[發明專利]細胞培養改良

無效

• 申請號: 201310414890.6
• 申請日: 2007-09-13
• 公開（公告）號: CN103555652A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: I.A.布拉;J.C.馬杜克;J.C.范;C.史丘茲;N.A.洛依;D.F.布魯頓;J.麥因泰爾;張幼翔;T.希沃斯特
• 申請（專利權）人: ABBVIE公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12P21/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 權陸軍

1.包含A部分、B部分和C部分的無血清細胞培養基，其中：

a)A部分基本由排除下列組份的經修飾基礎培養基組成：碳酸氫鈉、緩沖劑、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、滲透壓調節劑、表面活性劑及單糖葡萄糖；

b)B部分基本由無機鐵來源組成；及

c)c部分包含重組生長因子；緩沖劑；滲透壓調節劑；能量來源；及至少兩種不同的非動物源水解產物。

2.一種用于生產蛋白的方法，其包含在權利要求1的細胞培養基中培養哺乳動物細胞。

3.一種無血清細胞培養基，其包含：

a)基礎培養基；

b)約8-12ml/kg或116-126mg/L檸檬酸鐵；

c)約2-6mg/kg重組人胰島素；

d)約2-5g/kg無水葡萄糖；

e)約0.1-0.5g/kg?L-谷氨酰胺；

f)約1-3g/kg碳酸氫鈉；

g)約0.01-0.05g/kg?NaH₂PO₄·H₂O；

h)約0.4-0.5g/kg?Na₂HPO₄·7H₂O；及

i)約1.0-3.0g/kg酵母源水解產物。

4.一種用于產生蛋白的方法，其包含：

a)在權利要求3的培養基中培養包含編碼該蛋白的核酸的哺乳動物細胞；及

b)將(a)的培養物轉移至細胞培養生產培養基中，

以生產所述蛋白。

5.一種無血清細胞培養生產培養基，其包含：

a)排除下列組份的經修飾基礎培養基：碳酸氫鈉、緩沖劑、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、滲透壓調節劑、表面活性劑和單糖葡萄糖；

b)約8至12ml/kg或122.45mg/L檸檬酸鐵；

c)約4至8mL/kg或10至14mg/kg重組人胰島素；

d)約5至9g/kg無水葡萄糖；

e)約0.5至0.7g/kg?L-谷氨酰胺；

f)約1至2g/kg碳酸氫鈉；

g)約1至2g/kg?HEPES；

h)約2至3g/kg?NaCl；

i)約0.5至2g/kg?Pluronic?F-68；

j)約0.01至0.1g/kg?NaH₂PO₄·H₂O；

k)約0.4至0.5g/kg?Na₂HPO₄·7H₂O；

1)約8至12g/kg酵母源水解產物；及

m)約60至70g/kg植物源水解產物。

6.一種無血清細胞培養基，其包含：

a)排除下列組份的經修飾基礎培養基：碳酸氫鈉、緩沖劑、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、滲透壓調節劑、表面活性劑和單糖葡萄糖；

b)約8至12ml/kg或122.45mg/L檸檬酸鐵；

c)約3至5mL/kg或6至8mg/kg重組人胰島素；

d)約5至9g/kg無水葡萄糖；

e)約0.1至2g/kg?L-谷氨酰胺；

f)約1至2g/kg碳酸氫鈉；

g)約1至2g/kg?HEPES；

h)約2至3g/kgNaCl；

i)約0.1至2g/kg?Pluronic?F-68；

j)約0.01至0.1g/kg?NaH₂PO₄·H₂O；

k)約0.4至0.5g/kg?Na₂HPO₄·7H₂O；

1)約0.4至0.5g/kg?L-天冬酰胺一水合物；

m)約2至6g/kg酵母源水解產物；及

n)約2至4g/kg植物源水解產物。

7.一種用于生產蛋白的方法，其包含在權利要求6的細胞培養基中培養包含編碼該抗體的核酸的哺乳動物細胞。