[發(fā)明專利]一種姬松茸復(fù)合多糖的制備方法及其產(chǎn)品

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310408218.6
• 申請日: 2013-09-10
• 公開（公告）號(hào): CN103467613A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 嚴(yán)培蘭;王榮談;彭日荷;姚泉洪;劉曼;臧曉韻;蔣春強(qiáng)
• 申請（專利權(quán)）人: 上海瑞豐農(nóng)業(yè)科技有限公司
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00;A61P35/00;A61P37/04;A61K31/715
• 代理公司: 上海開祺知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31114
• 代理人: 費(fèi)開逵

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于保健食品加工技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種姬松茸復(fù)合多糖的制備方法。

背景技術(shù)

姬松茸(agaricus?blazeimurill，ABM)，又稱巴西蘑菇、小松菇、柏氏蘑菇，屬擔(dān)子菌亞門層菌綱傘菌目蘑菇(黑傘)科蘑菇(黑傘)屬，是一種食藥兼用的名貴真菌。原產(chǎn)于美國加利福尼亞州南部、佛羅里達(dá)州海邊草地、巴西東南部圣保羅市周邊的草原以及秘魯?shù)葒＜扇走^去常作為治療癌癥、糖尿病和高膽固醇的藥物，因?yàn)槠涓缓庖哒{(diào)節(jié)和抗腫瘤活性物質(zhì)。

近年來，國內(nèi)外研究人員對姬松茸提取物及作用機(jī)理進(jìn)行了大量的研究。姬松茸多糖是使其具有藥用功效的主要生物學(xué)活性物質(zhì)。據(jù)日本東京大學(xué)醫(yī)學(xué)部國立癌癥研究中心報(bào)道，姬松茸活性多糖的抗癌作用明顯高于其它11種已知具有抗癌作用的大型真菌。研究表明，姬松茸子實(shí)體沸水提取物不但具有刺激小鼠T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素IL-lβ和IL-6的作用，而且能刺激小鼠產(chǎn)生大量抗體。姬松茸多糖可刺激小鼠淋巴細(xì)胞分泌免疫球蛋白IgG和lgM，白細(xì)胞介素IL-6、IL-2和IL-4及干擾素IFN，從而提高了小鼠的免疫功能。進(jìn)一步研究表明，姬松茸多糖可促進(jìn)免疫器官的增殖，延緩其衰退，促進(jìn)遲發(fā)型超敏反應(yīng)的發(fā)生，能增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能。因此，姬松茸多糖可以通過增強(qiáng)非特異性免疫和促進(jìn)細(xì)胞免疫來發(fā)揮作用。姬松茸多糖的抗腫瘤活性，存在濃度和時(shí)間的依賴性。隨著姬松茸多糖添加量的增多和作用時(shí)間的延長，其對腫瘤的抑制作用也加強(qiáng)。

從姬松茸中提取的多糖，常含有蛋白質(zhì)組分。采用熱水浸提法對姬松茸子實(shí)體進(jìn)行分離純化，從紅外光譜和高壓液相層析測定，其中一種成份是α-型吡喃環(huán)多糖，相對分子量為52500，氣相色譜分析表明，其單糖組成為葡萄糖、甘露糖、半乳糖及少量阿拉伯糖。通過分級(jí)醇沉和凝膠過濾法從姬松茸子實(shí)體中分離出3種成份：ABM-I、ABM-II及ABM-Ⅲ，其分子量分別為>2.0×10⁶、1.4×10⁶和3.8×10⁵，對ABM-I組分的結(jié)構(gòu)進(jìn)行完全酸水解和光譜法分析，表明其含有少量結(jié)合蛋白，其主鏈為α型1→6-D-吡喃葡聚糖。姬松茸多糖主要由α構(gòu)型構(gòu)成，只有少量β構(gòu)型。其主鏈部分主要由1→6-Gal、1→6-Glc、1→2，6-Gal構(gòu)成，分支點(diǎn)糖殘基是1→2，6-Gal。1→Man、1→Gal形成主鏈的非還原末端，支鏈為1→6-Glc、1→6-Gal、1→6-Man及少量1→3-Man、1→2-Gal，該多糖能夠提高小鼠的免疫功能。

真菌多糖的獲得方法一般分兩種：一是從固體培養(yǎng)的子實(shí)體中提??；二是通過液體發(fā)酵獲得。目前國內(nèi)外對姬松茸多糖的研究主要集中在子實(shí)體提取，近幾年來，相繼有學(xué)者在液體深層發(fā)酵方面進(jìn)行了研究。相對于從子實(shí)體提取多糖，液體深層發(fā)酵具有以下幾方面的優(yōu)勢：1)生產(chǎn)成本低，原料來源廣，2)生產(chǎn)迅速，生產(chǎn)周期大為縮短；3)生產(chǎn)過程不受地域性及季節(jié)性限制，勞動(dòng)強(qiáng)度小，可進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)；4)有效減少污染，由于食用菌栽培過程中會(huì)富集重金屬，導(dǎo)致重金屬超標(biāo)。鄒積宏等對不同來源的姬松茸菌體多糖含量進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)采用深層發(fā)酵法培養(yǎng)姬松茸菌絲體提取出的多糖含量比鮮品子實(shí)體、干品子實(shí)體所得到的多糖含量要高（黑龍江醫(yī)藥，2008），表明液體發(fā)酵能夠大規(guī)模生產(chǎn)姬松茸多糖，實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。

多糖的藥效活性與其分子結(jié)構(gòu)和分子量水平密切相關(guān)。研究表明較大分子量（200萬左右）和較小分子量（1萬-5萬）的姬松茸多糖均有較高的腫瘤抑制率（Takashi,Agric?Biol?Chem,1990）。因此，了解姬松茸子實(shí)體多糖的分子量情況及各段分子量多糖的質(zhì)量分布情況對其大規(guī)模的開發(fā)生產(chǎn)有著非常大的參考價(jià)值。比較不同來源的姬松茸粗多糖的HPLC譜圖發(fā)現(xiàn)，菌絲體多糖和胞外多糖中分子量小的組分含量相對較高，而子實(shí)體粗多糖中分子量大的組分含量較高（孫培龍，浙江大學(xué)博士論文，2007）。因此，開發(fā)一種包含各級(jí)分子量多糖成分的姬松茸復(fù)合多糖，對于開發(fā)姬松茸多糖在醫(yī)藥領(lǐng)域和保健品行業(yè)中的應(yīng)用具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種姬松茸復(fù)合多糖的制備方法，通過該方法制備的各級(jí)分子量范圍內(nèi)多糖成份均勻的姬松茸復(fù)合多糖，能廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥領(lǐng)域和保健品行業(yè)中。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是：

一種姬松茸復(fù)合多糖的制備方法，包括以下步驟：

（1）利用液體深層發(fā)酵培養(yǎng)姬松茸菌絲體，從培養(yǎng)的姬松茸菌絲體中提取多糖A；