[發明專利]多壁碳-聚苯胺-殼聚糖/納米金膠復合修飾免疫傳感器的制備

有效

• 申請號: 201310407855.1
• 申請日: 2013-09-10
• 公開（公告）號: CN103472220A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 孫霞;王相友;喬璐;郭業民;趙文蘋
• 申請（專利權）人: 山東理工大學
• 主分類號: G01N33/531
• 分類號: G01N33/531;G01N33/577
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.多壁碳-聚苯胺-殼聚糖/納米金膠復合修飾免疫傳感器的制備，其特征在于：一種新型的多壁碳-聚苯胺-殼聚糖納米復合材料和納米金膠的制備，制備步驟為：

1）多壁碳-聚苯胺-殼聚糖納米復合膜的制備：

采用原位聚合的方法制備聚苯胺包裹的多壁碳納米復合材料，苯胺單體在使用之前在低壓真空下提純，120mg多壁碳以及1g苯胺單體同時加入到20mL?1M?的鹽酸溶液中，超聲2h形成均勻分散的溶液，然后將溶液置于冰浴攪拌，待溶液冷卻后加入溶有過硫酸銨的鹽酸溶液，其中過硫酸銨的物質的量與苯胺單體物質的量比例為1：1，為了能讓苯胺單體完全聚合，溶液在0-5°C冰浴中持續恒力攪拌反應12h，聚合后的溶液抽濾收集產物，并依次用去離子水、甲醇和丙酮洗滌，最后真空干燥12h，將殼聚糖溶于1.0%的醋酸溶液中，配制成0.5%?殼聚糖溶液，室溫下磁力攪拌至殼聚糖完全溶解，稱取10mg多壁碳-聚苯胺加入到10mL?0.5%?殼聚糖溶液中，超聲分散8h得到分散均勻的多壁碳-聚苯胺-殼聚糖納米復合液;

2)?納米金膠的制備：

采用檸檬酸三鈉熱還原氯金酸的方法，所有的玻璃器皿均用王水浸泡過夜，再用12mol/L的氫氧化鈉水溶液浸泡2h，洗滌干凈備用，將98mL去離子水和2mL?50mM氯金酸溶液混合，快速攪拌下加熱至亞沸狀態，即產生回流時，迅速加入10mL?38.8mM的檸檬酸三鈉溶液，混合物加熱至沸騰后，繼續攪拌20min，這個過程中溶液由淡黃色轉為無色，然后變灰黑色，最后成酒紅色，除去熱源后繼續攪拌至室溫下慢慢冷卻，將冷卻后的金膠溶液置于干凈的棕色玻璃瓶中于4°C冰箱中避光保存備用，數月有效。

2.如權利要求1所述的多壁碳-聚苯胺-殼聚糖/納米金膠復合修飾免疫傳感器的制備，其特征在于：利用納米金膠和多壁碳-聚苯胺-殼聚糖納米復合膜協同作用共同修飾電極的免疫傳感器制備步驟為：

取7μL制備好的多壁碳-聚苯胺-殼聚糖納米復合膜滴涂在預處理好的玻碳電極表面，常溫下靜置2h，用PH=7.5的磷酸鹽緩沖液沖洗電極表面；電極表面晾干后，取7μL納米金膠滴涂在電極表面，常溫下靜置1.5h，然后用PH=7.5的磷酸鹽緩沖液沖洗表面，氮氣吹干；將上述經納米材料修飾好的電極沉浸在毒死蜱單克隆抗體溶液中，4°C條件下浸泡8-12h，取出后用磷酸鹽緩沖液沖洗表面，晾干待用；最后將上述制備好的電極浸于0.5%的牛血清蛋白溶液中，室溫下靜置2h，以封閉非特異性結合位點，取出置于室溫下晾干，免疫傳感器制作完成，保存在4°C條件下備用。