[發(fā)明專利]一種瓊膠半乳聚糖硫酸酯的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310422567.3
• 申請日: 2013-09-10
• 公開（公告）號: CN103467625A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 苑全云;付曉婷;林洪
• 申請（專利權(quán)）人: 南京海蘭琪生物科技有限公司
• 主分類號: C08B37/12
• 分類號: C08B37/12
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種瓊膠半乳聚糖硫酸酯的制備方法

背景技術(shù)

瓊膠(agar)由電中性的瓊脂糖(agarose)和帶負(fù)電的硫瓊膠(agaropectin)兩部分組成。瓊脂糖分子的基本骨架為β-D-半乳糖殘基和3，6-內(nèi)醚-α-L-吡喃半乳糖殘基，硫瓊膠是瓊脂糖分子結(jié)合有硫酸酯(鹽)、葡萄糖醛酸和丙酮酸醛的復(fù)雜多糖。海洋動植物含有的硫酸多糖，已被證實具有抗凝血、抗腫瘤、抗病毒、抗炎、調(diào)節(jié)血脂及提高免疫力等多種生理活性，在功能性食品及新藥開發(fā)方面展現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景，已成為目前多糖化合物研究領(lǐng)域的熱點。然而目前有關(guān)瓊膠的報道多集中于對瓊脂糖的研究，未見有關(guān)瓊膠半乳聚糖硫酸酯的制備方法的報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種瓊膠半乳聚糖硫酸酯的制備方法。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

瓊膠半乳聚糖硫酸酯的制備方法，包括以下步驟：

1)膠液配置：配置0.5％-5％(w／v)瓊膠溶液1L，在90-150攝氏度下溶解，在50-90攝氏度保溫；

2)吸附：樹脂1kg經(jīng)1-3M酸處理0.5-1小時后，用蒸餾水洗至pH6.5-7.0，再經(jīng)1-3M堿處理0.5-1小時后，用蒸餾水洗至pH7.0-7.4，過濾除去蒸餾水，加入步驟1)中配置好的瓊膠液，在50-90攝氏度下保溫攪拌2-3小時；

3)解吸：過濾得樹脂，加入1L1.0-3.0M?EDTA-2Na，在50-90攝氏度保溫攪拌3小時，過濾得濾液；

4)濃縮精制：將步驟3)中的濾液經(jīng)截留分子量為10kDa-100kDa的中空纖維膜濃縮至0.1-0.3L，加入濃縮液1-3倍體積的零攝氏度預(yù)冷的95％(v／v)的乙醇溶液，于室溫下沉淀3-6小時，所得沉淀經(jīng)干燥、粉碎后即得到瓊膠半乳聚糖硫酸酯粉末。

其中，所述酸堿處理中，所用的酸為鹽酸、硫酸、硝酸、磷酸、醋酸中的一種或幾種，所用的堿為氫氧化鈉、氫氧化鈣、氫氧化鉀、氧化鉀、氨水中的一種或幾種。

其中，所述樹脂為陰離子交換樹脂、大孔樹脂中的一種或幾種。

附圖說明

圖1為本發(fā)明制備方法制備得到的瓊膠半乳聚糖硫酸酯的紅外圖譜。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步說明，但本發(fā)明保護(hù)范圍不僅限于此。

實施例一

本實施例采用以下方法，其中包括以下步驟：

1)膠液配置：配置2％(w／v)瓊膠溶液1L，在120攝氏度在進(jìn)行溶解，在80攝氏度保溫；

2)吸附：DEAE-cellulose陰離子交換樹脂1kg經(jīng)1.5M?HCl處理0.5小時后，用蒸餾水洗至pH6.7，然后經(jīng)1.5M?NaOH處理0.5小時后，用蒸餾水洗至pH7.3，然后過濾除去蒸餾水，加入瓊膠液，在80攝氏度下保溫攪拌2小時；

3)解吸：過濾得DEAE陰離子交換樹脂，加入1L2.0M?EDTA-2Na，然后在80攝氏度保溫攪拌2小時，過濾后得濾液；

4)濃縮精制：上述濾液經(jīng)截留分子量為10KDa的中空纖維膜濃縮至0.3L，加入0.9L零攝氏度預(yù)冷的95％(v／v)的乙醇溶液，將所得沉淀經(jīng)干燥、粉碎后即得到瓊膠半乳聚糖硫酸酯。

其中，本實施例1中瓊膠半乳聚糖硫酸酯的提取率為31.70％，該多糖的半乳糖含量為76.07％，硫酸根含量為23.52％。

實施例二

本實施例采用以下方法，其中包括以下步驟：

1)膠液配置：配置1％(w／v)瓊膠溶液1L，在100攝氏度下進(jìn)行溶解，在70攝氏度保溫，

2)吸附：DOWEX1-X8陰離子交換樹脂1kg經(jīng)1M?HCl處理1小時后，用蒸餾水洗至pH6.8，然后經(jīng)1M?NaOH處理1小時后，用蒸餾水洗至pH7.2，過濾除去蒸餾水，然后加入瓊膠液，在70攝氏度保溫攪拌3小時，

3)解吸：過濾得DOWEX1-X8陰離子交換樹脂，加入1L1.0M?EDTA-2Na，在70攝氏度保溫攪拌3小時，過濾得濾液，

4)濃縮精制：上述濾液經(jīng)截留分子量為20KDa的中空纖維膜濃縮至0.2L，加入0.6L零攝氏度預(yù)冷的95％(v／v)的乙醇溶液，將所得沉淀經(jīng)干燥、粉碎后得到瓊膠半乳聚糖硫酸酯。

其中，本實施例2中瓊膠半乳聚糖硫酸酯的提取率為26.68％，該多糖的半乳糖含量為78.22％，硫酸根含量為21.64％。