[發(fā)明專利]一種魔芋多肽提取物、制備方法及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310414063.7
• 申請日: 2013-09-12
• 公開（公告）號: CN103436582A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬杰坤
• 申請（專利權(quán)）人: 馬杰坤
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;A61K38/00;A61K36/888;A61K45/00;A61P3/10;A61P9/10;A61P1/16;A61P13/12
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利代理有限公司 44202
• 代理人: 張帥

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥生物領(lǐng)域，具體涉及一種從魔芋飛粉中提取魔芋多肽提取物的方法，及其由此方法獲得的魔芋多肽提取物和該魔芋多肽提取物的用途。

背景技術(shù)

糖尿病(diabetes?mellitus，DM)是一組由環(huán)境和遺傳因素共同作用引起的綜合征，其基本病理特點(diǎn)為胰島素分泌絕對或相對不足，或外周組織對胰島素不敏感，引起以糖代謝紊亂為主，包括脂肪、蛋白質(zhì)代謝紊亂的一種全身性疾病。糖尿病控制與并發(fā)癥的臨床試驗(yàn)（DCCT）、英國前瞻性糖尿病研究（UKPDS）等多項(xiàng)循證醫(yī)學(xué)研究已使人們對強(qiáng)化血糖控制的意義達(dá)成共識，血糖達(dá)標(biāo)不僅可以預(yù)防或延緩糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)生，提高患者的生活質(zhì)量，而且會大大降低糖尿病相關(guān)的醫(yī)療費(fèi)用。然而現(xiàn)實(shí)中糖尿病患者的血糖達(dá)標(biāo)率較低。注射胰島素是治療糖尿病的方法之一，但是臨床治療中發(fā)現(xiàn)，胰島素注射本身也存在如下問題：（1）只能降低注射期間的血糖，不能完全按血糖變化曲線控制血糖；（2）容易產(chǎn)生低血糖；（3）胰島素的吸收穩(wěn)定性差，吸收差異達(dá)52%；（4）不能有效控制并發(fā)癥。口服降糖藥治療糖尿病是一種長期的治療和維持過程，但是單純依靠口服降糖已經(jīng)無法達(dá)到強(qiáng)化治療的目標(biāo)，主要由于長期口服降糖藥物產(chǎn)生的耐藥性和副反應(yīng)造成的。因此，尋求更為有效的降糖藥物是迫切的。

糖化血紅蛋白是血液葡萄糖等己糖分子通過非酶作用，經(jīng)細(xì)胞膜與紅細(xì)胞內(nèi)血紅蛋白β鏈纈氨酸結(jié)合形成的產(chǎn)物，其中糖化血紅蛋白（HbA1c）約占70％，其高低與血糖濃度和持續(xù)時間成正比，廣泛用于糖尿病控制程度的判斷和估計(jì)血管合并癥的危險。近年來，由于HbAlc檢測方法的改進(jìn)及標(biāo)準(zhǔn)化的推行，高壓液相層析法由于其穩(wěn)定性好而在臨床檢測中逐漸得到應(yīng)用，美同臨床化學(xué)協(xié)會糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化分會和IFCC?HbA1c標(biāo)準(zhǔn)化工作組建議糖化血紅蛋白其作為檢測糖化血紅蛋白的“金標(biāo)準(zhǔn)”。

魔芋飛粉是在魔芋精粉加工過程中產(chǎn)生的重量輕、顆粒小的粉末，占魔芋精粉的30%～40%，年產(chǎn)量約為1500～2000噸，多以低價飼料或作為干燥劑出售，利用價值低。目前研究發(fā)現(xiàn)，魔芋飛粉含粗蛋白質(zhì)22.98％，粗纖維3.23％，是一個含高蛋白、低纖維重要資源，也是生產(chǎn)活性多肽的良好原料。

目前，采用魔芋飛粉提取魔芋多肽的方法有酸水解法、堿水解法以及簡單的一步酶解方法。但在堿水解過程中，多數(shù)氨基酸受到不同程度的破壞，并且產(chǎn)生消旋現(xiàn)象，所以在生產(chǎn)中基本不采用此法。酸水解一般是用鹽酸在沸騰的條件下水解，然后冷卻水解物。其優(yōu)點(diǎn)是水解效率高，不引起氨基酸的消旋作用，得到的是L-氨基酸，但是部分氨基酸會完全被破壞，且由于鹽酸腐蝕性強(qiáng)，要求水解設(shè)備必須有很強(qiáng)的抗腐蝕性能，所以酸水解法在生產(chǎn)中的應(yīng)用受到了很大的限制。酶水解所需的條件則較溫和，不產(chǎn)生消旋作用，也不破壞氨基酸，且水解時間短，產(chǎn)物顏色淺，容易控制水解的程度。但目前采用酶解制備魔芋蛋白多肽過程中較多采用單一酶系，且存在選用的水解酶不合理，造成魔芋蛋白水解不徹底，生產(chǎn)周期嚴(yán)重延長的現(xiàn)象。

徐懷德等在《酶解魔芋飛粉蛋白制備ACE抑制肽》（食品科學(xué)，2010年第31卷第1期第157～160頁）一文公開了一種從魔芋飛粉提取制備魔芋多肽粉及其作為ACE抑制劑的技術(shù)方案，酶解過程為一步酶解過程，且選用堿性蛋白酶，大部分多肽的分子量在2500道爾頓以下，均為20個以下氨基酸組成的多肽鏈。經(jīng)過檢測，該制備獲得的魔芋多肽粉中多肽的含量較低，僅達(dá)到52.67%。

趙姍姍等在《酶解魔芋飛粉制備高F值多肽最佳工藝條件的研究》（生物技術(shù)，2006年，第16卷第3期第67～69頁）一文中公開了一種從酶解魔芋飛粉制備高F值寡肽的方法，該方法中以魔芋飛粉為原料，采用Tris-HCl浸提法提取蛋白質(zhì)，然后經(jīng)過第一步酶解和第二步酶解，將芳香族氨基酸水解下來，最后用凝膠層析進(jìn)行分離，即得到高F值寡肽制品，且第一步酶解用酶為堿性蛋白酶，第二次酶解用酶為鏈酶蛋白酶。由此可見，該工藝最后是采用凝膠層析進(jìn)行分離獲得高F值寡肽制品。

劉紅等在《魔芋葡甘聚糖對四氧嘧啶糖尿病小鼠高血糖的防治作用》（中國藥理學(xué)通報，2002年，第18卷第1期第54～56頁）一文公開了魔芋葡甘聚糖具有治療糖尿病的活性。目前沒有魔芋飛粉可以治療糖尿病的報道，也沒有關(guān)于魔芋多肽提取物具有治療糖尿病功能的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一個目的在于為了提高魔芋多肽提取物中魔芋活性多肽的含量，對從魔芋飛粉中制備魔芋多肽提取物的方法進(jìn)行優(yōu)化，為此，本發(fā)明提供了一種從魔芋飛粉中提取魔芋多肽提取物的方法，它包含如下步驟：

（1）魔芋蛋白提取液的制備：