返回最初反應(yīng)體系中，同時(shí)補(bǔ)水到開始反應(yīng)時(shí)的體積，此過程不斷循環(huán)，5-16小時(shí)后終止反應(yīng)，合并上清液；
步驟五：上清液煮沸，降溫到40℃，在0.2MPa條件下，使料液先通過PES-10，30分鐘，截留分子量10kD，收集透過液，使之再通過PES-50，30分鐘，截留分子量50kD，在此過程中不斷補(bǔ)充上清液，采取外源冷循環(huán)水降溫的方法使溫度恒定在40℃；
步驟六：收集PES-50的濃縮液直到膜通量低于25?L/m-2??h-1，將濃縮液真空回旋干燥，得到干粉狀可溶性1,3-β-D-葡聚糖。
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