[發明專利]兔源性纖維成分熒光定量PCR定性檢測方法

有效

• 申請號: 201310419350.7
• 申請日: 2012-04-18
• 公開（公告）號: CN103820537A
• 公開（公告）日: 2014-05-28
• 發明（設計）人: 唐敏峰;費靜;楊娟;陸維民;王小平;葉尚華;高友軍;劉錦瑞
• 申請（專利權）人: 上海出入境檢驗檢疫局工業品與原材料檢測技術中心;中華人民共和國新疆出入境檢驗檢疫局;河北出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 上海華工專利事務所(普通合伙) 31104
• 代理人: 應云平

1.一種狐源性纖維成分熒光定量PCR的定性檢測方法，包括以下步驟：

步驟一、以狐貍毛的DNA為模板，進行PCR擴增；

步驟二、檢測擴增產物的熒光信號；

其特征在于，用于PCR擴增的反應體系中含有擴增狐源性纖維成分特異性引物對和狐源性纖維成分特異性探針。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述擴增狐源性纖維成分特異性引物對的序列如SEQ?ID?NO：4和SEQ?ID?NO：5所示。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述狐源性纖維成分特異性探針的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：6所示。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述PCR擴增的條件如下：

反應體系：ABI?Taqman?universal?PCR?master?mix(2×)10μl，DNA模板2μl，引物1.6μl（10μM），探針2μl（2μM），ddH₂O4.4μl；

反應的條件為：95℃，5min；95℃，15s，63℃，45s，40個循環。

5.一種狐源性纖維成分的檢測試劑盒，含有以下試劑：

（a）擴增狐源性纖維成分特異性引物對；

（b）狐源性纖維成分特異性探針。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括：

（c）標準參照物。

7.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述擴增狐源性纖維成分特異性引物對的序列如SEQ?ID?NO：4和SEQ?ID?NO：5所示。

8.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述狐源性纖維成分特異性探針的核苷酸序列如SEQ?ID?NO：6所示。

9.如權利要求5～8中任一項的試劑盒的應用，用于檢測在皮草中是否存在狐源性纖維成分。

10.一種如權利要求1所述的狐源性纖維成分熒光定量PCR的特異性引物和特異性探針，其特征在于，

所述狐源性纖維成分特異性引物的序列如SEQ?ID?NO：4和SEQ?IDNO：5所示；

所述狐源性纖維成分特異性探針的序列如SEQ?ID?NO：6所示。