[發明專利]一種提取日本花柏酸的方法

無效

• 申請號: 201310422957.0
• 申請日: 2013-09-17
• 公開（公告）號: CN103450012A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 楊存
• 申請（專利權）人: 南京通澤農業科技有限公司
• 主分類號: C07C62/32
• 分類號: C07C62/32;C07C51/42
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于中藥化學技術領域，涉及一種一種提取日本花柏酸的方法。

背景技術

日本花柏酸（Pisiferic?acid），無色針晶，mp.155-160℃，分子式為C₂₀H₂₈O₃，分子量為765，結構式為：

日本花柏酸是從柏科(Cupressaceae)?日本花柏?Chamaecyparis?pisifera(Sieb.et?Zucc.)Endl.葉中分離得到一種二萜類化合物。藥理研究表明，日本花柏酸具有抗菌作用，對革蘭陽性菌、陰性菌和Pyricularia?oryzae有抑制作用，對假單細胞菌屬、普通變形菌、金黃色萄萄球菌、枯草桿菌等有抑制作用；具有細胞毒活性，對HeLa-S3細胞有活性，抑制HeLa細胞的DNA合成；具有抗氧作用，強于VE；對室內塵埃中的螨有殺滅作用,對家蠅有輕度殺滅活性。

現有技術中，尚未見制備日本花柏酸的生產工藝的相關專利報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種提取日本花柏酸的方法。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

（1）將日本花柏葉粉碎成粗粉，投入萃取釜中進行超臨界流體萃取，向萃取罐內泵入CO₂和夾帶劑，萃取壓力為28-45MPa，萃取溫度為35-55℃，提取時間1-3小時，解析壓力為6-8MPa，解析溫度為30-40℃，收集萃取物；

（2）將所得萃取物用乙醇溶解，干法上樣至高壓硅膠柱層析純化，二氯甲烷-丙酮溶劑系統梯度洗脫，收集日本花柏酸流分，減壓濃縮，冷卻析晶，得粗晶；

（3）將粗晶用乙酸乙酯-乙醇重結晶得到日本花柏酸。

所述步驟（1）中夾帶劑為90%乙醇溶液。

所述步驟（2）中所述高壓硅膠柱層析，硅膠目數為200-300目，柱壓為3-5MPa，柱內徑為50-200mm，層析柱徑高比為1：7-18。

所述步驟（2）中所述二氯甲烷-丙酮的體積比為13-2:3。

所述步驟（3）中所述乙酸乙酯-乙醇的體積比為9:1-2。

本發明的有益效果是：本發明工藝步驟少，耗時短，得率高，易規?；a；采用高壓層析柱，上樣量大，生產周期短，分離度好，產品純度高。

下面將結合具體實施方式進一步說明本發明，但本發明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。

具體實施方式

實施例1：

稱取日本花柏葉1000g粉碎成粗粉，投入到超臨界萃取釜中，以CO₂為溶劑，90%的乙醇溶液為夾帶劑，設定萃取柱溫度為35℃、壓力為28MPa，分離器的溫度為30℃、壓力為6MPa，CO₂流量為18L/h，萃取時間為1h，收集萃取物。稱取經活化的300目的硅膠裝入不銹鋼層析柱中（內徑100mm，徑高比為1:12），將所得萃取物用乙醇溶解，干法上樣至高壓硅膠柱，用二氯甲烷-丙酮按體積比13:3、5:3、2:3梯度洗脫，收集日本花柏酸流分，減壓濃縮，冷卻析晶，過濾得粗晶，再用體積比為9:2的二氯甲烷-甲醇重結晶，濾出晶體，干燥得成品1.04g，日本花柏酸含量為90.9%。

實施例2：

稱取日本花柏葉1000g粉碎成粗粉，投入到超臨界萃取釜中，以CO₂為溶劑，90%的乙醇溶液為夾帶劑，設定萃取柱溫度為42℃、壓力為37MPa，分離器的溫度為38℃、壓力為6MPa，CO₂流量為20L/h，萃取時間為3h，收集萃取物。稱取經活化的300目的硅膠裝入不銹鋼層析柱中（內徑50mm，徑高比為1:7），將所得萃取物用乙醇溶解，干法上樣至高壓硅膠柱，用二氯甲烷-丙酮體積比13:3、6:3、2:3梯度洗脫，收集日本花柏酸流分，減壓濃縮，冷卻析晶，過濾得粗晶，再用體積比為9:1的二氯甲烷-甲醇重結晶，濾出晶體，干燥得成品1.20g，日本花柏酸含量為91.8%。

實施例3：