[發明專利]一種利用內生真菌提高水稻抗鹽堿能力的方法

無效

• 申請號: 201310413224.0
• 申請日: 2013-09-11
• 公開（公告）號: CN103461044A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 李雪梅;卜寧;李玥瑩;馬蓮菊
• 申請（專利權）人: 沈陽師范大學
• 主分類號: A01G16/00
• 分類號: A01G16/00;A01N63/04;A01P21/00
• 代理公司: 沈陽維特專利商標事務所(普通合伙) 21229
• 代理人: 甄玉荃

技術領域

本發明涉及一種利用內生真菌提高水稻抗鹽堿能力的方法，特別涉及利用內生真菌菌液通過苗期浸染根系的方式浸染水稻，提高水稻抵抗鹽堿脅迫的能力，屬于生物技術領域。

背景技術

水稻所結子實即為稻谷，去殼后稱為大米。世界近一半人口，包括幾乎整個東亞和東南亞的人口都以稻米為主食。世界上所產稻米的95%為人類所食用。

水稻由淡水沼澤植物演化而來，屬于甜土植物，對鹽堿脅迫表現中度敏感。苗期是水稻對鹽堿脅迫最敏感的生長時期。在鹽堿化耕地上種植水稻是治堿改土、爭取增產的有效措施。因此，提高水稻品種本身耐鹽堿性是開發利用鹽堿土地資源的有效途徑之一。

目前一方面通過常規育種提高水稻耐鹽堿性，其缺點在于周期長、耗費精力、物力；另一方面通過轉基因的方式提高水稻耐鹽堿性，其缺點在于獲得轉基因植株困難，同時轉基因植物的安全性還存在廣泛爭議。

發明內容

本發明是以解決上述問題為目的，主要解決常規育種方法存在的周期長、成本高及通過轉基因的方式獲得轉基因植株困難等技術問題，而提供一種利用堿蓬內生真菌菌液處理苗期水稻根系的新方法，用本發明處理水稻，可顯著提高水稻的抗鹽堿性。本發明操作簡單、安全、經濟，對土壤環境不引入新污染，不僅能有效提高水稻生物量，還能有效利用鹽堿化土地資源。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案是通過下述步驟實現的：

1）從堿蓬中分離獲得的內生真菌用PDA液體培養基22～26℃，150～180rpm培養10～14天；

2）采用堿蓬內生真菌菌懸液浸染水稻根系；

3）對萌發3～5天的水稻幼苗進行處理；

4）在培養水稻的Hoagland完全營養液中加入3%～15%的菌懸液；

5）將上述菌懸液處理和沒有進行處理的水稻幼苗光照培養14天，對地上生物量干重、葉綠素含量和凈光合速率進行測定。

本發明的特點在于：工序簡單，易于操作，只需將內生真菌的菌懸液加到Hoagland完全營養液中即可；使用的內生真菌是從植物堿蓬莖中分離獲得的，與植物互惠共生，可以提高植物抗性，不會產生二次污染；所用化學藥品是市售的而且使用濃度很低；本發明成本低、工藝簡單，便于大面積處理；效果明顯，經內生真菌菌懸液處理的水稻地上生物量比未經處理增加。

具體實施方式

實施例1

一種利用內生真菌提高水稻抗鹽堿能力的方法，包括以下具體步驟：

1）堿蓬內生真菌用PDA液體培養基24℃，180rpm培養12天；

2）水稻種子于28℃恒溫浸種24h后，于30℃催芽24h。取發芽的水稻種子用Hoagland完全營養液進行培養。于人工氣候箱（培養條件為晝夜溫度28℃/26℃；光照16h；80%相對濕度；光強3000lux）中培養3～5天；

3）將上述菌懸液加入培養水稻的Hoagland完全營養液中浸染水稻根系，菌懸液的終濃度為5%；

將上述菌懸液處理和沒有進行處理的水稻幼苗光照培養14天，無菌懸液處理水稻地上生物量為0.114g/10株、葉綠素含量為2.629mg/g、凈光合速率為9.842μmol?m^-2s^-1，5%菌懸液處理水稻地上生物量為0.127g/10株、葉綠素含量為3.745mg/g、凈光合速率為10.058μmol?m^-2s^-1。經5%內生真菌菌懸液處理的水稻，地上生物量干重提高11.40%、葉綠素含量提高42.45%、凈光合速率提高2.19%。

實施例2

一種利用內生真菌提高水稻抗鹽堿能力的方法，包括以下具體步驟：

1）堿蓬內生真菌用PDA液體培養基24℃，180rpm培養12天；

2）水稻種子于28℃恒溫浸種24h后，于30℃催芽24h。取發芽的水稻種子用Hoagland完全營養液進行培養。于人工氣候箱（培養條件為晝夜溫度28℃/26℃；光照16h；80%相對濕度；光強3000lux）中培養3～5天；

3）將上述菌懸液加入培養水稻的Hoagland完全營養液中浸染水稻根系，菌懸液的終濃度為5%；